- Cyclin G_2表达载体的构建及其对乳腺癌MCF-7细胞的作用
- 2011年
- 目的构建包含Cyclin G2基因的真核表达载体,探讨其对乳腺癌MCF-7细胞体外增殖的作用。方法运用RT-PCR和基因克隆技术构建pDsRed2-Cyclin G2重组质粒,脂质体法转染至MCF-7细胞中,荧光显微镜下观察其蛋白的表达及定位;AnnexinⅤ-FITC染色流式细胞术检测细胞凋亡率。结果成功构建了pDsRed2-Cyclin G2融合表达质粒,转染MCF-7细胞后散在分布于细胞质和细胞,核转染重组质粒的MCF-7细胞凋亡率明显增高(P<0.01)。结论 Cyclin G2重组质粒转染至MCF-7细胞后能有效促进细胞凋亡。
- 魏娜郑洪汤英姿
- 关键词：乳腺肿瘤真核表达载体凋亡
- cyclin G2荧光蛋白重组质粒的构建及其对宫颈癌HeLa细胞的作用被引量：1
- 2011年
- 目的构建包含人cyclin G2基因的荧光蛋白重组质粒,探讨cyclin G2对宫颈癌He-La细胞凋亡的影响。方法运用RT-PCR和基因克隆技术构建pDsRed2-Cyclin G2重组质粒;脂质体法转染重组质粒至HeLa细胞中,荧光显微镜下观察其蛋白的表达和定位;流式细胞术检测HeLa细胞的凋亡率。结果成功地构建了pDsRed2-Cyclin G2荧光蛋白重组质粒,其融合蛋白在HeLa细胞中的定位为弥漫分布在细胞核和细胞质。转染重组质粒能够促进HeLa细胞的凋亡。结论外源性cy-clin G2转染至HeLa细胞中可促进其凋亡,抑制细胞增殖。
- 魏娜郑洪汤英姿
- 关键词：CYCLIN重组质粒
- cyclin g2在乳腺病变中的表达及其对mcf-7细胞的作用
- 目的：肿瘤的发生与细胞增殖失控、分化障碍及凋亡受阻密切相关，近年来与细胞增殖、凋亡有关的周期蛋白成为研究癌症发生的热点之一。细胞周期蛋白g2(cyclin g2)是新发现的周期蛋白g家族成员之一，与传统周期蛋白促进细胞增...
- 魏娜
- 关键词：乳腺病变蛋白表达MCF-7细胞
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- XIAP、OMI/HTRA2蛋白对HeLa细胞的影响及两种蛋白间相互作用被引量：5
- 2012年
- 目的探讨XIAP、Omi/HtrA2、米非司酮对HeLa细胞凋亡的影响以及XIAP、Omi/HtrA2的相互作用。方法细胞转染、米非司酮诱导HeLa细胞凋亡,利用共聚焦显微镜及流式细胞术观察XIAP、Omi/HtrA2在细胞内的表达和定位,并检测其对HeLa细胞凋亡影响的情况,使用共聚焦显微镜检测XIAP、Omi/HtrA2的相互作用。结果 (1)在转染了重组质粒pDsRed2-XIAP、pDsRed2-Omi/HtrA2的HeLa细胞中,加入米非司酮后其凋亡率分别是:只加米非司酮组为46.16%;米非司酮+转染质粒pDsRed2-XIAP为26.41%;米非司酮+转染质粒pDsRed2-Omi/HtrA2为78.85%。(2)利用共聚焦显微镜检测XIAP、Omi/HtrA2在HeLa细胞中存在能量共振转移现象。结论米非司酮能促进HeLa细胞凋亡;DsRed2-XIAP融合蛋白能够抑制由米非司酮诱导的HeLa细胞凋亡;DsRed2-Omi/HtrA2融合蛋白能够促进HeLa细胞凋亡,米非司酮能增加Omi/HtrA2促凋亡作用。在活HeLa细胞中,利用荧光共振能量转移技术直接证实XIAP与Omi/HtrA2在部分细胞中存在相互作用。
- 汤英姿郑洪魏娜于晓东
- 关键词：凋亡荧光共振能量转移
- cyclin G2在乳腺病变组织中表达及其对MCF-7细胞的作用
- 2011年
- 目的研究细胞周期蛋白G2(cyclin G2)在乳腺病变中的表达及意义,探讨cyclin G2对乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响。方法用免疫组化SP法检测cyclin G2在人乳腺不同病变中的蛋白表达,并进行显微图像分析;利用阳离子介导的脂质体法转染pDsRed2-cyclin G2融合基因至人乳腺癌细胞系MCF-7细胞中,流式细胞术检测MCF-7细胞的凋亡率。结果 (1)cyclinG2在乳腺增生症中的阳性表达率及表达强度与正常乳腺组织相当,而在导管原位癌(ductal carcinoma in situ,DCIS)以及浸润性导管癌(invasive ductal carcinoma,IDC)中表达逐渐下降,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)转染了重组质粒pDsRed2-cyc-lin G2的MCF-7细胞凋亡率明显增高(P<0.01)。结论 cyclin G2蛋白表达随着乳腺疾病恶性程度增加而降低,外源性转染cyclin G2至MCF-7细胞中可促进其凋亡,抑制细胞增殖。
- 魏娜郑洪汤英姿刘华庆
- 关键词：乳腺疾病CYCLING2
- Cyclin G2在乳腺不同病变组织中的表达及其对MCF-7细胞的作用
- 本实验采用:(1)免疫组化染色SP法,检测Cyclin G2在人乳腺不同病变组织中的蛋白表达。(2)培养肾小管上皮细胞HK-2,获取总RNA,采用RT-PCR技术和基因克隆技术构建pDsRed2-Cyclin G2融合基...
- 魏娜郑洪汤英姿
