张亦农 作品数:41 被引量:29 H指数:3 供职机构: 华中科技大学同济医学院基础医学院 更多>> 发文基金: 国家杰出青年科学基金 国家自然科学基金 湖北省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 一般工业技术 更多>>
两种噪声刺激对豚鼠听觉早期损伤的比较 被引量:1 2007年 目的比较相同强度的不同噪声刺激后豚鼠听力和耳蜗外毛细胞损伤程度。方法将19只豚鼠分为娱乐噪声组(8只)、白噪声组(7只)和正常对照组(4只),白噪声组和娱乐噪声组声刺激平均强度均为105dBSPL,5小时/天,连续给声刺激5天。各组豚鼠在给噪声前及连续给噪声刺激5天结束后进行ABR和DPOAE检测,并在测试结束后取耳蜗应用异硫氰光素标记的鬼笔环肽(phalloidin-FITC)标记表皮板和静纤毛,应用碘化丙啶(PI)标记外毛细胞核,在激光共聚焦显微镜下观察毛细胞受损情况(包括核肿胀、核固缩、核缺失)。结果白噪声组和娱乐噪声组两种噪声刺激前后豚鼠ABR阈值分别为17.5±3.80、16.88±4.03dBSPL和64.64±5.36、45.94±4.55dBSPL;两组刺激前后DPOAE幅值均有所下降(P<0.05),且白噪声组比娱乐噪声组更为明显。白噪声组可观察到大量核肿胀和核固缩的外毛细胞及核缺失的毛细胞,娱乐噪声组观察到受损外毛细胞以核固缩为主,损伤总数远远低于白噪声组。结论相同强度白噪声和娱乐噪声刺激均可造成豚鼠一定程度的听力损失,娱乐噪声刺激后外毛细胞损伤以早期病变为主,其受损程度低于白噪声组。 倪坤 黄红彦 冰丹 王春芳 张平 张亦农关键词:白噪声 毛细胞 突变亨廷顿蛋白在亨廷顿病发病中的作用 李和 李世华 叶翠芳 张亦农 汪薇曦 该项目首次确定mHtt能在神经元轴突和轴突终末内形成神经毡聚集物,并发现mHtt神经毡聚集物的密度与HD病情进展密切相关;证明了mHtt核内聚集物和神经毡聚集物均由较短的mHtt氨基末端片段形成,与其中间段和羧基末端无关...关键词: 关键词:亨廷顿病 亨廷顿蛋白 神经退行性变 链脲佐菌素敏感的胰岛细胞表达亨廷顿蛋白相关蛋白1 被引量:7 2006年 目的探讨亨廷顿蛋白相关蛋白1(HAP1)在大鼠胰岛中的定位。方法应用一次性大剂量腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin)的方法选择性破坏大鼠胰岛B细胞复制糖尿病模型,免疫组织化学ABC法显示胰岛内HAP1和胰岛素免疫反应性。结果在正常大鼠胰腺内,HAP1选择性表达于胰岛内,HAP1免疫反应阳性细胞呈短条索状或团状分布在每个胰岛内,主要位于胰岛的中央部,与胰岛B细胞的分布十分相似。注射链脲佐菌素的大鼠,胰岛中含HAP1的细胞数量在注射链脲佐菌素3d后已明显减少,并随着注射后动物存活时间的延长而进一步进行性减少;在注射后4周的大鼠,胰岛中仅有少数散在分布的HAP1免疫反应弱阳性细胞。链脲佐菌素对胰岛中表达HAP1细胞的影响与对表达胰岛素细胞的影响一致。结论HAP1也存在于胰岛内,并主要定位于链脲佐菌素敏感的B细胞内。 刘晶晶 陈樱花 陈小伟 郭剑锋 陈星星 廖敏 张亦农 李和关键词:亨廷顿蛋白相关蛋白1 胰岛素 链脲佐菌素 胰岛 免疫组织化学 寒冷应激对大鼠肾上腺髓质亨廷顿蛋白相关蛋白1表达的影响 被引量:1 2009年 目的探讨亨廷顿蛋白相关蛋白1(HAP1)在大鼠肾上腺髓质的超微结构定位,以及寒冷应激对大鼠肾上腺髓质HAP1表达的影响。方法成年雄性Wistar大鼠14只,2只用于免疫电镜研究,12只用于寒冷实验研究。寒冷实验中,将动物随机分为对照组和寒冷组,每组6只,寒冷组动物放置4℃环境下,12h后用免疫组织化学和Western blotting方法检测大鼠肾上腺髓质HAP1表达的变化。结果免疫电镜结果显示,HAP1免疫反应产物分布在肾上腺髓质细胞分泌颗粒外膜及分泌颗粒间的膜性细胞器上。寒冷组大鼠肾上腺髓质HAP1的表达明显减少,和对照组比较有显著性差异(P&lt;0.01)。结论HAP1可能与肾上腺髓质细胞内分泌颗粒及位于分泌颗粒内的肾上腺素/去甲肾上腺素的运输和释放有关。 廖敏 张亦农 李和关键词:亨廷顿蛋白相关蛋白1 寒冷 肾上腺髓质 免疫电镜 免疫印迹法 HAP1在大鼠胃粘膜内的分布特征及生后发育规律 2004年 亨廷顿蛋白相关蛋白1(huntingtin associated protein 1,HAP1)是一种功能不明的新蛋白质,因其与引起亨廷顿病的突变亨廷顿蛋白(huntingtin)具有相互作用而得名。以前关于HAP1的研究多集中在该蛋白与亨廷顿病神经病理学关系上。我们近来得研究发现,HAP1不仅存在于神经系统内,还分布在内分泌系统。 叶翠芳 许瑞娜 廖敏 汪薇曦 张亦农 李和关键词:亨廷顿病 胃粘膜内 亨廷顿蛋白相关蛋白1 神经病理学 生后发育 常规染色与特殊染色相结合的多种肌组织混合切片的制作 被引量:2 2015年 目的探索一种结合常规染色与特殊染色的多种肌组织混合切片的制作方法。方法取实验动物狗的平滑肌、心肌、骨骼肌。所有组织均采取单一包埋制作蜡块。另取心肌组织块,制作显示心肌闰盘的特殊块染标本的蜡块。将四种蜡块切片的蜡带进行组合粘片,同时粘在一张载玻片上。对除心肌闰盘外的三种肌组织切片进行苏木素伊红染色。再将所有切片浸入二甲苯,最后共同封片。结果获得常规染色与特殊染色相结合的多种肌组织混合切片。可在一张混合切片上分别观察到平滑肌、心肌、骨骼肌、心肌闰盘四种结构。不同标本的形态结构保存完好,对比非常清晰。结论采取单一包埋与不同蜡带的组合粘片法,过程简单,操作容易,适合制作常规染色与特殊染色相结合的多种肌组织混合切片。 杨世明 张敏海 张亦农 汪薇曦 王小丽关键词:石蜡切片 动态检测活细胞内泛素-蛋白酶体系统活性方法的建立 2009年 目的建立一种动态检测活细胞内泛素-蛋白酶体系统活性的方法。方法将表达绿色荧光蛋白(GFP)或红色荧光蛋白(DsRed_2)的质粒分别改建为表达带有内泛素-蛋白酶体系统降解信号CL1的GFP或DsRed_2的pGFP^u或pDsRed_2~u质粒,然后转染HEK293细胞,通过G418筛选得到稳定表达GFP^u或DsRed_2~u的细胞系。在蛋白酶体抑制剂N-Acetyl-Leu-Leu-Norleu-al(ALLN)处理GFP^u或DsRed_2~u细胞后,应用免疫印记技术检测细胞内GFP或DsRed_2含量的变化,应用荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜技术观察GFP或DsRed_2荧光强度的变化。结果ALLN处理能使GFP^u和DsRed_2~u细胞内GFP和DsRed_2含量明显增加,荧光强度显著增强,并呈现明显的剂量/时间-效应关系。结论本文成功地建立了检测内泛素-蛋白酶体系统活性的方法,该方法能有效地对活细胞的内泛素-蛋白酶体系统活性进行实时动态检测。 章宏峰 张亦农 汪薇曦 贺军 李和关键词:绿色荧光蛋白 红色荧光蛋白 蛋白酶体抑制剂 热休克蛋白水平与突变亨廷顿蛋白聚积和毒性的关系研究 热休克蛋白(heat shock protein,HSP)是分子伴侣的一大家族,是一类能帮助新合成的多肽链正确折叠或纠正错误折叠而维持蛋白质正确构象的蛋白质。亨廷顿病 (Huntington’s disease,HD)是... 叶翠芳 黄珊珊 章宏峰 汪薇曦 张亦农 李和文献传递 寒冷应激对大鼠肾上腺髓质亨廷顿蛋白相关蛋白1表达的影响 <正>亨廷顿蛋白相关蛋白1(Huntingtin-associated protein 1,HAP1)大量存在于肾上腺髓质细胞内。肾上腺髓质细胞包括肾上腺素细胞和去甲肾上腺素细胞,其分泌活动受交感神经节前纤维的控制, 应... 廖敏 汪薇曦 张亦农 李和关键词:亨廷顿蛋白相关蛋白1 寒冷 应激 肾上腺髓质 文献传递 胞浆内非聚集型突变亨廷顿蛋白影响神经细胞的分化 被引量:1 2004年 目的 :探讨胞浆内非聚集型突变亨廷顿蛋白 (huntingtin ,Htt)对神经细胞分化的影响。 方法 :利用磷酸钙沉淀法在培养的小鼠成神经瘤细胞 (N2a细胞 )瞬时或稳定转染编码正常或突变Htt的氨基末端片段的cDNA ,观察突变Htt对视黄酸 (retinoicacid ,RA)和无血清培养刺激N2a细胞突起生长的影响。结果 :在瞬时转染的N2a细胞中 ,2 0Q的正常Htt氨基末端片段弥散分布在胞浆内 ,1 5 0Q的突变Htt氨基末端片段在多数细胞胞浆内形成聚集物。在稳定表达 1 5 0Q的N2a细胞部分克隆中 ,1 5 0Q弥散分布在胞浆内。无论是含突变Htt聚集物的瞬时转染细胞还是仅在胞浆中表达非聚集型突变Htt的稳定转染细胞 ,其突起生长能力均较表达正常Htt的瞬时转染细胞和稳定转染细胞差。结论 :胞浆内非聚集型突变Htt也能影响神经细胞的分化。 叶翠芳 李和 汪薇曦 张亦农关键词:胞浆 亨廷顿蛋白 神经细胞 HTT N2A细胞