郑海华
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鹅白介素-18基因克隆与原核表达研究
- 此前，国内外未见鹅白细胞介素-18(GIL-18)的研究报告，GenBank上未有鹅IL-18基因序列。本研究目的是克隆鹅IL-18基因、构建鹅IL-18基因原核、真核表达质粒，制备重组鹅IL-18免疫血清，为研究鹅IL...
- 郑海华
- 关键词：原核表达免疫血清原核表达质粒真核表达质粒
- 文献传递
- 鹅IL-18基因的克隆和原核表达及其多克隆抗体的制备被引量：2
- 2010年
- 参考GenBank中鸡、火鸡和鸭IL-18基因序列,设计了1对特异引物,以提取的鹅脾细胞总RNA为模板,应用RT-PCR扩增、克隆鹅IL-18基因中间的333bp序列。序列分析结果表明,其与鸭IL-18基因对应序列相似性最高,达99%。参考鸭IL-18全基因序列设计上、下游引物各3条,以梯度PCR探索扩增、克隆鹅IL-18全基因。以上述策略成功扩增、克隆了3个广东地方杂交品种鹅的IL-18基因。序列分析表明,这3个杂交品种鹅的IL-18基因序列一致,长642bp,含一个603bp的ORF,编码200个氨基酸,分子质量为23.2ku。ORFN端的30个氨基酸为前导序列,其余170个氨基酸为功能蛋白序列。在GenBank中注册了第一条鹅的IL-18基因序列,登录号为EF159728。随后,构建了鹅IL-18基因ORF的重组原核表达质粒pET-GIL-18,经诱导表达、纯化获得重组鹅IL-18融合蛋白,并以其制备了兔抗重组鹅IL-18多克隆抗体。
- 郑海华韩先干尹会方周蕾柯艳坤黄青云
- 关键词：IL-18基因克隆原核表达多克隆抗体
- 鸡IL-18真核表达质粒与新城疫病毒F基因疫苗联合免疫探讨被引量：4
- 2009年
- 为探讨鸡IL-18基因真核表达质粒pcDNA-chIL-18在新城疫病毒(NDV)F基因疫苗免疫中的作用,克隆了新城疫病毒标准株F48E9的F基因,构建F基因重组真核表达质粒pcDNA-F;将11日龄试验鸡分为4组,每组10只,14日龄一免,28日龄二免,分别肌注pcDNA-F、pcDNA-F+pcDNA-chIL-18、新城疫传统疫苗(14日龄NDV弱毒疫苗首免,28日龄NDV油苗二免)、生理盐水,一免疫后第7、14、21、28 d均采血进行ND抗体(ELISA)检测和T淋巴细胞转化(MTT)试验;第29 d均肌注50LD50NDV强毒F48E9株.结果显示:免疫保护效率,生理盐水组0/10,pcDNA-F免疫组3/10,pcDNA-F+pcDNA-chIL-18免疫组5/10,新城疫传统疫苗免疫组10/10;ND抗体水平,pcDNA-F免疫组与pcDNA-F+pcDNA-chIL-18免疫组无差异(P>0.05),均显著低于传统疫苗免疫组(P<0.05);T细胞转化水平,pcDNA-F+pcDNA-chIL-18免疫组明显高于pcDNA-F免疫组(P<0.05),pcDNA-F免疫组与传统疫苗免疫组无差异(P>0.05).试验结果综合显示pcDNA-F免疫试验鸡可产生一定程度的免疫保护;pcDNA-chIL-18对pcD-NA-F具有一定的免疫增强作用.
- 谢安新尹会方温纳相黄桂菊赵明秋郑海华黄青云
- 关键词：新城疫病毒F基因基因疫苗
