王菲 作品数:20 被引量:65 H指数:5 供职机构: 贵州医科大学基础医学院微生物学教研室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 博士科研启动基金 贵州省科学技术基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
60例上消化道疾病患者幽门螺杆菌vacA基因分型检测及意义 被引量:2 2009年 目的探讨幽门螺杆菌(HP)空泡毒素(vacA)基因及亚型与上消化道疾病的关系。方法应用聚合酶链反应法测定60例上消化道疾病患者胃黏膜分离获得的HP vacA基因及亚型。用特异的16s rDNA聚合酶链反应进行临床分离HP的菌种鉴定。结果HP vacA基因主要以s1a-m2型为主,除此以外,s1a-m1、s1b-m1、s1b-m2型均有分布。结论HP相关性上消化道疾病患者感染的HP菌株以vacAs1a-m2亚型占优势,检测vacAs1a-m2基因亚型有助于上消化道疾病诊断。 王菲 康沛萍 陈峥宏关键词:基因分型 空泡毒素 上消化道疾病 贵阳地区幽门螺杆菌毒力基因型与上消化道疾病的相关性 被引量:2 2012年 目的研究贵阳地区幽门螺杆菌(HP)中空泡毒素基因(vacA)和毒素相关基因A(cagA)与上消化道疾病间的关系。方法用特异的16SrRNA PCR进行临床分离HP的菌种鉴定,对经过鉴定的152株HP菌株应用PCR进行vacA及其基因亚型、cagA的检测。结果 152株HP中,cagA和vacA阳性率分别为39.5%和100%,vacA sla-m2组合的基因型明显多于s1a-m1、s1b-m2基因型(76.3%vs.15.8%、5.3%)(P<0.05)。不同vacA亚型与慢性胃炎、消化性溃疡及胃癌间未见明显相关性(P>0.05)。结论贵阳地区的HP以cagA阴性、vacA s1a-m2亚型占优势,不同基因型菌株与胃黏膜病变类型无关。 王菲 康沛萍 吴晓娟 陈峥宏关键词:幽门螺杆菌 空泡毒素基因 抗生素致幽门螺杆菌细胞壁缺陷的研究 目的研究抗生素对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)细胞壁的影响,探讨胃部疾病反复发作、迁延不愈的原因。方法将于哥伦比亚血琼脂培养基上微需氧传代培养至对数生长期的幽门螺杆菌NCTC11637、SS1... 吴晓娟 陈峥宏 王菲关键词:抗生素 幽门螺杆菌 文献传递 鼠肺表面活性物质结合蛋白D提取方法的改良及鉴定 被引量:3 2009年 目的:提取及纯化SD大鼠肺灌洗液中表面活性物质结合蛋白D(SP-D)。方法:取SD大鼠肺泡灌洗液,经Tris-HCl-EDTA法提取和maltose-agarose亲和层析法纯化SP-D,用SDS-PAGE电泳及SP-D与幽门螺杆菌的玻片凝集试验鉴定。结果:从SD大鼠肺灌洗液中提取出较高浓度的蛋白,经SDS-PAGE电泳检测,分子量约43 kD,提取的蛋白可与幽门螺杆菌发生明显凝集。结论:采用maltose-agarose亲和层析法可以从SD大鼠肺灌洗液中获得较高纯度的SP-D。 赵亮 陈峥宏 王菲关键词:组织提取物 生物学鉴定法 阿莫西林诱导L型形成对幽门螺杆菌感染治疗效果的影响 被引量:3 2013年 目的探讨不规范使用抗生素导致幽门螺杆菌(Hp)形成L型与感染复发的关系。方法以阿莫西林诱导Hp形成细胞壁缺陷型(即L型),以液体稀释法检测Hp及L型阿莫西林敏感性;以Hp灌胃感染小鼠,分别以生理盐水、常规或低于常规剂量阿莫西林或配伍克拉霉素治疗6d,20d后取胃组织行Hp及L型分离培养、16SrDNA片段PCR和病理学检查。结果阿莫西林对Hp和L型的MIC分别为0.0625和0.125μg/mL;单一阿莫西林治疗和感染对照小鼠胃粘膜L型分离、PCR均阳性,病理学检查呈慢性炎症表现;低剂量治疗和感染对照组均分离出Hp;配伍、盐水对照及空白组各项检测均阴性。结论不规范使用抗生素使Hp发生L型变异,L型生长或返祖可能是导致感染复发的重要原因。 吴晓娟 陈峥宏 王菲 杨廷秀关键词:幽门螺杆菌 阿莫西林 幽门螺杆菌多重耐药株hefA基因表达的检测与分析 被引量:5 2015年 目的了解hefA外排基因表达与贵阳市幽门螺杆菌(Hp)多重耐药的关系。方法提取耐3种抗生素的多重耐药菌株(10株)、敏感菌株(6株)及质控菌株SS1的基因组DNA,PCR扩增hefA基因片段,PCR产物经2%琼脂糖凝胶电泳检测后测序,将测序基因片段序列输入NCBI中进行BLAST比对;利用TRIzol试剂提取上述细菌的RNA并逆转录成cDNA,以16sRNA为内参基因,通过实时荧光定量PCR(Real time PCR)检测hefA基因和内参基因的CT值,通过比较2-ΔΔCT判断多重耐药菌株和敏感菌株hefA基因表达的差异,以两小样本t检验进行统计学分析。结果 2%琼脂糖凝胶电泳显示,6株敏感菌和10株多耐药菌及SS1hefA基因PCR产物均约140bp,测序显示受试菌hefA基因序列与SS1菌株序列的一致性大于96%;RT-PCR检测hefA外排基因的表达,敏感菌株的2-ΔΔCT为0.895±0.540,多重耐药菌株的2-ΔΔCT为3.387±1.597,差异无统计学意义(t=9.399,P<0.05)。结论 hefA外排基因高表达是贵阳地区Hp多重耐药的机制之一。 王欢 毕红燕 潘科 綦廷娜 毕雅坤 王菲 陈峥宏关键词:幽门螺杆菌 多重耐药 实时荧光定量PCR 贵阳地区儿童感染幽门螺杆菌的分离培养及耐药性检测 被引量:4 2015年 目的:了解贵阳地区儿童感染幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)临床分离株对常用抗H.pylori抗生素甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林等的体外敏感性,以指导临床用药根除H.pylori感染.方法:收集2011-10/2014-06贵阳市儿童医院行胃镜检查的患儿胃黏膜标本进行H.pylori分离培养,对分离鉴定后的菌株采用界值法进行甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林、左氧氟沙星的敏感性试验.结果:从434例患儿胃黏膜中培养出H.pylori63株(14.5%),63例H.pylori菌株中3株为敏感菌株,60株为耐药菌株,其对甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林、左氧氟沙星的耐药率分别为57.1%、85.7%、38.1%、90.5%.二重、三重、四重耐药率分别为90.5%(57/63)、57.1%(36/63)、38.1%(24/63).结论:贵阳地区儿童感染H.pylori对阿莫西林敏感性高于对其他常用药物的敏感性;对左氧氟沙星和克拉霉素的耐药率较高,并且多重耐药率较高. 王菲 朱莉 熊妍 綦廷娜 蒋勇 陈峥宏关键词:幽门螺杆菌 药敏试验 耐药性 幽门螺杆菌临床菌株克拉霉素耐药性及耐药基因突变位点分析 被引量:8 2012年 目的检测贵阳地区幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)临床菌株对克拉霉素耐药性及相关基因突变情况。方法采用琼脂稀释法对临床分离鉴定的Hp菌株,进行体外抗生素敏感试验,选取Hp克拉霉素耐药的临床菌株10株、克拉霉素敏感的临床菌株4株和质控菌株2株,进行23SrRNA基因功能区V区片段的PCR扩增和测序,与GenBank中公布的Hp菌株相关序列进行比对分析。结果贵阳地区Hp临床分离株对克拉霉素的耐药率达30.9%(13/42)。贵阳地区10株Hp耐药菌的23SrRNA基因片段的碱基突变包括T2183C(10/10)、T2245C(9/10)、A2144G(6/10)、C2196T(1/10)、A2224G(1/10),4株敏感菌株在2183、2196、2224和2245位点也存在碱基差异,2144位点的基因突变仅存于耐药菌株中。结论贵阳地区Hp克拉霉素耐药率较高,耐药菌株23SrDNA与耐药性相关的基因突变主要为A2144G。 司书梅 张涛 陈峥宏 王菲 吴晓娟 綦廷娜 杨廷秀关键词:幽门螺杆菌 克拉霉素 耐药性 基因突变 贵州省黔南州幽门螺杆菌克拉霉素的耐药性及23S rRNA基因突变的特征 被引量:3 2015年 目的:了解贵州省黔南州幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)克拉霉素耐药相关基因突变情况.方法:采用改良琼脂稀释法检测分离自黔南州人民医院的74株H.pylori对克拉霉素的敏感性,选取H.pylori克拉霉素耐药菌株22株、敏感株10株,以及NCTC11637进行23S rRNA基因功能区V区片段的PCR扩增和测序,与GenBank中收录的H.pylori敏感菌株U27270相关序列进行比对和分析.结果:74株H.pylori克拉霉素耐药率为29.7%(22/74).共发现10种突变类型,其中在耐药菌株及敏感菌株23S rRNA V区均存在的基因突变包括:T2183C、T2245C和T2321C;仅在耐药株(22株)中检测到的突变包括:A2144G(4/22)、A2224G(4/22)、C2196T(1/22)、C2289 T(1/22)、A2435G(1/22)、C2695A(1/22)、T2712C(1/22).结论:黔南州医院分离的H.pylori克拉霉素耐药率较高;与耐药性相关的23S rRNA基因突变主要为A2144G和A2224G;本院菌株存在A2435G、C2695A、T2712C 3种尚未见报道的突变. 綦廷娜 潘科 王菲 魏刚 蒋勇 张人弘 郑娟 张丹丹 陈峥宏关键词:幽门螺杆菌 克拉霉素 耐药性 突变 PCR扩增16SrDNA在幽门螺杆菌感染诊断中的运用 被引量:18 2010年 目的 探讨16SrDNA聚合酶链式反应 (PCR)在幽门螺杆菌(Hp)感染检查中的应用价值.方法 疑似慢性胃炎、胃及十二指肠溃疡患者于胃镜下取其病变部位组织活检标本,胃癌患者于术中取病变部位组织活检标本,进行Hp的分离培养、提取活检组织DNA进行16SrDNA PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳,并将二者结果进行比较.结果 85例病例中,54例16SrDNA PCR阳性,阳性率为63.5%;34例Hp分离培养阳性,阳性率为40%.结论 两种检测方法阳性率相比较,PCR检查法明显优于分离培养法(P<0.005). 吴晓娟 陈峥宏 王菲关键词:幽门螺杆菌 细菌培养 PCR