王立刚
- 作品数：9 被引量：51H指数：5
- 供职机构：黑龙江东北虎林园更多>>
- 发文基金：国家林业局野生动植物保护管理项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 虎源猫泛白细胞减少症病毒灭活疫苗的制备及初步应用被引量：6
- 2009年
- 【目的】研制出虎源猫泛白细胞减少症病毒灭活疫苗并对其应用效果进行评价。【方法】以FPV-HLJ为种毒,按培养液体积1/10(V/V)的接毒量,采用同步接毒的方法接于猫肾传代细胞系F81株,于37℃静置培养,待细胞病变(CPE)达到75%以上时,进行收毒。病毒悬液经甲醛灭活24h,加入佐剂氢氧化铝胶,制备成FPV-HLJ细胞培养灭活疫苗。将灭活苗皮下接种2月龄非免疫家猫,确定其能产生较好的保护后,将该苗接种2月龄左右幼虎。【结果】实验组免疫猫FPVHI抗体水平随免疫次数的增加而呈上升趋势,三免后FPVHI抗体效价为1∶1024～1∶2048,且免疫猫能抵抗FPV强毒攻击,具有100%的存活率。幼虎三免后抗体效价多数能达到1∶1024。【结论】表明此灭活苗可产生较为理想的免疫效果。
- 于亚丽周明张进华育平王立刚刘熠楠刘丹夏咸柱
- 关键词：猫泛白细胞减少症病毒灭活疫苗抗体检测
- 东北虎患膈疝致死亡一例被引量：2
- 2003年
- 刘文良王立刚刘丹王玮邱宏坤张仲峰周明
- 关键词：东北虎膈疝尸检病例
- 圈养东北虎FPV感染情况的初步调查与研究被引量：9
- 2008年
- 猫泛白细胞减少症是由猫泛白细胞减少症病毒引起的高度接触性传染病,近些年来该病严重影响着我国圈养大型野生猫科动物的健康。至今,国内外对大型野生猫科动物的FPV流行状况研究甚少。鉴于此,本研究分别于2006年11月、2007年2月和2007年7月随机收集62份、36份、45份虎粪便,利用PCR方法对其带病情况进行检测。结果表明,FPV的阳性率分别为54.8%,25%和0。在以上实验研究的基础上,对该圈养大型野生猫科动物群体中FPV的感染带毒情况和流行特点进行了探讨。
- 刘丹于亚丽华育平王立刚柴洪亮周明张彦龙王玮
- 关键词：东北虎FPV
- 弓形虫HT分离株ROP5蛋白基因的克隆、序列分析及其表达研究被引量：6
- 2007年
- 目的克隆和表达弓形虫虎源分离株(HT株)ROP5蛋白基因。方法运用RT-PCR技术从弓形虫HT株中扩增出ROP5基因,将其克隆入T载体中进行测序和分析,并将目的基因亚克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中进行诱导表达。结果该基因全长1650bp,编码549个氨基酸。其中前24个氨基酸构成信号肽序列。与GenBank中报道的RH株相比,有12个核苷酸有差异,导致7个氨基酸发生改变,两者核苷酸和推导氨基酸序列的同源性分别为99.2%和98.9%。转化重组质粒pETROP5的大肠杆菌BL21(DE3)在IPTG的诱导下,可表达出相对分子质量为64800的重组蛋白,并且能与弓形虫抗体发生血清学反应,表达量占菌体蛋白的15.6%。结论成功克隆和表达了弓形虫HT株ROP5蛋白基因,表达的重组蛋白具有良好的反应原性。
- 乔军杨松涛高玉伟秦川华育平王立刚刘丹王玮周明夏咸柱
- 关键词：弓形虫分离株
- 黑龙江东北虎林园管理策略探讨被引量：4
- 2007年
- 2006年,黑龙江东北虎林园的东北虎人工饲养种群超过700只,维持其生存的费用巨大,虎林园的管理策略研究应进一步加强。本文从服务管理、营销管理、人力资源管理、科普教育管理、基建管理五个方面进行了探讨。
- 郭玉荣邹红菲吴庆明王立刚
- 关键词：管理策略
- 东北虎幼虎肺炎病原的诊断被引量：3
- 2010年
- 为了研究诱发东北虎幼虎肺炎的主要病原体,加强对我国幼龄动物肺炎的诊断和治疗,试验采用病毒学和细菌学检验方法对我国某动物园因肺炎致死的幼虎进行初步诊断,并采用16S rRNA基因序列分析法对所分离到的菌株进行细菌分类鉴定。结果表明:所分离的菌株与大肠杆菌同源性高达99%。说明大肠杆菌是导致此次东北虎幼虎肺炎的主要病原。
- 朱晓文高玉伟王立刚刘丹王伟周明邬红全刘红侠胡桂学夏咸柱
- 关键词：东北虎病原大肠杆菌RRNA
- 人工喂养幼虎体内细小病毒的分离与序列分析被引量：3
- 2010年
- [目的]鉴定人工喂养幼虎的病原及其序列特征。[方法]应用FPV特异引物对8只哈尔滨虎园人工喂养幼虎的肺组织进行PCR检测,应用猫肾细胞(F81)细胞对PCR检测阳性样品进行病毒分离,并进行序列分析。[结果]从8份样品中均扩增到761bp的核酸片段。进而应用F81细胞从其中的1份样品中分离获得1株猫细小病毒。VP2序列分析表明,该病毒与此前在该虎园分离获得的虎源猫细小病毒同源性高达99.8%。[结论]猫细小病毒对未接受母乳喂养的幼虎威胁严重,应加强对人工喂养幼虎的被动免疫预防。
- 刘丹高玉伟杨松涛王立刚王淑君侯小强刘玉秀王伟周明夏咸柱
- 关键词：细小病毒病毒分离
