杨柳芹
- 作品数：25 被引量：70H指数：5
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- 可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体重组腺病毒载体的构建及其在肝癌细胞株中的表达被引量：1
- 2008年
- 背景:肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)能诱导30余种人类肿瘤细胞凋亡,在抗肿瘤治疗中具有广阔应用前景。目的:构建携带可溶性TRAIL基因的复制缺陷型重组腺病毒载体,鉴定其在肝癌细胞株中的表达。方法:以重叠延伸聚合酶链反应(PCR)扩增白细胞介素(IL)-2信号肽和TRAIL膜外区融合片段,克隆于腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,转化含复制缺陷型腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌pAdBJ5183,经细菌内同源重组产生重组腺病毒Ad-IL-2-TRAIL,以脂质体法转染HEK293细胞包装病毒,感染肝癌细胞株HepG2,荧光显微镜下观察增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达。结果:成功构建了携带可溶性TRAIL基因的复制缺陷型重组腺病毒载体。病毒感染HepG2细胞48h后,超过95%的细胞中出现绿色荧光。结论:所构建的复制缺陷型重组腺病毒Ad-IL-2-TRAIL可在肝癌细胞中高效表达可溶性TRAIL,为进一步行肿瘤TRAIL基因治疗提供了实验依据。
- 杨柳芹房殿春杨仕明汪荣泉彭贵勇陈文生
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体白细胞介素2腺病毒科
- 胃癌细胞NF-κB和survivin的表达对TRAIL抗瘤作用的影响被引量：13
- 2004年
- 目的 探讨胃癌细胞NF κB和survivin的表达对TRAIL抗瘤作用的影响。方法 应用细胞培养和流式细胞仪检测的方法 ,观察胃癌细胞SGC 790 1、MKN2 8、AGS、MKN45经TRAIL作用后细胞凋亡率 ,Westernblot方法分析四种胃癌细胞中NF κB和survivin的表达。结果 TRAIL3 0 0ng ml作用于胃癌细胞 2 4h后 ,胃癌细胞MKN2 8、MKN45、AGS和SGC 790 1的凋亡率分别为 3 6 0 5 %、2 0 2 7%、16 5 0 %和 11 80 %。Westernblot结果显示SGC 790 1细胞NF κB、survivin的表达均高于MKN2 8细胞的表达。结论 TRAIL具有选择性诱导肿瘤细胞凋亡的特性 ,肿瘤细胞对TRAIL的耐药现象 ,可能与凋亡抑制因子survivin和NF κB的表达有关。
- 杨柳芹房殿春
- 关键词：胃癌癌细胞TRAILNF-ΚBSURVIVIN
- 硝普钠与TRAIL联合应用对胃癌细胞凋亡的影响
- 目的探讨硝普钠(SNP)与 TRAIL 联合应用对胃癌细胞凋亡的影响及作用机制。方法采用碘化丙啶(PI)染色,流式细胞仪检测胃癌细胞株 SGC-7901、MKN45、AGS 和 MKN28经 TRAIL 作用后细胞周期及...
- 杨柳芹房殿春杨仕明汪荣泉彭贵勇陈文生
- 文献传递
- 胃癌亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性及其与微卫星不稳的关系被引量：10
- 2005年
- 目的探讨胃癌亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性与微卫星不稳的关系。方法采用聚合酶链反应.限制性片段长度多态性技术检测122例胃癌和101名正常对照的MTHFR 基因C677T和A1298C多态性;采用PCR为基础的方法检测微卫星不稳定性(MSI)。结果MTHFR C677T多态性可分为677CC、677CT和677TT三种类型。胃癌组3种基因型频率分别为47.5%、39.3%和13.1%;对照组分别为48.5%、42.6%和8.9%,两组相比差异无统计学意义(P> 0.05)。以677CC基因型做为参考,胃贲门癌677CT基因型OR值为0.38,95%CI:0.15-0.98;TT 基因型OR值为0.26,95%CI:0.03-2.18;677CT+TT基因型OR值为0.36,95%CI:0.07-0.98。胃体癌677TT基因型OR值为3.03,95%CI:1.07-8.65。MTHFR A1298C多态性可分为1298AA、1298AC和1298CC 3种类型。胃癌组3种基因型频率分别为59.8%、36.1%和4.1%;对照组分别为57.4%,37.6%和5.0%,两组相比差异无统计学意义(P>0.05)。以1298AA基因型的OR值为1.00,胃窦癌AC基因型的OR值为0.87,95%CI:0.42-1.82,CC基因型的OR值为0.41,95%CI: 0.05-3.72。MTHFR 677TT基因型胃癌与微卫星不稳显著相关(P<0.05),而MTHFR A1298C多态性与微卫星不稳无关(P>0.05)。结论重庆地区人群中MTHFR C677T多态性是胃贲门癌的保护因素,是胃体癌的危险因素;MTHFR A1298C多态性可能是胃窦癌的保护因素;677TT基因型胃癌的发生可能涉及到MSI途径。
- 司佩任房殿春张浩杨柳芹罗元辉廖化禹
- 关键词：胃肿瘤亚甲基四氢叶酸还原酶微卫星不稳
- 硝普钠与TRAIL联合应用对胃癌细胞凋亡的影响
- ＜正＞目的:探讨硝普钠（SNP）与TRAIL联合应用对胃癌细胞凋亡的影响及作用机制。方法:采用碘化丙啶（PI）染色,流式细胞仪检测胃癌细胞株SGC-7901、MKN45、AGS和MKN28 经TRAIL作用后细胞周期及细...
- 杨柳芹房殿春
- 文献传递
- TRAIL对结肠癌细胞株SW480的细胞毒作用被引量：3
- 2003年
- 目的:观察TRAIL对结肠癌细胞株SW480的细胞毒作用.方法:采用MTT法检测TRAIL对结肠癌SW480细胞存活分数的影响;TUNEL法检测TRAIL对结肠癌SW480细胞凋亡率的影响.结果:TRAIL能有效地杀伤结肠癌SW480细胞,MTT法显示1000μg/L的TRAIL作用24hSW480细胞存活分数仅为18.7%.TUNEL法均显示0,50,150,500,1500,5000μg/LTRAIL蛋白诱导结肠癌SW480细胞的凋亡率分别为6.7%,29.4%,42.8%,50.8%,84.6%和87.4%;500μg/LTRAIL蛋白于0,6,12,18,24和30h诱导结肠癌SW480细胞的凋亡率分别为7.8%,21.4%,41.8%,60.6%,73.8%和77.3%.TRAIL对结肠癌SW480细胞的作用存在较好的量效关系和时效关系.结论:TRAIL能通过诱导细胞凋亡的方式杀伤SW480细胞,有可能成为有效的抗结肠癌新药.
- 李小安房殿春杨柳芹张汝刚司佩任
- 关键词：TRAIL结肠癌细胞株SW480细胞毒作用
- 硝普钠对TRAIL诱导的胃癌细胞凋亡的影响被引量：3
- 2006年
- 杨柳芹房殿春
- 关键词：胃癌细胞凋亡硝普钠恶性肿瘤细胞病毒感染细胞选择性杀伤
- 胃癌亚甲基四氢叶酸还原酶基因1298AC多态性与H.pylori感染的关系被引量：4
- 2004年
- 目的 探讨重庆地区胃癌人群亚甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR)基因 12 98AC多态性及与H .pylori感染的关系。方法 采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)技术 ,检测 12 2例胃癌和 10 1例正常对照的MTHFR基因 12 98AC多态性 :采用PCR和Warthin Starry银染色法检测幽门螺杆菌 (H .pylori)。结果 胃癌组 12 98AA、12 98AC和12 98CC 3种基因型频率分别为 5 9.8%、3 6.1%和 4.1% ,与对照组中 3种基因型频率 5 7.4%、3 7.6%和 5 .0 %相比无显著差异 (P >0 0 5 )。以 12 98AA基因型的OR为 1.0 0 ,胃窦癌AC基因型的OR为 0 .87( 95 %CI,0 .42～ 1.82 ) ,CC基因型的OR为0 .41( 95 %CI ,0 .0 5～ 3 .72 )。胃癌MTHFR 12 98AC 3种基因型中H .pylori的检出率无明显差别 (P >0 0 5 )。结论 重庆地区人群中MTHFR 12 98AC多态性可能是胃窦癌的保护因素 ,MTHFR 12 98AC多态性与H .pylori感染无关。
- 司佩任房殿春张浩杨柳芹罗元辉廖化禹
- 关键词：亚甲基四氢叶酸还原酶多态性H.PYLORI胃癌
- 肿瘤坏死因子相关配体与阿司匹林合用对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响被引量：9
- 2003年
- 目的 观察肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)与阿司匹林合用对肝癌SMMC-7721细胞的作用。 方法 氨甲喋呤法检测SMMC-7721细胞存活分数;流式细胞仪检测SMMC-7721细胞的凋亡率和细胞周期;Western Blot法检测凋亡相关基因的表达。 结果 单用300 ng/ml TRAIL、3、10 mmol/L阿司匹林SMMC-7721细胞存活分数分别为82.76％、81.34％和71.29％,合用的存活分数分别为43.5％、37.8％。3、10 mmol/L阿司匹林与300 ng/ml TRAIL合用诱导的细胞凋亡率明显大于单用两药诱导的细胞凋亡率之和(单用300 ng/ml TRAIL、3 mmol/L和10 mmol/L阿司匹林凋亡率分别为21.25％、1.89％和6.08％,合用的凋亡率分别34.76％、38.56％)并使G0/G1期细胞增加;3、10 mmol/L的阿司匹林使SMMC-7721细胞Bcl-2的表达明显减弱,但对Bax的表达无影响。 结论TRAIL与阿司匹林合用对肝癌SMMC-7721细胞有明显的协同杀伤作用,其机制可能与阿司匹林抑制Bcl-2的表达有关。
- 李小安房殿春司佩任张汝刚杨柳芹
- 关键词：肿瘤坏死因子阿司匹林肝癌细胞凋亡凋亡诱导配体
- 5-Aza-CdR增强TRAIL对胃癌细胞的抗瘤活性与caspase-8表达的关系被引量：4
- 2005年
- 目的 探讨 5 Aza CdR对凋亡诱导分子TRAIL抗胃癌细胞活性的影响。方法 采用MTT方法检测TRAIL蛋白的抗癌活性 ;采用RT PCR方法检测caspase 8mRNA的表达。结果 TRAIL 2 0 0ng/ml作用 72h对SGc 790 1、Kato 3和AGS胃癌细胞的生长抑制率分别为 9 83 %、11 94%和 4 0 4% ;经 5 Aza CdR处理后 ,对 3株胃癌细胞的抑制率分别提高到3 8 98%、5 2 42 %和 3 0 72 % ;用 5 Aza CdR处理后 3株胃癌细胞caspase 8mRNA表达明显增加。结论 5 Aza CdR能增强胃癌细胞对TRAIL的敏感性 ,其机制可能与caspase 8的表达上调有关。
- 张汝钢房殿春杨柳芹罗元辉
- 关键词：胃癌5-AZA-CDRTRAILCASPASE-8
