李丽雄 作品数:46 被引量:131 H指数:6 供职机构: 深圳市第三人民医院 更多>> 发文基金: 深圳市科技计划项目 深圳市科技局资助项目 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
基因芯片高通量检测乙型肝炎病毒拉米夫定耐药株及对其突变热点的分析 被引量:2 2004年 目的 通过大规模、多位点检测深圳地区拉米夫定耐药株,进一步了解拉米夫定耐药突变的各种分布状况。 方法 用基因芯片法对552份乙型肝炎患者血清进行检测,得出192份拉米夫定耐药突变标本,再对192份耐药标本检测结果进行分析。 结果 192份耐药标本中,191份YMDD突变,124份528位点突变,9份555位点突变。YMDD突变中88%为:YVDD、528位点同时突变;YIDD单独突变;YIDD、528位点同时突变。YMDD突变密码子91%为:GTG、ATT;9%为:ATA、ATC。 结论 552位点(YMDD)突变为核心突变,528、555位点的突变为协同突变。YVDD突变总是与528位点同时出现;YIDD突变则表现为多样化。YMDD突变密码子约有9%为少见密码子ATA、ATC,这可能是传统聚合酶链反应法检测YMDD突变阳性率较低的原因。 李兵 周伯平 彭劲甫 陈立炎 李丽雄 王召钦 王敏 刘赛云 蒋小玲关键词:基因芯片 乙型肝炎病毒 拉米夫定耐药株 基因突变 干扰素治疗慢性乙型肝炎临床反应及疗效预测指标的研究 被引量:41 2003年 目的 总结干扰素治疗慢性乙型肝炎的临床指标变化特点,提出干扰素疗效预测的实用指标。 方法 采用前瞻性对照研究方法,将符合标准的150例患者随机分为治疗组(90例)和对照组(60例)通过治疗前内源性干扰素水平、用药后2,4个月末干扰素中和抗体等指标的测定,分析患者性别、年龄、治疗前丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平及早期变化、HBV DNA定性定量、内源性干扰素水平、用药后2个月末干扰素中和抗体等指标的特点与HBeAg阴转的关系,提出干扰素疗效预测的实用指标。 结果 (1)不同年龄患者HBeAg阴转率差异不大,仅20~30岁与30~40岁年龄段差异有非常显著性(t>2.3312,P<0.01);(2)治疗前转氨酶水平明显升高者对干扰素反应好;与治疗前转氨酶水平相比,开始用药后第2个月末ALT下降幅度超过50%的患者最终HBeAg阴转率提高;(3)治疗前HBV DNA阴性或定量≤106/ml的患者,均有较高的HBeAg阴转率;(4)开始用药后第2个月末干扰素抗体阳性可作为HBeAg无应答的预测指标;(5)采用模糊数学综合评判的理论与方法提出了一个多因素联合预测方案,将其回代用于本组患者的疗效预测,敏感性为8 0%,准确性为90%,优越于单因素疗效预测。 结论 患者在干扰素治疗中临床指标的变化特点有别于西方患者;干扰素疗效与治疗前后转氨酶、HBV DNA水平及干? 何清 陈守春 王松 蒋小玲 许诚 张斌 李丽雄 唐红 杨尧 王文雅 赵连三关键词:干扰素 慢性乙型肝炎 严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒抗体的检测及其临床意义 被引量:3 2003年 To investigate the k inetics of antibody to SARS coronavirus in SARS patients and its clinical implication,ELISA was used to dete ct antibody to SARS coronavirus(SA RS CoV),RT-PCR was used to detect the SARS CoV RNA and,besides,the C D+4 and CD+8 T cells in peripheral blood of SARS patients and healthy controls were assayed by flowcytom etryThe results showed that SARS CoV IgM were first detected from da y 7 to day 47 after SARS onset,wit h average at day 193±101SARS Co V IgG were first detected from day 4 to day 47 after SARS onset,with average at day 207±101,and the p roduction of SARS CoV IgG was corr elated with CD+4 T cell number(P<005),but had no relationship with SARS CoV RNAMost SARS patients pr oduced SARS CoV antibody,IgM produ ced almost at the same time wit h IgGSARS CoV IgG is a protective antibody against SARS CoV and the titer of IgG may be used as an ind ex indicating the specific immunit y production in SARS 陈心春 王火生 李美忠 杨桂林 徐六妹 王辉 李丽雄 周伯平关键词:严重急性呼吸综合征 SARS 冠状病毒 抗体 酶联免疫吸附试验 8.HIV-1病毒的核酸异质性及准种特点的研究 目的 研究Ⅰ型人类免疫缺陷病毒(HIV-1)膜蛋白基因(env)的准种与变异特点.方法 采用巢式PCR方法对5例艾滋病患者血浆HIV-1env基因C2~V3区进行PCR扩增,产物经纯化后克隆至PMD-18T载体中,每例患... 黄慧谦 王辉 陆坚 徐六妹 李丽雄 王火生 周伯平关键词:人类免疫缺陷病毒 基因变异 文献传递 人类免疫缺陷病毒-1的核酸遗传学特点 被引量:4 2006年 目的研究人类免疫缺陷病毒(HIV)-1膜蛋白基因(env)的准种与变异特点。方法采用套式聚合酶链反应(PCR)对5例艾滋病患者血浆HIV-1 env基因C2~V3区进行PCR扩增,产物经纯化后克隆至pMD-18T载体中,每例患者分别挑取5~8个克隆,共34株,完成阳性克隆的鉴定、抽提纯化和测序。将获得的DNA序列及核苷酸序列进行分析,并计算其核苷酸同源替换率(ds)与非同源替换率(dn)的比值。结果同一患者体内HIV准种株平均为83.5%,各克隆株之间的核苷酸同源性在88%~99%之间;不同患者之间的核苷酸同源性在75%~91%;34株序列的V3区平均变异频率明显高于C2~C3区(P<0.05);而V3区和C2~C3区的ds/dn比值均>1。结论艾滋病患者体内有大量HIV准种存在.基因的变异在V3区发生较频繁,免疫选择压力在该区变异中不起主要作用。 王辉 陆坚 徐六妹 李丽雄 王火生 周伯平关键词:人类免疫缺陷病毒 肝癌细胞p15基因CpG岛甲基化研究 2008年 目的通过检测肝癌细胞株HepG2的抑癌基因p15基因启动子区CpG岛的甲基化状态,探讨其与肿瘤发生的可能相关性。方法应用甲基化特异性PCR(MSP)技术,对人肝癌细胞株HepG2的p15基因启动子区域CpG岛的甲基化状态进行检测,以人淋巴瘤细胞株Raji为阳性对照,以正常人外周血单核细胞(PBMC)和肝细胞为阴性对照。结果肝癌细胞HepG2中p15基因启动子区域CpG岛甲基化和非甲基化检测均呈阳性,正常人外周血单核细胞和肝细胞甲基化检测阴性。结论肝癌细胞株HepG2抑癌基因p15基因CpG岛存在高度甲基化,可能与肝癌的发生相关。 王松 许诚 舒丹 何清 叶涛生 李丽雄 周陶友 陈守春关键词:肝癌 DNA甲基化 P15基因 干扰素治疗慢性乙肝临床疗效反应规律以及疗效早期预测指标的研究 何清 蒋小玲 王松 陈守春 许诚 李藕 谢友红 王文雅 杨尧 李丽雄 杨山麦 张彬 谌取鼎 本研究采用前瞻性的对照研究方法,将符合纳入标准的150例患者分为治疗组(90例)和对照组(60例),治疗组经过α干扰素3MU或5MU,每周3次肌注,疗程4-6月,在治疗过程中通过观察肝功能试验、HBVDNA(斑点杂交和定...关键词:关键词:慢性乙肝 α-干扰素联合拉米夫定治疗慢性乙型肝炎的Th1/Th2应答 2004年 目的了解α-干扰素和拉米夫定联合治疗慢性乙型肝炎的短期效果,以及对两种辅助性T细胞(Th1/Th2)细胞因子的表达水平的影响。方法71例HbeAg阳性的慢性乙型肝炎患者随机分成治疗组与对照组。治疗组34例,同时使用α-干扰素和拉米夫定26周,随后单用拉米夫定26周;对照组37例,单用拉米夫定52周。观察其血清生化指标、病毒复制指标及外周血淋巴(PBMC)培养上清液的IFN-γ、IL-4水平。结果两组完全应答率无显著性差异(p=0.08)。两组在治疗3个月时IFN-γ水平均有明显上升(p=0.02,0.01),在治疗6个月时对照组IFN-γ水平明显下降(p=0.03),低于治疗组(p=0.04)。治疗组IL-4水平在第3、6个月明显降低(p=0.01,0.02),而对照组IL-4水平虽有所下降,但差异无统计学意义(p=0.23,0.09)。组间比较发现,两组治疗前、治疗3个月、6个月IL-4水平无差别(p=0.18,0.58,0.14)。结论α-干扰素与拉米夫定联合用药与单用拉米夫定短期疗效并无显著性差异,但联合用药所诱导机体产生的HBV特异性CTL反应较单用拉米夫定更强且持久,提示两组的远期疗效可能会出现差异。 舒丹 杨大国 王松 刘红 李丽雄 戴炜 许诚关键词:乙型肝炎病毒 Α-干扰素 拉米夫定 TH1/TH2细胞 SARS冠状病毒蛋白和受体表达及其免疫学应用研究 陆坚 周伯平 乐晓华 蒋小玲 张瑛 李丽雄 徐六妹 该课题进行ARS冠状病毒蛋白和受体表达及其免疫学应用研究。研究证实,密码子优化SARS冠状病毒S和S1蛋白真核表达质粒可以有效诱导实验动物产生中和抗体,以S蛋白的效价为高;其抗体可能具有阻断SARS冠状病毒侵袭易感细胞的...关键词:关键词:SARS冠状病毒 基因表达 免疫 CD4+CD25+调节性T细胞在HIV/AIDS患者中的作用及其与HIV病毒载量的相关性研究 目的:研究HIV感染者/AIDS患者外周血CD4+D25+调节性T细胞(CD4+CD25+regulatory T cell, Treg)频率、功能及其临床意义。方法:选择3l例HIV感染者/AIDS患者和30例健康对照... 刘水腾 杨桂林 姚红艳 李美忠 徐六妹 李丽雄 王火生 陆普选 周伯平关键词:HIV 病毒载量 CD4 文献传递