孟星宇
- 作品数：23 被引量：53H指数：6
- 供职机构：吉林农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金吉林省产业技术研究与开发项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 鹿茸顶端组织IGF1R基因的部分cDNA克隆及差异表达被引量：1
- 2012年
- 鹿茸角作为一种哺乳动物器官,它具有两个独特的生长特性,即可再生和快速生长。鹿茸角在快速生长期,每天可生长1~2 cm,有研究表明,在鹿茸顶端非骨化部位存在大量受体IGF1R,可促进鹿茸细胞的增殖。本研究旨在通过对IGF1R基因的部分cDNA的克隆及在鹿茸顶端不同部位组织的差异表达分析。
- 李婷李沐孟星宇田玉华刘宁胡薇
- 关键词：CDNA克隆间充质真皮层
- 梅花鹿鹿茸顶端IGF-1基因的克隆、原核表达与纯化
- 鹿茸是梅花鹿(Cervus nippon)的第二性征,是在雄鹿额骨部长出的骨质性组织。鹿茸每年周期性地生长,这在哺乳动物中绝无仅有;鹿茸每天可长1～2 cm,速度之快也为其他任何哺乳动物组织所不及,人们推测其中存在特殊的...
- 孟星宇李婷李沐刘宁田玉华胡薇
- 文献传递
- 芘和萘单克隆抗体的制备及免疫检测技术的研究
- 多环芳烃（Polycyclic aromatic hydrocarbon，PAHs）是一类由2个及2个以上苯环或戊环构成的多环类碳氢化合物的总称，是一类重要的环境和食品污染物，在大气、水、土壤等环境中普遍存在。有研究显示...
- 孟星宇
- 关键词：单克隆抗体免疫检测间接竞争ELISA胶体金免疫层析
- 梅花鹿IGF-1多肽及其制备方法
- 本发明公开了一种梅花鹿IGF-1成熟肽的基因，并在上游引物5端添加EcoR I酶切位点和编码Asn的碱基序列，下游引物5端添加Hind III酶切位点和终止密码子序列，克隆了表达梅花鹿IGF-1成熟肽的碱基序列234bp...
- 胡薇孟星宇李婷李沐胡锐王健李雨婷田玉华刘宁
- 文献传递
- 鹿茸顶端组织IGF1R基因的部分cDNA克隆及差异表达被引量：3
- 2011年
- 为了研究梅花鹿鹿茸顶端组织IGF1R基因的表达水平,采用TRIzoL试剂分别提取鹿茸真皮层、间充质层、前软骨层和软骨层总RNA,以逆转录酶AMV反转录合成cDNA,根据GenBank已发表的相关序列设计梅花鹿IGF1R基因特异引物并克隆IGF1R基因,最后利用相对荧光定量Real-time PCR法检测IGF1R基因在鹿茸顶端不同部位组织的表达差异。研究结果表明:试验成功克隆到1 203 bp的IGF1R基因序列,该序列包含IGF1R基因的部分编码序列,并编码401个氨基酸长度的多肽;与GenBank中的牛、猪、人和小鼠IGF1R基因进行比对分析,梅花鹿IGF1R基因与牛、猪、人和小鼠IGF1R核苷酸同源性分别为98%、94%、93%和88%;IGF1R蛋白氨基酸序列同源性分别为98.3%、98.5%、97.8%和94.5%。对荧光定量PCR的差异分析发现,IGF1R基因在鹿茸顶端间充质层、真皮层、前软骨层和软骨层存在明显的上调表达现象。
- 胡薇孟星宇田玉华刘宁
- 关键词：鹿茸胰岛素样生长因子1受体CDNA克隆差异表达分析
- 鹿茸顶端组织IGF-1的cDNA克隆、原核表达及miR-1在鹿茸细胞增殖中的作用
- 鹿茸是鹿的第二性征,在一定的生理条件下,在额骨部长出的骨质性组织。鹿茸是中国传统的珍贵药材,其历史悠久,具有重要的药用价值和商业价值。同时,鹿茸是哺乳动物中唯一的可周期性完全再生的器官,在增殖期内可快速生长,它的生长发育...
- 孟星宇
- 文献传递
- 鹿茸顶端组织miRNA芯片制备及差异表达miRNA的筛选被引量：4
- 2016年
- 为制备梅花鹿鹿茸顶端间充质组织及软骨组织miRNA芯片,分离鹿茸间充质和软骨组织细胞,利用TRIzol试剂法分别提取细胞的总RNA,并进行miRNA生物素标记,将标记的小RNA在miRNA芯片上进行杂交反应,再进行芯片扫描及数据处理,应用相对荧光定量Real-time PCR法验证部分miRNA芯片结果的可靠性。研究结果显示:筛选得到鹿茸间充质和软骨组织miRNA差异表达谱。间充质部位存在的miRNA为289个,软骨部位存在的miRNA条数为304条。其中间充质组织中117个miRNA表达上调,71个miRNA表达下调;软骨组织中97个miRNA表达上调,87个miRNA表达下调;两个组织中共同存在且具有显著差异性表达的miRNA为158个。Real-time PCR法验证结果显示,相对于间充质细胞,miR-1、miR-18a、miR-18b、miR-19a、miR-19b、miR-20b和miR-let-7f的表达均上调;而miR-99b、miR-130b及miR-184的表达均下调,与芯片结果一致。
- 崔东明孟星宇李婷田玉华李沐李璐胡薇
- 关键词：鹿茸间充质软骨MIRNA芯片
- 鹿茸顶端组织IGF1R基因的部分cDNA克隆及差异表达
- 鹿茸角作为一种哺乳动物器官,它具有两个独特的生长特性,即可再生和快速生长。鹿茸角在快速生长期,每天可生长1～2 cm,有研究表明,在鹿茸顶端非骨化部位存在大量受体IGFlR,可促进鹿茸细胞的增殖。本研究旨在通过对IGFl...
- 李婷李沐孟星宇田玉华刘宁胡薇
- 文献传递
- icroRNA介导的IGF1基因沉默对鹿茸软骨细胞增殖的影响
- [目的]构建靶向梅花鹿胰岛素样生长因子1(IGF1)基因的microRNA真核表达载体,研究microRNA介导的IGF1基因沉默对鹿茸软骨细胞增殖的影响.[方法]根据IGF1 mRNA序列设计并合成4对pre-micr...
- 李婷李沐孟星宇刘宁胡薇
- 关键词：胰岛素样生长因子1基因沉默
- 梅花鹿IGF-1的原核表达与纯化被引量：6
- 2012年
- 【目的】克隆梅花鹿(Cervus nippon)胰岛素样生长因子1(Insulin-like growth factor 1,IGF-1)的成熟肽基因,并对其进行原核表达及纯化,以获得具有生物学活性的蛋白,为研究IGF-1在梅花鹿鹿茸生长发育中的调控作用及机理提供参考。【方法】以GenBank中的梅花鹿IGF-1基因序列(登录号:HQ890468)设计1对引物,以构建的梅花鹿pMD-18T-IGF-1重组质粒为模板,克隆IGF-1成熟肽的基因序列,构建重组质粒pMD-IGF-1,将其插入pET-32a表达载体后,构建pET-32a-IGF-1质粒,鉴定后,将pET-32a-IGF-1转入Rosetta大肠杆菌进行诱导表达(0.6mmol/L IPTG,37℃,4h)后,对其表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting检测。用Ni-Agarose柱亲和层析试剂盒分离、羟胺裂解纯化目标蛋白,并利用四唑盐比色法(MTT法)和流式细胞仪检测目标蛋白对NIH3T3细胞增殖及不同细胞周期下NIH3T3细胞比例的影响。【结果】获得了梅花鹿IGF-1成熟肽基因序列(234bp);经鉴定,原核表达载体pET-32a-IGF-1构建成功;SDS-PAGE和Western blotting检测结果表明,在Rosetta中成功诱导表达了融合蛋白,且羟胺裂解纯化后的目的蛋白纯度较高;MTT法和细胞周期检测结果表明,复性后的IGF-1重组蛋白能促进细胞增殖。【结论】成功克隆了梅花鹿IGF-1成熟肽基因序列,获得了具有生物学活性的IGF-1蛋白。
- 孟星宇李婷李沐刘宁田玉华胡薇
- 关键词：梅花鹿胰岛素样生长因子1蛋白纯化生物学活性
