朱清禾
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 供职机构：南京工业大学生物与制药工程学院材料化学工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 红串红球菌中手性醇脱氢酶的克隆与表达
- 红串红球菌(Rhodococcus erythropolis)中的醇脱氢酶(ADH)属中链脱氢酶家族,是一种依赖NADH、专一生成S 型产物的醇脱氢酶,在NADH的帮助下,可以催化苯乙酮生成( S )-苯乙醇,和Lact...
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- 关键词：醇脱氢酶苯乙酮重组菌
- 文献传递
- Rhodococcus erythropolis手性醇脱氢酶的克隆表达及其性质被引量：3
- 2012年
- 【目的】探讨红串红球菌中一种醇脱氢酶的性质及其对酮酯类及酮类底物的催化能力。【方法】从红串红球菌(Rhodococcus erythropolis ATCC 4277)中获取一段长度为1047 bp的醇脱氢酶(adh)基因,插入载体pET-22b(+)后,在大肠杆菌中进行重组表达。15℃的低温下用自诱导培养基诱导24 h,以苯乙酮为底物测定醇脱氢酶酶活。【结果】测得该诱导条件下重组菌体细胞破碎上清中醇脱氢酶酶活力为2.6 U/mg。经温度、pH耐受性等分析,发现该酶最适pH在6.0-6.5之间,耐受温度可以达到60℃,并且在该温度下保持5 h后,酶活也能保留80%。对于β酮酯类底物的催化反应,以对乙酰乙酸乙酯的催化能力最高。用4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)为底物进行全细胞水相催化反应,经手性液相色谱分析,发现在催化产物以R型4-氯-3羟基丁酸乙酯(CHBE)为主。【结论】该酶在酮酯类的底物转化方面有良好的开发潜力及应用前景。
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- 关键词：COBENADH
- ω-转氨酶制备手性胺的研究进展被引量：3
- 2012年
- 简要介绍了ω-转氨酶的催化机理、菌株来源以及目前国内外利用ω-转氨酶催化拆分或合成手性胺类化合物的研究进展。阐述了转氨酶生产手性胺中遇到的问题与解决方法,同时介绍了ω-转氨酶的固定化研究情况。最后对ω-转氨酶的发展前景进行了展望。
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- 关键词：手性胺
- 抗生链霉菌(Streptomyces antibioticus)产吩噁嗪酮合成酶基因的重组表达被引量：2
- 2011年
- 从抗生链霉菌(Streptomyces antibioticus)中提取出目的基因phs,构建基于质粒pET28a的诱导型表达载体pET28a-phs。以E.coli为表达宿主,将重组质粒转化入宿主菌之后获得能够高效表达吩噁嗪酮合成酶(PHS)的重组菌,经SDS-PAGE验证在72.1 kD处有明显蛋白条带。通过调整可能影响表达的参数获得PHS在大肠杆菌中的最优表达条件。最终优化后的表达条件是最适Cu2+浓度为1.5 mmol/L,最适细菌培养温度为37℃,最适pH值为7.0,在OD600为0.6,时加入终浓度为1.0 mmol/L的IPTG为最佳诱导条件,30℃诱导16 h为最佳诱导时间。
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- 关键词：漆酶
