李蕊
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- H_2O_2氧化刺激对紫杉醇耐药和敏感肺癌细胞的不同影响被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨人肺腺癌细胞株A549及紫杉醇(paclitaxel)耐药细胞株A549/Taxol对于H2O2氧化刺激的不同反应性及可能的作用机制。方法:用不同浓度的H2O2处理A549及A549/Taxol细胞后,采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞存活率,并计算半数细胞抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)值;采用荧光探针氯甲基-2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酯[5-(and-6)-chloromethyl-2’,7’-dichlorouorescein diacetateacctyl ester,CM-H2DCFDA]染色法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;四甲基罗丹明甲酯(tetramethylrhodamine methyl ester perchlorate,TMRM)染色法检测细胞线粒体膜电位水平;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;实时荧光定量-PCR法检测细胞内超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase1,SOD1)、SOD2、过氧化氢酶(catalase,CAT)、γ-谷氨酰半胱氨酸链接酶(glutamate-cysteineligase,GCL)、谷胱甘肽合成酶(glutathione synthetase,GSS)和谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase,GSR)mRNA表达的变化。结果:耐药细胞株A549/Taxol对H2O2的IC50值高于亲本细胞株A549;采用低毒浓度H2O2(50和100μmol/L)作用2h后,A549/Taxol细胞中的ROS水平增高幅度显著低于A549细胞,A549/Taxol细胞的线粒体膜电位保持相对稳定而A549细胞显著增高,且A549/Taxol细胞的凋亡发生率显著低于A549细胞。A549/Taxol细胞中抗氧化系统相关基因SOD1、SOD2、CAT、GCL、GSS和GSRmRNA的表达量高于A549细胞;在H2O2作用后,A549细胞中上述基因表达量显著增高,而A549/Taxol细胞中仅GSRmRNA表达上调。结论:紫杉醇耐药细胞对氧化刺激的耐受能力显著高于敏感细胞株,其机制可能与耐药细胞自身氧化-还原平衡系统的适应性变化有关。
- 李蕊刘建军黄钢
- 关键词：紫杉醇氧化性应激
