戴旭芳 作品数:34 被引量:77 H指数:4 供职机构: 重庆师范大学教育科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市高等教育教学改革研究项目 重庆市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 哲学宗教 更多>>
丙戊酸钠通过激活miR-148a-3p/Mcl-1通路促进SH-SY5Y细胞凋亡 被引量:1 2020年 目的探讨抗癫痫药丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)对神经细胞的凋亡诱导作用及相关机制。方法将人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)用不同剂量VPA处理,流式分析细胞凋亡水平变化,Western blot检测Mcl-1蛋白水平变化,定量PCR分析Mcl-1 mRNA与miR-148a-3p水平变化,报告基因实验检测Mcl-1启动子活性变化。用miR-148a-3p抑制剂联合VPA处理细胞,观察miR-184a-3p在VPA下调Mcl-1表达中的作用及对VPA促SH-SY5Y细胞凋亡效果的影响。结果VPA可促进SH-SY5Y细胞凋亡,并抑制SH-SY5Y细胞中Mcl-1的蛋白和mRNA水平(P<0.05)。VPA处理不影响SH-SY5Y细胞中Mcl-1的启动子活性(P>0.05)。VPA可显著增强SH-SY5Y细胞中miR-148a-3p的表达(P<0.05),使用miR-148a-3p抑制剂可减轻VPA对Mcl-1表达的抑制作用,并减弱VPA的促细胞凋亡效果。结论VPA可能通过激活miR-148a-3p/Mcl-1信号通路促进SH-SY5Y细胞凋亡。 戴旭芳 闫小晶 闫小晶 谢鹏关键词:丙戊酸钠 SH-SY5Y细胞 MCL-1 hLNα4LG1基因克隆、表达及生物学活性检测 被引量:1 2006年 目的克隆并表达具有生物学活性的人层黏连蛋白α4链LG1组件(hum an lam in in alpha4 chain LG1 modu le,hLNα4LG1)蛋白。方法RT-PCR扩增hLNα4LG1的cDNA片段并将其插入pMD-18T载体进行测序。将测序片段亚克隆入原核表达载体pET-28 a并在BL21(DE3)大肠杆菌中进行表达,W estern b lot对表达蛋白进行鉴定。用N i-NTA亲和柱对目的蛋白进行纯化,并通过细胞黏附与伸展实验对其生物学活性进行检测。结果成功克隆了hLNα4LG1的cDNA片段,SDS-PAGE及W estern b lot分析显示,经IPTG诱导后BL21(DE3)/pET28 a-LG1总蛋白中出现一条分子量为26×103的新蛋白带。与对照组相比,N i-NTA亲和层析纯化的目的蛋白有明显促进A549细胞伸展与黏附的作用。结论克隆并原核表达了hLNα4LG1蛋白,目的蛋白具有促进细胞黏附与伸展的活性,为深入研究hLNα4LG1的功能奠定了基础。 连继勤 戴旭芳 李晓辉 何凤田关键词:基因克隆 原核表达 聋大学生的课堂教学现状调查研究-以重庆师范大学的高等聋教育为例 2015年 本研究通过问卷调查对重庆师范大学聋大学生的课堂教学现状进行了调查研究,结果表明在聋大学生的课堂教学中,课程教材基本适合聋大学生学习,但存在学习(教学)内容偏难的现象;课堂教学语言使用的总体效果良好,但仍需优化;课堂教学中教师的教学方法及PPT课件反馈评价一般,有待进一步改进;教师对学生的课堂表现满意度高于学生对教师课堂教学的满意度. 戴旭芳 冉红梅关键词:课堂教学现状 成年孤独症者职业发展现状及培训意愿调查研究 2023年 为调查重庆市成年孤独症者职业发展现状、影响因素及职业教育培训意愿,采用问卷法对重庆市114名成年孤独症者进行调查。结果表明,重庆市成年孤独症者职业发展总体处于中等偏上水平,社交媒体利用水平最高,政策性支持感知程度最低。成年孤独症者职业发展的总体水平及各因子在性别、居住状况等人口学特征方面无显著性差异,但年龄对社交媒体利用水平、婚姻状态对职业发展意识有显著的影响。各因子均与职业发展总体状况及培训意愿呈显著正相关关系,除职业教育与工作匹配度外,其余各因子均对培训意愿有显著正向预测效应。采用增强职业发展意识,提高人际发展需求、社交媒体利用水平、职业教育与工作匹配度、家庭支持、政策支持,加强职业教育培训等措施可提升成年孤独症者的职业发展能力。 李昊隆 李博 戴旭芳 杨逐关键词:职业教育 培训意愿 人层粘连蛋白α4链LG3-4组件的克隆和表达 被引量:2 2005年 目的 利用基因工程技术获得重组人层粘连蛋白α4链LG3 4组件(humanlamininAlpha4LG3 4Module ,hLNα4LG3 4)蛋白并检测其抗原性。方法 采用RT PCR方法从人胎盘组织扩增hLNα4LG3 4的cDNA片段,T A克隆法将其插入pMD 18T载体进行测序。亚克隆法构建原核表达载体pET 2 8a LG3 4,在BL2 1(DE3 )中表达hLNα4LG3 4融合蛋白。融合蛋白经SDS PAGE鉴定、Ni NTA亲和层析纯化及Western印迹分析。结果 成功获得hLNα4LG3 4cDNA片段,与Gen Bank中序列同源性为98% ,突变碱基不改变蛋白的氨基酸序列。12 %SDS PAGE电泳检测显示:经IPTG诱导后BL2 1(DE3 ) /pET2 8a LG3 4细菌裂解液总蛋白中出现一条分子量为44×10 3的新蛋白带,纯化后目的蛋白纯度达95 %以上,且Western印迹可特异地检测到目的蛋白所对应转移带。结论 成功表达和纯化了hLNα4LG3 4蛋白,从而为研究LG组件在疾病发生过程中的作用及其功能位点打下了基础。 戴旭芳 连继勤 张玉静 胡仲明关键词:克隆 丙戊酸钠下调SH-SY5Y细胞中Bcl-2表达的作用及机制分析 被引量:2 2018年 目的探讨丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)在神经细胞中下调Bcl-2表达的作用及可能机制。方法用不同浓度的VPA处理SH-SY5Y细胞,定量PCR检测Bcl-2 mRNA与miR-34a水平变化,Western blot检测Bcl-2蛋白水平变化,报告基因系统检测Bcl-2启动子活性变化,联合转录抑制剂处理细胞,分析Bcl-2 mRNA稳定性变化,联合miR-34a模拟物及抑制剂处理细胞,进一步分析miR-34a在VPA下调Bcl-2表达中的作用。Annexin V/PI双染结合流式分析细胞凋亡情况。结果 VPA可浓度依赖性下调SH-SY5Y细胞中Bcl-2的mRNA与蛋白水平(P<0.05)。VPA暴露不改变Bcl-2的启动子活性(P>0.05),但显著降低了其mRNA的稳定性(P<0.05)。同时,VPA可上调SH-SY5Y细胞中miR-34a的表达(P<0.05),联合使用miR-34a的抑制剂可逆转VPA对Bcl-2表达的下调作用,且单独的miR-34a模拟物也可以下调细胞中Bcl-2的表达。VPA暴露还可引起SH-SY5Y细胞的凋亡增加(P<0.05)。结论 VPA可通过上调SH-SY5Y细胞中miR-34a水平而抑制Bcl-2的表达。 戴旭芳 秦利燕 连继勤关键词:丙戊酸钠 SH-SY5Y细胞 BCL-2 MIR-34A 培智学校开展学生卫生健康教育的策略 被引量:1 2023年 为了促进培智学生身心健康发展,形成良好的卫生习惯,提高其生活与教育质量,该文提出了培智学校应在学科教学中渗透卫生健康教育知识、在主题活动中提高学生的卫生保健能力、在校园中创设卫生健康教育环境等实施策略,并通过建立制度、家校合作、评价反思巩固与完善卫生健康教育效果。 罗蓓 戴旭芳关键词:学校卫生 健康教育 自闭症的病因研究综述 被引量:23 2006年 从社会心理学和医学生物学角度对自闭症病因的研究进展进行了综述,以加深自闭症病因的认识及推动自闭症的研究。 戴旭芳关键词:自闭症 病因 社会心理学 医学生物学 高等聋教育教师专业自主权的现状及应对策略探析 2018年 高等聋教育教师如何实现自己的专业自主权是教育改革新形势值得探究的课题.本文主要就高等聋教育教师的专业自主权现状及应对策略进行了探索分析. 戴旭芳关键词:专业自主权 人层粘连蛋白α4链LG1组件融合蛋白的表达 2005年 目的表达重组人层粘连蛋白α4链LG1组件(HumanLamininAlpha4LG1Module,hLNα4LG1)蛋白并检测其抗原性。方法采用RTPCR方法从人胎盘组织扩增hLNα4LG1的cDNA片段,用TA克隆法将其插入pMD18T载体进行测序。用DNA重组技术构建原核表达载体pET28aLG1,用BL21(DE3)pET系统表达hLNα4LG1融合蛋白,SDSPAGE鉴定表达产物,用NiNTA亲和柱对表达蛋白进行纯化,并进行Westernblot分析。结果已成功获得hLNα4LG1cDNA序列,与GenBank中序列同源性为100%。12%SDSPAGE显示,经IPTG诱导后BL21(DE3)pET28aLG1总蛋白中出现一条相对分子质量为26000的新蛋白带,纯化后目的蛋白纯度达90%以上,且Westernblot可特异地检测到目的蛋白所对应转移带。结论成功表达和纯化hLNα4LG1蛋白,且具有良好的抗原性,为研究LG组件在疾病发生过程中的作用及其功能位点打下了基础。 连继勤 张玉静 戴旭芳 张艳宇 何凤田关键词:DNA重组技术 GENBANK CDNA片段 BLOT分析 序列同源性 功能位点