刘荭 作品数:119 被引量:491 H指数:15 供职机构: 深圳出入境检验检疫局 更多>> 发文基金: 国家质检总局科技计划项目 国家高技术研究发展计划 公益性行业科研专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
一种用于鲤春病毒血症病毒检测的核酸适配体及其应用 本申请公开了一种用于鲤春病毒血症病毒检测的核酸适配体及其应用。本申请的用于鲤春病毒血症病毒检测的核酸适配体,包括式一所示通式的一种或两种DNA片段,式一:5’‑P<Sub>1</Sub>‑N‑P<Sub>2</Sub>‑... 于力 王津津 郑晓聪 贾鹏 何俊强 刘荭 史秀杰 兰文升 杨锦舜对虾白斑综合症病毒变性高效液相色谱检测方法的建立与应用 2011年 据对虾白斑综合症病毒(WSSV)的基因保守序列,使用Primer Explorer V3软件设计了2条引物,利用PCR的扩增产物,结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术,建立了一种对虾白斑综合症病毒的DHPLC快速检测方法。该检测方法特异性好,与传染性皮下和造血器官坏死病毒、斑节对虾杆状病毒、肝胰腺细小病毒、对虾杆状病毒以及对虾基因组DNA无交叉反应;检测灵敏度较高,约为10-5ng/μL,高于常规PCR及荧光定量PCR的灵敏度。用建立的DHPLC方法对100尾对虾样品进行了临床检测,结果与荧光定量PCR检测结果一致。WSSV的DHPLC检测方法,特异性强、灵敏度高,是对WSSV进行有效检测的一种新方法。 赵巍 马亚 赵玉然 杨大伟 梁成珠 刘荭 何俊强 史秀杰 岳志芹关键词:变性高效液相色谱 对虾 白斑综合症病毒 锦鲤疱疹病毒的检测与人工感染试验 被引量:14 2005年 基于在美国和以色列普通鲤鱼和锦鲤中分离了一种新的疱疹病毒,命名为锦鲤疱疹病毒(KHV)或鲤鱼肾炎鳃坏死病毒(CNGV).本文根据GenBank登记的KHV序列设计了两对特异性引物,在我国患病的锦鲤样品中检测到该类病毒DNA.经对PCR产物进行克隆测序,结果表明与GenBank登记序列完全一致.用组织匀浆上清人工感染健康锦鲤,并从试验感染鱼组织中检测到KHV病毒DNA.该结果表明KHV或CNGV已经传播到我国,应引起重视. 周永灿 袁军法 任武泽 刘荭 江育林 石正丽关键词:PCR检测 四种主要水生动物病毒纳米荧光试纸条病原快速鉴定技术的研究和应用 刘荭 郑晓聪 贾鹏 何俊强 兰文升 史秀杰 陈兵 王津津 于力 该研究建立了快速检测四种主要水生动物病毒-鲤春病毒血症病毒(SVCV)、流行性造血器官坏死病毒(EHNV)、传染性造血器官坏死病毒(IHNV)和病毒性出血性败血症病毒(VHSV)的纳米荧光试纸条的制备方法.利用荧光纳米晶...关键词: 锦鲤疱疹病毒病的研究进展 被引量:15 2006年 刘宗晓 刘荭 江育林关键词:疱疹病毒病 锦鲤 DNA聚合酶基因 膜蛋白基因 衣壳蛋白基因 DNA病毒 鲤春病毒血症病毒单克隆抗体的制备及其特性鉴定 被引量:4 2011年 为获得针对鲤春病毒血症病毒(SVCV)特异性的单克隆抗体(MAb),以纯化的SVCV为抗原,免疫BALB/c小鼠。将免疫鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,采用间接ELISA法筛选获得4个能稳定分泌抗SVCV MAb的杂交瘤细胞株;4个杂交瘤细胞制备腹水的MAb效价为1∶160000~1∶640000。亚型鉴定结果表明,这些MAb分属2个亚型(1F1、3E1,IgG2a;3F5、4F9,IgG1),轻链均为Κ链。Western blot分析显示,MAb1F1、3F5、4F9能特异性地识别SVCV的N蛋白(47ku),3E1能特异性地识别SVCV的G蛋白(69ku)。采用相加ELISA法对抗原表位分析结果显示,1F1、3F5、4F9可能识别相同的表位,3E1则识别不同的表位。间接免疫荧光试验结果显示4株MAb均能对染毒病灶产生特异性的荧光染色。这些MAb的制备为SVCV免疫学检测方法的建立奠定了基础。 张朋 刘荭 陈孝煊 吴志新 余剑敏 杜娟 兰文升 史秀杰 郑晓聪 何俊强 贾鹏 申斯思 朱家增关键词:鲤春病毒血症病毒 单克隆抗体 N蛋白 聚合酶链式反应和基因芯片技术的研究及在主要水生动物病毒检疫和监测中的应用 传染性造血器官坏死毒(IHNV)、鲤春血症病毒(SVCV)、流行性造血器官坏死病毒(EHNV)、病毒性出血性败血症(VHSV)、传染性胰脏坏死(IPNV)、草鱼出血病病毒(GCHV)、真鲷虹彩病毒(RSIV)、病毒性神经... 刘荭关键词:聚合酶链式反应 逆转录聚合酶链式反应 基因芯片 检疫监测 狗鱼幼鱼弹状病毒RT-PCR检测方法和试剂盒 本发明公开了狗鱼幼鱼弹状病毒(PFRV)的RT-PCR检测方法和试剂盒。本发明的检测方法和试剂盒使用特异性引物对PFRV进行检测,引物具有很好的引发特性,具有较宽的Mg<Sup>2+</Sup>浓度、引物浓度、dNTP浓... 刘荭 兰文升 何俊强 叶奕优 陈红莲文献传递 云南锦鲤养殖场鲤浮肿病毒的鉴定及基因型分析 被引量:15 2017年 锦鲤睡眠病(Koi sleepy disease,KSD)是一种由鲤浮肿病毒(Carp edema virus,CEV)引起鲤科鱼类死亡的病毒性传染病,已经对世界鲤科鱼类养殖业造成危害。2016年,中国云南某锦鲤养殖场养殖的锦鲤出现以体表出血、眼睛凹陷、沉于池底昏睡为主要临床症状的疾病,发病水温为11℃~20℃,累计死亡率30%~50%。从该养殖场不同池塘采集两个样品,使用nested PCR和real-time PCR方法进行实验室诊断。结果表明,两个样品CEV检测结果均为阳性,发病锦鲤鳃和肾脏CEV病毒载量为250.02~1 332.94拷贝/250ng,鳃中CEV病毒载量约为肾脏的6~7倍。在排除寄生虫、细菌、SVCV和KHV感染后,推测CEV可能是引起此次云南锦鲤场发生疫情的病原,但还需回归感染实验做进一步验证。基于CEV P4a基因的遗传进化分析结果表明,此次从云南发病锦鲤检出的两个CEV毒株均属于IIa基因型,且与英国(R083株)和日本CEV毒株(CyPP-3)的遗传进化关系最近。 温智清 刘莹 唐绍林 王飞 王飞 王津津 于力 郑晓聪 于力 兰文升 郑晓聪 刘荭关键词:基因型 狗鱼幼鱼弹状病毒反转录环酶恒温扩增检测方法和试剂盒 本发明公开了狗鱼幼鱼弹状病毒(PFRV)的反转录环媒恒温扩增(RT-LAMP)检测方法和试剂盒,其中所用的外引物分别含有Seq ID No.1和Seq ID No.2所示的序列。本发明的方法和试剂盒能够特异性地检测出PF... 刘荭 史秀杰 卢体康 陈红莲 何俊强文献传递