于丹
- 作品数：14 被引量：29H指数：3
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- EV71疫苗中和试验检测标准病毒候选株的研究
- 目的:研制1批EV71疫苗中和试验检测标准病毒候选株,用于EV71中和抗体检测的标准化。方法:采用冷冻干燥方法,按《中国药典》相关要求制备符合我国疾病流行特征的检测用标准病毒1批。联合国内3家EV71检测实验室,采用经典...
- 毛群颖郭增兵郝春生于丹李秀玲梁争论
- 关键词：肠道病毒71型手足口病
- 文献传递
- EV71疫苗中和试验检测标准病毒候选株的研究
- 目的研制1批EV71疫苗中和试验检测标准病毒候选株,用于EV71中和抗体检测的标准化。方法采用冷冻干燥方法 ,按《中国药典》相关要求制备符合我国疾病流行特征的检测用标准病毒1批。联合国内3家EV71检测实验室,采用经典细...
- 毛群颖郭增兵郝春生于丹李秀玲梁争论
- 关键词：肠道病毒71型手足口病
- 文献传递
- 人甲型H7N9禽流感全病毒灭活疫苗和裂解疫苗在小鼠中的免疫原性研究被引量：1
- 2015年
- 目的比较人甲型H7N9禽流感全病毒灭活疫苗和裂解疫苗在小鼠中的免疫原性，为该疫苗的类型选择提供初步依据。方法采用相同血凝素含量（5μg）的H7N9全病毒灭活和裂解疫苗（含或不含氢氧化铝佐剂共4种类型），分别对BALB／c小鼠进行1针或2针免疫。免疫后，用血凝抑制（hemagglutination inhibition，HI）试验检测血清抗体滴度，比较不同类型疫苗的免疫效果。结果小鼠免疫1针全病毒灭活疫苗后，全部血清阳转，HI抗体几何平均滴度（geometricmeantiter，GMT）为149；免疫2针后，抗体GMT为243。小鼠免疫1针裂解疫苗后无抗体阳转；免疫2针后全部抗体阳转，GMT为139。两种疫苗添加铝佐剂后，诱导的HI抗体GMT仅略有增加。结论H7N9全病毒灭活疫苗在小鼠中的免疫原性较强。在同样类型和剂量的情况下，裂解疫苗需要免疫两次才能达到与全病毒疫苗相同的效果。铝佐剂对免疫原性提升不明显。
- 徐康维于丹邵铭刘书珍邹勇李长贵
- 关键词：流感疫苗流感病毒A型免疫原性
- ELISA定量检测乙型脑炎病毒抗原被引量：3
- 2009年
- 目的建立双抗体夹心ELISA定量检测乙型脑炎(乙脑)病毒(JEV)抗原方法,用于乙脑疫苗工序产品抗原含量检测。方法以抗JEV多克隆抗体作为包被物,辣根过氧化物酶(HRP)标记的单克隆抗体作为酶标记物,四甲基联苯胺(TMB)-H_2O_2显色,建立双抗体夹心ELISA法。根据已知浓度抗原,确定定量标准曲线,检测样品中JEV抗原含量;并对该方法各项指标进行验证。结果该方法最佳线性范围为12.5～200 U/ml;r=0.9989;定量限度为12.5 U/ml;回收率为85.0%～103.3%;变异系数为4.3%～5.5%;与甲肝疫苗原液、流感疫苗原液、Vero细胞裂解液蛋白、小牛血清、人血清清蛋白均无交叉反应。结论该方法线性好,特异性强,灵敏度高,准确性、重复性和稳定性好,可用于乙脑疫苗各工序产品的抗原定量检测。
- 于丹李静李军蔡芳高强宋莉莉
- 关键词：双抗体夹心ELISA抗原检测
- 肠道病毒71型中和抗体检测用标准病毒候选株的筛选及制备被引量：10
- 2012年
- 目的筛选并制备肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)中和抗体检测用标准病毒候选株,规范EV71中和抗体检测方法。方法通过对亲本株与非亲本株交叉中和试验,进行相应的几何平均滴度(GMT)比较,从10株EV71毒株中筛选出具有理想亲本中和能力、又具有较广泛交叉中和作用的毒株。筛选出的毒株按《中国药典》三部(2010版)相关要求,冷冻干燥后制备1批符合我国疾病流行特征的标准病毒候选株,联合3家实验室对候选株的病毒滴度进行协作标定,并初步应用于人血清样品的检测。结果筛选出交叉中和能力强、分离、传代背景清晰的EV71 V03株(523-07T)作为候选病毒株;制备的候选病毒株分装精确度、水分含量、无菌检查、支原体检查、其他外源因子检查等项目均符合《中国药典》三部(2010版)相关要求;经联合标定,候选毒株的平均病毒滴度为4.83 lgTCID50/ml(95%CI:4.53～5.12 lgTCID50/ml),变异系数为3.16%;应用候选毒株和中和抗体定值标准品检测EV71自然感染人血清样品,可将实验室间检测差异由4.4倍降至1.6倍。结论初步筛选出的候选株EV71/523-07T株具有理想的亲本株中和作用,又具有较广泛的交叉中和特性,有望成为EV71中和抗体检测的标准毒株候选株。
- 毛群颖郭增兵郝春生于丹高帆董承红安文琪高强谢忠平李秀玲梁争论
- 关键词：手足口病中和抗体
- 季节性流感病毒裂解疫苗在小鼠体内的免疫原性分析
- 2015年
- 目的分析季节性流感病毒裂解疫苗在小鼠体内的免疫原性。方法将3批季节性流感病毒裂解疫苗进行不同倍数稀释后,分别采用1针及2针免疫程序经腹腔免疫小鼠,0.5 ml/只。血凝抑制法测定小鼠血清中H1N1、H3N2和B型抗体滴度,并计算抗体几何平均值（GMT）及疫苗半数有效剂量（ED50）;H1N1亚型及H3N2亚型以≥1∶40为阳转判定标准,B型以≥1：10为阳转判定标准来判定小鼠血清抗体阳转率。结果 3批原倍疫苗H1N1、H3N2和B型阳转率均达100%,随着疫苗稀释度增加,阳转率呈阶梯状下降,ED50分别为0.27～0.46、0.28～0.76和2.08～3.89μg。3批原倍疫苗进行1针免疫程序后,小鼠血清中H1N1、H3N2和B型的GMT分别为1∶184～1∶226、1∶106～1∶184和1∶14～1∶40,随着疫苗稀释度增加,各批疫苗的抗体GMT值均呈现逐步下降趋势;3批1∕3倍疫苗进行2针免疫程序后,H1N1、H3N2和B型的GMT分别为1∶1 372～1∶1 810、1∶905～1∶1 194和1∶343～1∶368。结论 3批季节性流感病毒裂解疫苗在小鼠体内均具有良好的免疫原性,本实验为季节性疫苗免疫原性的评价提供了实验依据。
- 刘书珍邵铭于丹李长贵
- 关键词：免疫原性半数有效剂量
- 牛血清白蛋白单克隆抗体的筛选与双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量：8
- 2008年
- 目的筛选高效抗牛血清白蛋白(BSA)单克隆抗体细胞株,并建立BSA抗原检测的双抗体夹心ELISA法。方法分别采用辛酸-硫酸铵法和葡萄球菌A蛋白亲和层析法纯化单抗,并进行抗体类型、腹水效价、特异性和相对亲和力测定;应用纯化的单抗建立BSA双抗体夹心ELISA检测法,并进行初步应用。结果筛选出4株可稳定分泌抗BSA单抗的杂交瘤细胞株,抗体类型为IgG,抗体滴度均可达10-6,特异性良好,相对亲和力较高。建立的双抗体夹心ELISA法线性范围为1.25～20ng/ml,R2>0.98,灵敏度为1.25ng/ml。结论已筛选出高效抗BSA的单抗,并建立了BSA双抗体夹心ELISA检测方法。
- 张加利蔡芳高强宋莉莉于丹桑建利
- 关键词：牛血清白蛋白单克隆抗体双抗体夹心ELISA法
- 大流行流感疫苗血清学检测中马血球和鸡血球血凝抑制试验方法的比较被引量：1
- 2008年
- 血凝抑制试验(HI)是评价季节性流感疫苗免疫效果的经典方法。由于对人、禽流感病毒的受体不同,不同来源的红血球检测敏感性可能有差异。实验中比较了经典的鸡血球HI方法和国外报道的马血球HI方法,发现两种方法在检测大流行流感疫苗接种者血清时,于不同毒株抗原检测时表现各不相同,检测结果差异在2倍之内,说明经典的鸡血球HI方法仍适用于评价大流行流感疫苗的免疫效果。
- 李长贵邵铭于丹刘书珍高强方捍华
- 关键词：血凝抑制试验
- 残余卵清蛋白ELISA定量检测方法建立及初步验证
- 2009年
- 卵清蛋白（ovalbumin，OVA）作为异源物质，接种人体后易引起过敏副反应。因此残余OVA含量检测是生物制品尤其是以鸡胚为培养基质的流感疫苗生产过程中必须监控的指标之一。本研究在建立定量检测OVA双抗体夹心ELISA两步法后，对此方法进行优化，建立双抗体夹心ELISA一步法。通过与德国Seramun试剂盒对比，考察此检测方法的适用性。
- 李军宋莉莉于丹蔡芳张立志韩素芳高强
- 关键词：夹心ELISA卵清蛋白ELISA一步法双抗体夹心流感疫苗
- 甲型肝炎病毒单克隆抗体的筛选与初步应用被引量：1
- 2011年
- 目的筛选甲型肝炎病毒(Hepatitis A virus,HAV)单克隆抗体(MAb),并初步建立HAV双抗体夹心ELISA定量检测方法。方法用抗体亚型鉴定试剂盒鉴定MAb亚型;通过Western blot法鉴定MAb的特异性;SPA亲和层析法纯化MAb腹水,检测MAb的抗原识别表位;细胞培养法检测MAb的中和效价。确定双抗体夹心法包被物与酶标MAb的浓度,初步建立HAV双抗体夹心ELISA定量检测方法,并考察方法的线性范围。结果 12株HAV单抗中,1株为IgM型,3株为IgG3型,3株为IgG2a型,5株为IgG2b型;10株MAb可特异性结合HAV的VP2蛋白;7株MAb识别相同的抗原表位;7号MAb中和效价最高,可达1∶4 096。建立的HAV双抗体夹心ELISA定量检测方法的线性范围为15.625～250 u/ml,R2﹥0.97。结论 筛选出1株特异性好、中和效价较高的IgG2b型MAb,可用于制备酶标抗体和ELISA检测试剂盒,应用于甲肝疫苗中抗原的检测。
- 高加梅宋俐霏李军张立志于丹国泰
- 关键词：酶联免疫吸附测定
