谷鸿喜
- 作品数：221 被引量：602H指数：12
- 供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省科技攻关计划黑龙江省青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 用新建立的转受体基因细胞系检测和滴定嗜亲性鼠白血病病毒
- 1997年
- 用磷酸钙沉淀法将嗜亲性鼠白血病病毒受体基因转入Ｓ＋Ｌ－貂细胞内建立了一种新细胞系ＩＤ。这种ＩＤ细胞可用于滴定不能形成ＸＣ蚀斑的嗜亲性病毒，并可同时检测不同宿主范围的病毒，特别适用于滴定鼠艾滋病病毒。
- 王玲王占菊梁瑛王晓波李晓鹏郭彩玲曲波谷鸿喜
- 关键词：白血病病毒受体基因
- 正交试验在人乳头瘤病毒16型E2蛋白原核表达优化中的应用被引量：8
- 2011年
- 鉴定人乳头瘤病毒(HPV)16型E2蛋白的重组表达菌株,通过正交试验快速优化诱导表达条件,增加目的蛋白的表达量。应用SDS-PAGE及Western blot分析鉴定表达后的蛋白。选取诱导时间、诱导剂浓度、细菌密度OD600和诱导温度共4个主要外部因素。采用四因素两水平正交试验设计,以单位体积内HPV16 E2目的蛋白含量作为检测指标,结果用SPSS 13.0软件进行统计分析。结果表明,HPV16 E2菌株鉴定正确。HPV16 E2蛋白表达主要以不溶性蛋白为主,主要影响因素是诱导剂浓度和诱导温度,最佳诱导条件为37℃、1.0 mmol/L IPTG和OD600为1.0的条件下诱导7 h,正交试验对分子生物学反应的影响因素分析和条件优化有借鉴意义。
- 商庆龙马延秀郭志伟李立群郝美丽孙宇辉魏兰兰谷鸿喜
- 关键词：正交试验原核表达
- 人乳头瘤病毒16型结构蛋白在昆虫细胞中的表达
- 目的在昆虫细胞中表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)结构蛋白,为HPV16型预防性基因工程亚单位疫苗的研究以及诊断试剂的研制奠定基础。方法将目的基因克隆至杆状病毒转移载体,该重组质粒 DNA与线性化的杆状病毒DNA共转染...
- 魏兰兰韩立群任皎田厚文骆卫锋陆振华谷鸿喜阮力
- 关键词：病毒蛋白质类病毒体
- 文献传递
- 琼脂糖凝胶电泳法快速筛选轮状病毒被引量：2
- 1990年
- 本文用琼脂糖凝胶电泳检测轮状病毒RNA,并与聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果相比较,结果43份聚丙烯酰胺凝胶电泳阳性的标本,琼脂糖凝胶电泳亦均为阳性。两种方法检测轮状病毒RNA的敏感度一致,而琼脂糖电泳省时、简便、经济。可作为一种快速方法用于轮状病毒感染的筛选和快速诊断。
- 钟照华谷鸿喜郭小奎李绍贤刘灿虎黄素芳付宝玲刘凤英赵彦鸣李翠兰
- 关键词：轮状病毒PAGE
- 16型人乳头瘤病毒衣壳蛋白在真核细胞中的表达
- 为了构建HPV16型晚期蛋白重组杆状病毒,并使其在昆虫细胞中获得高效表达.本文首先构建了2株重组杆状病毒转移质粒,分别携带人乳头瘤病毒晚期基因L1及L1和L2,再用线性化的杆状病毒DNA与该重组杆状病毒转移质粒共转染sf...
- 魏兰兰谷鸿喜
- 关键词：人乳头瘤病毒病毒样颗粒重组杆状病毒真核细胞衣壳蛋白
- 文献传递
- RT套式PCR检测血浆HCV RNA及与抗HCV检测的比较被引量：12
- 2001年
- 应用微量血清热变性法提取核酸 ,逆转录套式聚合酶链反应 (RT nestPCR)检测血浆HCVRNA ,并与抗HCVELISA检测结果比较 ,对HCVRNA阳性标本进行HGVRNA的筛查。结果在 32例抗HCV阳性和 2 0例抗HCV阴性血浆中 ,HCVRNA分别检出 18例和 2例 ,总符合率为 70 % ,2 0例HCVRNA阳性者中有 2例合并感染HBV ,1例合并感染HGV。
- 赵继义刘雪梅郭薇媛高磊钟照华谷鸿喜
- 关键词：丙型肝炎病毒血浆HCVRNA抗体
- HPV16地方分离株E6基因的克隆与原核表达研究
- 2007年
- 目的克隆人乳头瘤病毒（HPV16E6）基因并在大肠埃希菌中表达，对表达产物进行鉴定。方法用PCR方法从克隆质粒pUC19-HPV16E6E7中扩增HPV16E6基因，采用定向克隆构建pQE30-HPV16E6原核表达质粒．利用酶切和序列测定鉴定重组质粒。将pQE30-HPV16E6转化大肠埃希菌BL21（DE3），建立重组工程菌pQE30-HPV16E6／BL21（DE3）。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导，SDS—PAGE分析蛋白表达情况，利用Western blot鉴定抗原特异性。结果PCR产物470bp，重组质粒经酶切和序列测定证实构建正确。SDS—PAGE分析在18×10^3处有蛋白条带出现，与预期一致。Western blot分析证实目的条带与HPV16E6抗体有特异性反应。结论成功构建了HPV16E6基因的基因工程菌株，能高效表达E6蛋白，表达蛋白具有良好的免疫反应性。
- 商庆龙刘雪梅王燕李承刚邵迪陈思佳韩聪谷鸿喜
- 关键词：大肠杆菌
- 黑龙江省地区尖锐湿疣组织病原感染趋势及序列分析被引量：2
- 2011年
- 目的:分析黑龙江省尖锐湿疣组织中感染的人乳头瘤病毒(HPV)感染基因型分布趋势,并对HPV18 L1和L2序列进行分析,了解有无变异。方法:提取56例尖锐湿疣组织标本中DNA,用HPV L1区通用引物及HPV 6b、HPV11、HPV16、HPV18型L1区特异引物进行PCR扩增,分析尖锐湿疣组织中感染的HPV型别分布并进一步将筛选出的1例HPV18型阳性标本中的L1、L2基因进行克隆,构建克隆质粒pBluescript-HPV18 L1和pBluescript-HPV18 12,测序分析其基因变异情况。结果:56例标本中,HPV 6b和11型感染例数分别为15和28例,各占26.7%和50%;HPV 16型感染3例,占总例数5.4%;有2例合并HPV6b/11型混合感染,占3.6%;1例合并HPV11/18型的混合感染,占1.8%;HPV6b/11/16感染2例,占3.6%;其它型别5例,占8.9%。HPV18 L1开放读码框PCR扩增产物片段大小为1.7kb,与预期结果相同。重组质粒pBluescript-HPV18 L1克隆片段18 L1、基因测序后,与原始序列相比有一处点突变G74A,为氨基酸第二位密码子,属错义突变,氨基酸由精氨酸变为谷氨酰胺,重组质粒pBluescript-HPV18 L2克隆片段18 L1基因测序后,与原始序列相比存在三处同义突变,A345C,C904A,G1260A。存在三处错义突变,T509C,氨基酸由缬氨酸变为丙氨酸;G529T,氨基酸由丙氨酸变为丝氨酸;T1115C,氨基酸由苯丙氨酸变为丝氨酸。结论:黑龙江省地区尖锐湿疣组织HPV DNA检出率为100%,以低危型别11和6b型为主,偶见高危型别16、18型感染,黑龙江省地区HPV18分离株晚期基因L1经克隆测序后确认存在一处错义突变,G74A,氨基酸由精氨酸变为谷氨酰胺。HPV18分离株晚期基因L2经克隆测序后确认存在三处同义突变,A345C,C904A,G1260A。存在三处错义突变,T509C,氨基酸由缬氨酸变为丙氨酸;G529T,氨基酸由丙氨酸变为丝氨酸;T1115C,氨基酸由苯丙氨酸变为丝氨酸。
- 郭庆云庄敏李迪谷鸿喜
- 关键词：尖锐湿疣人乳头瘤病毒
- 原位RT-PCR法检测柯萨奇B病毒RNA的实验研究被引量：1
- 1999年
- 目的建立定位检测细胞或组织中柯萨奇Ｂ病毒ＲＮＡ的原位ＲＴ－ＰＣＲ方法（直接法）。方法对柯萨奇Ｂ病毒（１～６型）感染ＨｅＬａ细胞，经核酸酶（ＤＮａｓｅ和ＲＮａｓｅ）处理后的病毒感染ＨｅＬａ细胞以及非感染的ＨｅＬａ细胞进行原位ＲＴ－ＰＣＲ检测。结果经扩增后，病毒感染的ＨｅＬａ细胞呈蓝黑阳性信号；并且这种阳性信号经ＲＮａｓｅＡ作用而消失，却不受ＤＮａｓｅ作用的影响；而非感染的ＨｅＬａ细胞则不着色。结论原位ＲＴ－ＰＣＲ法可特异地检测柯萨奇Ｂ病毒感染ＨｅＬａ细胞中的病毒ＲＮＡ，是一种特异和敏感的定位检测方法。
- 张凤民赵德超郭淑元郭彩玲郭彩玲
- 关键词：柯萨奇B病毒HELA细胞RNA
- 人类免疫缺陷病毒包膜糖蛋白V3对细胞结合能力的研究
- I型人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus type I,HIV-1)进入靶细胞是由病毒包膜糖蛋白 gp120和gp41与细胞表面受体CD4分子和一种趋化受体相互作用所介导。趋化受体作...
- 凌虹李殿俊谷鸿喜服部俊夫
- 关键词：包膜糖蛋白V3人类免疫缺陷病毒
- 文献传递
