洪登峰
- 作品数：37 被引量：104H指数：6
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- 油菜开花关键基因BnaFT.A2作为油菜开花时间改良的分子标记及应用
- 本发明提供了油菜开花关键基因BnaFT.A2作为油菜开花时间改良的分子标记及应用，属于分子标记技术领域。本发明提供了甘蓝型油菜BnaFT基因不同拷贝突变在调控油菜开花时间中的应用，并提供了两种BnaFT.A2的基因单倍型...
- 洪登峰 万明 赵大伟 宋易先 林圣哲 杨光圣
- 油菜开花关键基因、分子标记和应用
- 本发明属于分子标记技术领域，具体涉及油菜开花关键基因、分子标记和应用。本发明提供了一种针对BnaFLC.A3b基因开发的分子标记的检测引物，所述BnaFLC.A3b基因可调控油菜开花时间，是开花期调控网络中春化途径的关键...
- 洪登峰万明赵大伟宋易先杨光圣
- 甘蓝型油菜杂交种圣光168父本根肿病抗性的遗传改良与应用被引量：3
- 2022年
- 为培育优良的抗根肿病油菜品种,以华双5R和华油杂62R(分别携带抗根肿病位点PbBa8.1和CRb)为供体亲本,以圣光168的父本Y522R为轮回亲本,通过回交与分子辅助育种相结合,将PbBa8.1和CRb导入到Y522R中,选育出遗传背景回复率均达90%以上,且分别携带PbBa8.1、CRb和^(PbBa8.1+CRb)抗病位点的近等基因系Y522R^(PbBa8.1)、Y522R^(CRb)、Y522R^(PbBa8.1+CRb),并在此基础上与圣光168母本RG430A配制了具有根肿病抗性的改良杂交种圣光168CR^(PbBa8.1)、圣光168CRCRb和圣光168CR^(PbBa8.1+CRb)。利用我国根肿菌4号优势生理小种,对改良株系及杂交种进行苗期根肿病抗性鉴定,结果表明:Y522R^(PbBa8.1+CRb)和Y522R^(CRb)改良株系及其改良杂交种圣光168CR^(CRb)和圣光168CR^(PbBa8.1+CRb)对4号生理小种具有免疫抗性;Y522R^(PbBa8.1)改良株系及其改良杂交种圣光168CR^(PbBa8.1)对4号生理小种表现为感病,但显著低于对照Y522R及圣光168。农艺性状考察结果表明,Y522R改良株系及其改良杂交种的开花期、株高、有效分枝数、角果长、每角果粒数和千粒重都与对照无显著性差异,说明这些改良杂交种可作为重要的抗根肿病油菜资源。
- 熊梅杨光圣洪登峰洪登峰
- 关键词：甘蓝型油菜根肿病抗病育种
- 甘蓝型油菜小孢子培养子叶形胚发育成苗研究被引量：3
- 2021年
- 甘蓝型油菜小孢子细胞诱导胚状体以子叶胚和非子叶胚如球形胚、心型胚和类似于胚的结构形态存在。子叶胚在成苗培养基上能够快速生长成植株,但是非子叶胚难以一次成苗,容易褐化死亡,因此减少非子叶状胚、培育高质量子叶胚是提高油菜小孢子再生成植株效率的关键步骤。为了提高甘蓝型油菜小孢子培养过程中诱导子叶胚的数目,对3个甘蓝型油菜品系分离得到的小孢子细胞在25℃下暗培养2周,之后转移到固液双层培养基上培养。通过对摇床的振荡周期、培养温度、固液双层培养基中活性炭的浓度以及6-BA不同梯度的处理,分析诱导子叶胚和非子叶胚发生的数目。结果显示,3个品系小孢子细胞在固液双层培养基上诱导得到的子叶胚数目显著高于液体培养基上诱导发生的数目。小孢子细胞在固液双层培养基上振荡培养1周所得子叶胚数目显著增加。降低小孢子培养温度至23℃,出胚总数和对照差异不显著,但子叶胚的数目显著增加。在固液双层培养基中的下层固体培养基中加入0.1%活性炭和0.25 mg/L 6-BA能够有效提高子叶胚的数目。此外,相比前人只用液体培养基培养的方法,本试验建立了两步培养方法(先液体培养后固-液双层培养)能有效获得子叶胚,从而快速生成植株,提高了甘蓝型油菜小孢子培养技术创制育种资源的效率。
- 万丽丽王转茸徐义康雷杨光圣辛强洪登峰孙玉宏
- 关键词：油菜再生植株
- 甘蓝型油菜抗草甘膦基因遗传转化及抗性鉴定被引量：1
- 2022年
- 为自主研发抗除草剂的甘蓝型油菜,从细菌(Isotericola variabilis)中克隆I.variabilis-EPSPS*基因,使油菜产生草甘膦抗性。通过农杆菌介导法将I.variabilis-EPSPS*转入甘蓝型油菜自交系育127,获得转I.variabilis-EP⁃SPS*基因单株E_(1)。草甘膦耐受性结果表明,转I.variabilis-EPSPS*基因T_(1)代在不同浓度草甘膦的培养基中能够正常生长,而非转基因对照生长严重受阻。I.variabilis-EPSPS*成功整合于油菜基因组并可稳定遗传,草甘膦处理后表达量增加,而且在草甘膦浓度改变时仍保持稳定表达。在温室用41%草甘膦异丙胺盐商品制剂(农达)600倍稀释液(1/3田间生产推荐中剂量)处理转I.variabilis-EPSPS*基因E_(1)的T_(1)植株,体内莽草酸累计量远低于非转基因对照。通过对角果长、每角果粒数和千粒重等农艺性状考察发现,转基因植株和对照相比无显著性差异。田间喷施农达400倍液(1/2田间生产推荐中剂量),发现转基因E_(1)T_(1)植株正常生长而对照全部死亡。鉴于I.variabilis-EPSPS*基因在转基因油菜中能够稳定遗传并赋予了油菜草甘膦除草剂抗性,认为该抗草甘膦转基因油菜是一份新种质。
- 杜帅万丽丽王转茸徐义洪登峰杨光圣
- 关键词：甘蓝型油菜除草剂抗性
- 甘蓝型油菜隐性细胞核雄性不育上位抑制基因(esp)的分子标记开发被引量：3
- 2011年
- 9012AB是甘蓝型油菜隐性上位细胞核雄性不育两型系,其育性受2对隐性重叠不育基因(ms3ms3ms4ms4)和1对隐性上位抑制基因(espesp)互作控制。为提高其不育系及同型临保系的选育效率,本研究以9012B和T45为基本材料,构建分离群体,鉴定与esp基因紧密连锁的AFLP标记。筛选了1 024对引物组合,鉴定出5个与esp相引相连锁的AFLP标记(L1、L2、L3、L4和L5),2个与esp相斥相连锁的AFLP标记(L6和L7)。所有标记位于esp位点的一侧,L6和L7与Esp基因共分离。其中,L1、L6和L7转化成SCAR标记SCL1、SCL2和WSCL3。在20个基因型已知的验证群体中检测,SCL1、SCL2和WSCL3的准确率分别为90%、100%和100%。结果表明三个SCAR标记可用于9012AB的分子标记辅助选择。
- 李婧婧谢彦周洪登峰刘平武何庆彪杨光圣
- 关键词：甘蓝型油菜隐性核不育分子标记
- 侧翼序列克隆方法评价被引量：35
- 2006年
- 克隆已知序列的侧翼DNA区域是基因操作实验中经常面临的任务之一。自PCR技术发明以来,以其为基础克隆侧翼序列的方法不断开发,如反向PCR(inversePCR)、捕捉PCR(capturePCR)、VectorettePCR、抑制PCR(suppressionPCR)、T接头PCR(T-linkerPCR)、多功能接头PCR(versatilecassettePCR)、AluPCR、热不对称交错PCR(thermalasymmetricinterlacedPCR)和DNA步行—复性控制引物(DNAwalking-an-nealingcontrolprimerTM)等。本文对上述方法的原理进行了简要的概括和总结,据此将其归为三大策略,即连接成环PCR、外源接头介导PCR和半随机引物PCR。对不同的策略和同一策略中不同的方法的优缺点亦进行了比较,进而讨论和展望了它们的主要应用领域和潜力,以期对实际操作起到借鉴作用。
- 洪登峰万丽丽杨光圣
- 关键词：侧翼序列
- GOX-CP4EPSP转化甘蓝型油菜的抗草甘膦研究被引量：4
- 2016年
- 利用Genome walking方法在孟山都抗农达油菜(Brassica napus L.)中克隆了GOX-CP4EPSP双顺反子结构。利用农杆菌介导的遗传转化方法将PCAMBIA-GOX-CP4EPSP植物双元表达载体转化甘蓝型油菜Pol CMS恢复系"7-5"获得转基因植株。在田间对转基因植株喷施400倍的农达(41%草甘膦异丙胺盐),所有的转基因家系都能存活,而非转基因Pol CMS恢复系"7-5"全部死亡。在转基因植株叶片中能够检测到GOX和CP4EPSP基因的表达。对转基因T1代3个家系在60 mg/L草甘膦培养基上的发芽试验以及GUS染色分析表明抗草甘膦的单株能表达与GOX-CP4EPSP共转化的GUS蛋白质,而对草甘膦敏感的单株和野生型对照植株都不能表达GUS蛋白质。鉴于GOX-CP4EPSP双顺反子在转基因油菜中的有效性和稳定性,可以作为双子叶植物遗传转化的筛选标记。
- 万丽丽王转茸辛强董发明洪登峰杨光圣
- 关键词：NAPUS双顺反子农达
- 甘蓝型油菜隐性细胞核雄性不育系9012AB遗传模式新释被引量：23
- 2010年
- 通过对甘蓝型油菜隐性细胞核雄性不育系9012AB及其临保系T45与来源不同的几个自交系和常规品种杂交和测交后代的遗传分析,提出了隐性细胞核雄性不育系9012AB的新遗传模式,即育性受2对育性基因Ms3和Rf控制。其中Ms3有2个等位基因,Ms3为野生型显性可育基因,ms3为隐性不育基因;Rf位点存在3个复等位基因,Rfc为野生型可育基因,Rfa为突变恢复型可育基因,而Rfb为突变不育基因,三者的显隐性关系为Rfa>Rfb>Rfc。按照这一遗传模式,9012AB可育株基因型为Ms3ms3RfbRfb,不育株基因型为ms3ms3RfbRfb;临保系基因型为ms3ms3RfcRfc;恢复系基因型为Ms3Ms3__或__RfaRfa。
- 董发明洪登峰刘平武谢彦周何庆彪杨光圣
- 关键词：甘蓝型油菜细胞核雄性不育复等位基因
- BnA7HSP70分子伴侣结合蛋白超表达能够提高甘蓝型油菜耐旱性被引量：7
- 2018年
- 分子伴侣结合蛋白广泛参与植物生长发育过程,在逆境下能够保护植物细胞免受胁迫。在甘蓝型油菜中超表达油菜含有HSP70热激蛋白结构域的分子伴侣基因BnA7HSP70,所得到的转基因植株在缺水条件下延缓萎蔫。通过生理生化实验证明,干旱条件下转基因植株有着更高的相对含水量、更强的渗透调节能力和较低的脂质膜过氧化性。另外,转基因植株的幼苗在萌发期表现出对糖基化酶抑制剂衣霉素处理的耐受性。Evans blue染色实验证明,转基因植株逆境下叶片死亡细胞数目比非转基因植株减少,叶片衰老相关标记基因Bn CNX1在转基因植株中下调表达证明,超表达BnA7HSP70基因所介导的途径能够减轻逆境胁迫下的植株衰老,保持叶片持绿性。在转基因植株中内质网和渗透胁迫产生的细胞死亡标记基因N-Rich蛋白Bn NRP延迟表达证明,在油菜中增强BnA7HSP70基因的表达能够缓解未折叠蛋白途径(unfold protein response,UPR)和NRP(N-rich pathway)途径介导的叶片黄萎,并降低油菜叶片失绿的标记基因BnLSC222和BnLSC54的表达。研究结果表明,在油菜中超表达BnA7HSP70基因能够提高植株在干旱条件下内质网胁迫的耐受性。
- 万丽丽王转茸辛强董发明洪登峰杨光圣
- 关键词：耐旱性甘蓝型油菜叶片衰老
