李文通
- 作品数：77 被引量：224H指数：7
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- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金山东省高等学校科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 5-氮杂脱氧胞苷对肝癌细胞HepG2中抑癌基因FHIT表达的影响被引量：5
- 2009年
- 背景与目的:肝癌细胞中由于FHIT基因过度甲基化而导致其表达降低。本实验应用甲基化酶抑制剂5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dC)作用肝癌细胞株HepG2,观察用药后肝癌细胞中FHIT mRNA和蛋白表达的变化,并观察5-Aza-dC对细胞增殖的影响。方法:以5-Aza-dC作用HepG2细胞,采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation-specific polymerase chain reaction,MSP)检测HepG2细胞中FHIT甲基化变化;采用RT-PCR检测FHIT mRNA的表达;采用细胞免疫组织化学染色和Western blot方法检测FHIT蛋白表达,MTT法检测HepG2细胞增殖情况。结果:5-Aza-dC处理前,HepG2细胞FHIT基因呈甲基化状态,mRNA及蛋白表达缺失;经5-Aza-dC作用后,MSP显示HepG2细胞FHIT基因甲基化逆转;经1.0μmol/L、2.0μmol/L及4.0μmol/L的5-Aza-dC作用48h后,FHIT基因mRNA扩增出产物的吸光度值分别为0.80±0.32、1.41±0.54和1.51±0.61,Western blot检测产物积分灰度值分别为0.33±0.20、1.00±0.26和1.12±0.38;当药物浓度达到1.0μmol/L时出现了对HepG2细胞增殖的抑制作用。结论:5-Aza-dC能明显逆转HepG2细胞的FHIT基因异常甲基化,激活因高甲基化所致基因沉默的再转录,诱导该基因的表达;同时抑制细胞增殖。
- 李洪利张伟栋李文通尹崇高
- 关键词：5-氮杂脱氧胞苷FHIT基因甲基化
- Cx43基因启动子去甲基化与乳腺癌MDA-MB231细胞上皮间质转换的相关性研究被引量：2
- 2011年
- 目的:探讨乳腺癌细胞中连接蛋白43(Cx43)基因启动子甲基化与乳腺癌上皮间质转化(EMT)的关系。方法:甲基化PCR检测Cx43启动子甲基化的频度;5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza-dC)培养乳腺癌MD-MBA-231细胞后,反转录PCR(RT-PCR)乳腺癌细胞中Cx43 mRNA,免疫荧光、蛋白质印迹法检测E-cadherin、波蛋白(vimen-tin)及Cx43蛋白表达,甲基化PCR检测启动子甲基化的变化。结果:在应用5-Aza-dC处理前,MD-MBA-231 Cx43基因呈甲基化状态,将4.0μmol/L的5-Aza-dC作用48 h后,乳腺癌细胞Cx43基因甲基化逆转;Cx43mRNA表达水平增加,为对照组的6.5倍。蛋白质印迹检测结果显示,Cx43蛋白相对灰度值为4.3±0.2,明显高于对照组。处理组细胞E-cadherin表达增加,vimentin表达下调。结论:5-Aza-dC能逆转乳腺癌细胞MD-MBA-231的Cx43基因异常甲基化,促进Cx43基因的再表达,在一定程度上逆转乳腺癌MDA-MB231细胞EMT。
- 赵修世王红梅孙静王琳李文通
- 关键词：连接蛋白43甲基化
- 血管活性肠肽在胃溃疡中的表达及其与胃溃疡发病的关系被引量：6
- 2008年
- 目的检测血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)在人胃溃疡组织中的表达和分布,探讨VIP在胃溃疡发病机制中的作用,为内分泌治疗提供理论依据。方法收集潍坊医学院附属医院2000-2005年的胃溃疡标本进行免疫组织化学染色,观察VIP在胃溃疡组织中的表达,收集新鲜的胃大部切除手术后胃溃疡标本,采用RT-PCR(re-verse transcription polymerse chain reaction)检测VIP mRNA的表达。结果胃溃疡边缘VIP免疫阳性物质在黏膜层和黏膜下层较正常胃组织显著减少(P<0.01)。胃溃疡VIP免疫阳性物质在肌间神经丛、肌层分布丰富,较正常胃组织明显增多(P<0.05)。RT-PCR结果表明在正常胃组织和胃溃疡组织中VIP均有表达,光密度分析显示在胃溃疡VIP光密度比值大于正常胃组织VIP光密度比值(P<0.05)。结论免疫组织化学及RT-PCR结果在分子和基因水平显示胃溃疡中VIP表达的变化,表明VIP在胃溃疡发病中起着重要的作用。
- 李洪利张伟栋刘雨清李文通
- 关键词：胃溃疡VIP免疫组织化学RT-PCR
- 双歧杆菌对兔VX2瘤组织的靶向性及其对肝癌细胞抑制作用的研究被引量：2
- 2009年
- 目的探讨青春型双歧杆菌对兔VX2瘤肿瘤组织的靶向性及其对人肝癌细胞的体外抑制作用。方法①建立荷VX2瘤兔模型,实验组经耳缘静脉注射青春型双歧杆菌;对照组经耳缘静脉注射生理盐水。处死动物,取出脏器和肿瘤组织粉碎后进行厌氧培养和革兰氏染色,观察双歧杆菌对肿瘤的靶向性。②采用超声波细胞粉碎法提取双歧杆菌细胞壁(BCW),应用MTT法和镜下观察来证明BCW体外对人肝癌细胞HepG-2的抑制作用。结果①实验组瘤组织中可见革兰氏阳性菌落,对照组及实验组各正常组织培养未查见。②不同浓度BCW均能抑制HepG-2细胞生长,且BCW浓度越大,抑制作用越强(P<0.05),且镜下观察到HepG-2细胞的生长状态逐渐减弱。结论青春型双歧杆菌能够在兔VX2瘤组织中靶向定植,且其细胞壁能够在体外抑制肝癌细胞的生长。
- 蔡晓珊朱洪光张式暖李文通刘静窦建新
- 关键词：青春型双歧杆菌靶向性肝癌细胞抑瘤
- 熄风止颤合剂对PSI诱导的帕金森病模型大鼠脑的影响被引量：3
- 2011年
- 目的观察熄风止颤合剂对蛋白酶抑制因子Ⅰ(proteasome inhibitors I,PSI)诱导的帕金森病(PD)慢性动物模型大鼠行为学及大脑多巴胺神经元的影响。方法雄性SD大鼠背部皮下注射PSI,制备慢性PD动物模型,将造模成功大鼠随机分为三组:分别以生理盐水、美多巴及熄风止颤合剂进行灌胃治疗,观察其行为学变化,并分别通过TUNEL法、电镜、免疫组织化学方法观察大鼠脑多巴胺神经元的变化。结果中药熄风止颤合剂可以改善PD的症状,且中药组大鼠大脑中多巴胺神经元的密度高于美多巴组,细胞凋亡指数低于美多巴组。结论熄风止颤合剂对PD有治疗作用,其作用可能是通过降低多巴胺神经元的凋亡。
- 周风华李文通李媛媛任凡刘雨清
- 关键词：帕金森病美多巴多巴胺神经元
- NUAK1能促进乳腺癌上皮-间质转化的发生引起侵袭转移被引量：7
- 2013年
- 目的探讨NUAK1(NUAK family SNF1-like kinase 1)与上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)及乳腺癌侵袭转移之间的关系。方法应用免疫组织化学染色法检测100例乳腺癌组织及其癌旁正常组织(>5 cm)中NUAK1、EMT相关蛋白上皮-钙黏素(epithelial-cadherin,E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达,并分析其相关性。应用RNAi技术将合成的小RNA干扰质粒瞬时转染乳腺癌细胞系MDA-MB-231后,进行Western blot检测转染成功后,应用Transwell侵袭实验检测细胞体外侵袭能力,再检测转染细胞中E-cadherin、Vimentin蛋白的表达情况。结果浸润性导管癌组织中NUAK1蛋白的表达率明显高于导管内癌和癌旁正常组织(P<0.01);浸润性导管癌中NUAK1蛋白的表达与分化程度、淋巴结转移、远处转移、E-cadherin、Vimentin的表达有关(P<0.05),与患者的年龄、肿瘤的大小、ER、PR及c-erbB-2的表达无关(P>0.05)。转染72 h后,与Scr/MDA-MB-231细胞相比,siNUAK1/MDA-MB-231细胞中NUAK1蛋白表达水平明显降低的同时,细胞的体外侵袭能力明显降低(P<0.05)。并且伴有Vimentin蛋白表达水平的降低和E-cadherin蛋白表达水平的升高(P<0.05)。结论 NUAK1能促进乳腺癌EMT的发生,从而促进乳腺癌的侵袭转移。
- 刘菲孙磊张丽娜田慧玲李洪利李文通张宝刚尹崇高
- 关键词：乳腺癌上皮间质转化E-CADHERINVIMENTIN
- 芪参益气滴丸对大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用机制研究被引量：10
- 2017年
- 目的探讨芪参益气滴丸(QS)对大鼠心肌缺血再灌注时,心肌细胞尿路上皮癌胚抗原1(UCA1)长链非编码RNA、凋亡及凋亡相关基因表达的影响。方法结扎SD大鼠冠状动脉左前降支,造成心肌缺血40 min后剪断结扎线,再灌注120 min,复制实验性心肌缺血再灌注模型,将36只大鼠随机分为假手术组(只穿刺不结扎,Control组)、缺血再灌注组(I/R组)、QS干预组(QS+I/R组),术后采用原位末端标记法检测心肌细胞凋亡指数,采用荧光定量聚合酶链反应分析并检测3组大鼠心脏组织中UCA1的表达,Western blot检测p27蛋白表达水平。结果 QS+I/R组的细胞凋亡数与I/R组比较,差异有统计学意义(P<0.05);与I/R组比较,QS+I/R组UCA1整体表达水平上升,而p27蛋白减少(P<0.05);并且UCA1与p27蛋白的表达呈负相关。结论QS能降低大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡率,其可能通过上调UCA1水平,减少p27蛋白表达,保护损伤的心肌细胞。
- 陈君李蕾陈国华刘传亮李文通
- 关键词：芪参益气滴丸心肌缺血再灌注P27蛋白
- β3肾上腺素能受体基因多态性与糖尿病足的相关性研究被引量：2
- 2014年
- 目的 探讨中国人群β3肾上腺素能受体（β3-AR）基因Trp64Arg突变与糖尿病足的关系.方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法检测110例2型糖尿病患者（T2DM组）[其中糖尿病足患者58例（DFU组）,单纯2型糖尿病患者52例（N-DFU组）]和42例正常人（正常对照组）β3-AR基因的Trp64Arg突变,比较各组的基因型（TT型,TA型或AA型）和基因频率（T或A）；并进行人体测量学和代谢指标的检测.结果 （1）β3-AR基因Trp64Arg基因型频率符合Hardy-Weinberg平衡定律,T2DM组β-AR基因64位Arg突变患者,其体重指数和稳态模型评估-胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）显著高于无突变组（P=0.007 2,P=0.038 6）.（2）在T2DM组,Arg64携带者血高密度脂蛋白-胆固醇水平明显低于非携带者（P =0.047 5）.（3）DFU组Arg64等位基因频率明显高于N-DFU组（x2=5.147,P＜0.05）,而T2DM组与正常对照组β3-AR基因型及等位基因频率无统计学意义（x2=0.067,P ＞0.05）.结论 β3-AR基因多态性与糖尿病足存在相关性,Ar64等位基因可能是糖尿病足的危险因素之一.
- 惠宗光周学伟李文通孙金红侯宁宁孙红喜
- 关键词：Β3肾上腺素能受体基因多态性糖尿病足胰岛素抵抗
- 内皮抑素对肝癌HepG-2细胞生长和血管内皮生长因子表达的影响被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨内皮抑素对人肝癌细胞株HepG-2细胞生长和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及其可能的机制。方法:采用MTT法检测不同浓度的内皮抑素作用不同时间后对HepG-2细胞生长的抑制作用;电镜观察加药前后HepG-2细胞超微结构的变化;免疫组织化学法检测内皮抑素作用前后HepG-2细胞中存活素表达的改变;RT-PCR法检测加药前后HepG-2细胞中VEGF基因表达的变化。结果:内皮抑素能抑制HepG-2细胞的生长增殖,呈剂量-时间依赖性,并诱导细胞凋亡;内皮抑素作用后HepG-2细胞中存活素表达明显减少,VEGF表达明显减少。结论:内皮抑素通过下调存活素的表达,诱导HepG-2细胞的凋亡、抑制其增殖,并能显著降低HepG-2细胞中VEGF的表达。
- 刘静郭文君韩献成李文通
- 关键词：内皮抑素肝癌细胞存活素
- EMT经p38-MAPK调节乳腺癌MCF-7细胞P-gp介导的多药耐药被引量：6
- 2010年
- 目的:探讨乳腺癌细胞中上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)与P-糖蛋白(P-glucoprotein,P-gp)介导的多药耐药(multidrug resistance,MDR)的关系及其可能的机制。方法:将携Snail基因的真核表达载体pcDNA-Snail转染人乳腺癌细胞MCF-7,用多柔比星(doxorubicin,DOX)诱导各组细胞耐药。免疫细胞荧光检测上皮标志物E-钙黏素(E-cadherin)、间质标志物波形蛋白(vimentin)以及P-gp的表达,MTT检测耐药细胞的增殖,RT-PCR检测Snail、MDR1、p38-MAPK mRNA的表达。结果:细胞免疫荧光显示,转染pcDNA-Snail载体后,MCF-7细胞发生EMT,E-cadherin表达显著降低,vimentin表达显著升高;P-gp在发生EMT的MCF-7细胞中表达显著升高。经DOX诱导,MCF-7/Snail细胞的耐药能力较MCF-7/DOX细胞显著增强(P<0.05)。RT-PCR显示,MCF-7细胞发生EMT后,p38-MAPK表达显著升高(P<0.05),MDR1表达较亲本细胞明显升高(P<0.01)。结论:MCF-7细胞发生EMT后,可能通过p38-MAPK引发P-gp介导的MDR。
- 唐勇王辉陈伟娟李文通李洪利赵修世
- 关键词：SNAIL基因多药耐药P-糖蛋白
