朱建伟
- 作品数：21 被引量：44H指数：3
- 供职机构：上海交通大学药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市浦江人才计划项目上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程理学更多>>
- CHO-S高产量细胞株的新型构建方法及其评价被引量：3
- 2019年
- 中国仓鼠卵巢(CHO)细胞是工业生产重组蛋白类生物药物的主要宿主细胞之一。重组蛋白工程细胞株的传统构建方法是通过外源基因的随机整合和多步骤的加压筛选获得,这种方法耗时费力。本研究主要介绍了一种新型的悬浮类型CHO细胞(CHO-S)高产细胞株的构建方法,利用Crispr/Cas9介导的定点整合技术,将重组蛋白编码基因快速、准确地整合到CHO-S细胞基因组中的转录活跃区,实现重组蛋白的高产量表达。采用本方法成功构建得到了高表达单克隆抗体细胞株,并验证了细胞产物质量一致性。
- 赵梦琳刘继东朱祥平路慧丽朱建伟
- 基于风险评估的技术转移及其管理被引量：6
- 2020年
- 制药企业的药品生产和质量管理中已经广泛运用了风险管理,GMP对于风险管理也有较为明确的要求。但是在产品技术转移项目中尚未普及风险管理的理念。本文将对技术转移项目中各个阶段如何制定风险管理计划、确定风险管理策略、运用风险管理工具给出建议。将风险分析全面纳入到技术转移项目中去可以有效确保转移后的产品安全可靠。
- 李力丁满生路慧丽朱建伟
- 关键词：技术转移风险管理GMP项目管理
- 药用重组人IL-15蛋白及氧化还原副产物的HPLC及LC-MS分析
- 2018年
- 重组人白细胞介素-15(rh IL-15)具有显著的T细胞及NK细胞增殖和活化功能,在肿瘤免疫治疗、疫苗佐剂等领域的临床应用前景良好,已有多个临床试验在进行中。为提高rh IL-15的质量控制水平,须开发快速、精准的检测方法。本研究针对rh IL-15纯化过程中的氧化还原副产物,开发了基于反相液相色谱(RP-HPLC)及液相色谱-质谱联用(LC-MS)技术的方法,通过分析色谱峰及相应的相对分子质量,以准确判断产品及其氧化还原状态。利用本方法能够分析rh IL-15生产工艺中的中间产品和终产品的质量,指导生产工艺的改进,提高rh IL-15产品的质量水平。
- 陈欢欢李宁环边延林路慧丽朱建伟
- 关键词：白细胞介素15液相色谱-质谱
- 重组人白细胞介素-1受体拮抗剂对急性肝衰竭小鼠肝脏保护作用的评价被引量：3
- 2019年
- 采用(+)-D-氨基半乳糖盐酸盐(D-Ga1N)结合脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肝衰竭(AHF)来评价重组人白细胞介素-1受体拮抗剂(rhIL-1Ra)对肝脏的保护作用。本研究用SPF级雄性C57BL/6小鼠建立AHF模型。造模前1 h,小鼠腹腔注射3、9 mg/kg的rhIL-1Ra或等体积的生理盐水(NS),注射造模药物后4 h采集小鼠血液和肝组织样本。分析各组小鼠循环中的谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)水平和肝组织切片,并用荧光定量PCR方法分析肝组织中一氧化氮合成酶2(NOS2)和白细胞介素-6(IL-6)的表达水平变化。本研究还进一步通过死亡率试验考察rhIL-1Ra对AHF模型小鼠的保护作用。结果表明,9mg/kg剂量的rhIL-1Ra可以显著抑制AHF模型小鼠循环中的ALT和AST活性以及TBIL水平,减轻肝组织坏死和肝细胞变性程度,降低肝组织中NOS2和IL-6的表达。2个剂量(3和9mg/kg)的rhIL-1Ra都可以显著地改善AHF模型小鼠的生存率。结果表明,rhIL-1Ra在AHF药物开发和临床应用中具有潜在价值。
- 朱晨岑郑滢肖欣怡朱建伟袁运生
- 关键词：急性肝衰竭受体拮抗剂谷丙转氨酶谷草转氨酶
- 应用Cre-loxP系统构建肝组织特异性ATF5基因敲除小鼠模型被引量：2
- 2021年
- 应用Cre-loxP重组酶系统构建肝组织特异性ATF5基因敲除小鼠(ATF5^(Flox/Flox)-Alb-Cre^(+/-))模型。采用Alb-Cre工具鼠,用带有Cre-loxP系统的ATF5 Flox纯合子小鼠(ATF5^(Flox/Flox))和带有Alb-Cre杂合子(Alb-Cre^(+/-))的转基因小鼠进行杂交,对产生的子代利用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)进行基因型鉴定。筛选出子代ATF5^(Flox/-)-Alb-Cre^(+/-)小鼠,其与ATF5^(Flox/Flox)小鼠进一步交配可获得ATF5^(Flox/Flox)-Alb-Cre^(+/-)小鼠,该基因型小鼠的肝细胞基因组中ATF5的外显子缺失。选取雌性、7~8周龄的ATF5^(Flox/Flox)-Alb-Cre^(+/-)和ATF5^(Flox/Flox)-Alb-Cre^(-/-)小鼠各3只,采用实时荧光定量PCR测定ATF5在肝、肾、心和脑组织中的表达量,并采用常规苏木精-伊红(HE)染色,观察2种小鼠各脏器的组织形态。结果表明,该系统可实现ATF5在肝脏中的特异性敲除,敲除效率可达到97%。此外,2种小鼠的肝、肾、肺、心和脑组织形态无明显改变,可为研究ATF5在肝脏中的生物学功能提供体内模型参考。
- 白思益陈会帕梅拉·帕尔哈提邓晴朱建伟袁运生
- 关键词：基因型鉴定
- 生物药物研发的技术创新
- 创新的生物药物随着技术的不断创新而发现,同时技术创新又加速了新的生物药物的研发速度及提升生产水平。目前越来越多的治疗性抗体处在研发阶段,如何更有效地缩短开发周期成为生物药物研发面临的最大挑战。特别是这几年随着精准的个性化...
- 朱建伟
- 关键词：生物药物双特异抗体细胞株
- 文献传递
- 化学合成原料药生产设备清洗的关键因素探讨被引量：3
- 2019年
- 本文根据国外法规及相关行业指导原则,结合实际工作经验,对化学合成原料药生产过程中设备清洗需要考虑的因素进行综述和探讨。本文介绍了清洁可接受水平、清洗方法、清洁验证等重要概念及方法,并通过具体实例讨论了化学合成原料药生产设备清洗的关键因素,为化学合成原料药生产设备清洗提供参考。
- 王庆朱建伟
- 关键词：清洗方法
- 医药工业的计算机化过程中遗留系统的验证策略被引量：3
- 2019年
- 随着医药工业设备的自动化、信息化程度越来越高,计算机化系统为制药企业提供了更好的操作保证,也提高了生产的效率和收益率。因此,药品生产质量过程中的计算机化系统的合规性已成为医药工业依从GMP法规的重要要求。本文通过分析研究,对我国企业在GMP附录11《计算机化系统》正式实施之前已经使用的遗留系统的合规性问题,提出基于风险评估,以差距分析法验证遗留系统的验证策略。同时结合笔者实践项目"A公司在线粒子监控系统的验证"来说明如何对企业的遗留系统进行计算机化系统验证。
- 赵晨阳朱建伟
- 关键词：风险管理
- 重组人GPx7的原核表达、纯化及其抗肿瘤活性检测被引量：1
- 2014年
- 研究大肠杆菌表达重组人谷胱甘肽过氧化物酶7(glutathione peroxidase 7,GPx7),并对纯化精制的重组人GPx7进行体内抗肿瘤活性检测。以质粒pCDNA3.1(-)-GPx7为模板,PCR扩增获得N-端去除信号肽的GPx7基因片段,构建的重组质粒pET24A-GPx7在E.coli BL21(DE3)中诱导表达。采用Sulfopropyl强阳离子交换层析和Superdex 75分子排阻层析纯化精制获得原核表达的重组人GPx7蛋白。该蛋白的体外催化活性微弱,但S180荷瘤小鼠连续14d注射GPx7蛋白后,肿瘤生长受到抑制,抑制率为29.26%,与对照组相比具有显著差异。实验结果表明,采用阳离子交换和分子排阻层析两步法可纯化精制原核表达的重组人GPx,重组人GPx7蛋白在荷瘤小鼠模型中表现出体内抗肿瘤活性。
- 陈欣麟钱秀萍朱建伟戈梅陈代杰毛文伟
- 关键词：纯化
- GMP环境下基于风险的供应商现场审计被引量：13
- 2016年
- 基于风险评估的质量管理体系已经广泛运用于制药工业,制药企业使用的原辅材料是质量控制的源头。本文根据质量风险管理的理念和工具,对原辅材料供应商的风险进行等级划分,包括固有风险和合规风险,制定量化风险矩阵,从而决定供应商的风险等级以及下次常规审计频率和审计策略。本文推荐这样一套有效的基于风险的供应商管理系统,以确保原辅材料供应链的安全可靠。
- 杨雅静路慧丽朱建伟
- 关键词：质量风险管理GMP合规风险
