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牛呼吸道合胞体病毒G蛋白抗原区原核表达及反应原性鉴定被引量：2: 2021年; 本研究旨在获得重组牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)G蛋白并对其进行反应原性鉴定。从NCBI上找出G基因的核苷酸序列,分析其抗原区域,利用Primer Premier 5.0软件设计1对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增BRSV G基因片段,将目的片段连接到克隆载体pMD19-T后,对其进行双酶切鉴定和测序。将双酶切后的目的片段进行胶回收,构建重组质粒pET-32a-G,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,用Ni-IDA亲和层析法纯化经IPTG诱导表达的蛋白,并测定其浓度;通过SDS-PAGE和Western blotting方法对该蛋白进行分析与鉴定。结果显示,本试验成功克隆出大小约为567 bp的G基因,获得分子质量约为40 ku的可溶性重组蛋白,优化诱导条件后用SDS-PAGE对表达产物进行鉴定,在16℃、IPTG浓度1.2 mmol/L、诱导4 h时蛋白表达量最大;通过Western blotting检测发现,重组蛋白可与山羊源BRSV标准阳性血清发生特异性反应,说明该蛋白具有反应原性。综上,本研究成功表达并纯化了BRSV G蛋白,为建立BRSV抗体间接ELISA检测方法和BRSV亚单位疫苗的研制奠定了基础。; 武春霞周雅坪郭婷崔琦王宇琛田广原思汗孙衍立郝永清; 关键词：G蛋白原核表达可溶性表达反应原性

牛支原体与BVDV共感染协同致病机制研究: 牛呼吸道综合征（Bovine Respiratory Disease Complex,BRDC）是威胁全世界养牛业的重要疾病。引起BRDC的主要病原有:牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea vir...; 郭婷; 关键词：牛病毒性腹泻病毒牛支原体转录组学

蒙古沙冬青AmGPAT和AmFAD8基因的克隆与功能分析: 叶绿体中的类囊体是植物光合作用过程中进行光反应的场所，是受温度影响最敏感的部位之一。磷脂酰甘油(phosphatidylglycerol,PG)是类囊体膜中唯一的磷脂，其脂肪酸的不饱和程度与植物对低温的敏感性密切相关。叶...; 郭婷; 关键词：基因克隆基因表达

一种燕麦田除草组合物及其制备和使用方法: 本发明公开了一种燕麦田除草组合物及其制备和使用方法，该除草组合物活性成分包括二甲四氯异辛酯、辛酰溴苯腈和硝磺草酮，各成分的质量比为二甲四氯异辛酯∶辛酰溴苯腈∶硝磺草酮＝(1‑2.4)：(1‑2.4)：(0.7‑1.6)。...; 张笑宇周洪友王野王丽玮杨春芳郭婷班瑞娟李乐乐; 文献传递

一种秸秆降解菌WXB10及其应用: 本发明涉及一种秸秆降解菌WXB10及其应用。本发明所提供的秸秆降解菌为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)WXB10。其在中国典型培养物菌种保藏管理中心的登记入册编号为CCTCC M 2022680。...; 修志君张笑宇郭婷白松林王鹏张新宇

荞麦茎溃疡病生防菌的分离鉴定及其防效研究: 荞麦是集营养、保健、药用、饲料和蜜源于一身的多用型杂粮经济作物,并且作为一种独具特色的农作物,在发展特色农业、区域农业和巩固乡村振兴方面有着极其特殊的作用。荞麦茎溃疡病（Rhizoctonia spp.）是影响荞麦产量和...; 郭婷; 关键词：荞麦丝核菌复合菌系田间防效

中澳自贸区建立对中国乳品进口的影响研究: 中国和澳大利亚自由贸易区谈判从2005年3月的联合可行性研究开始，到2012年3月的堪培拉谈判，共举行了十八轮，目前中澳双方已在货物贸易、卫生和植物卫生问题、海关手续等问题的谈判上取得了进展，但是在农产品关税减让及设定敏...; 郭婷; 关键词：自由贸易区乳制品进口贸易; 文献传递

绵羊肺炎支原体P60_(58aa-928aa)蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立被引量：5: 2022年; 【目的】建立基于绵羊肺炎支原体表面脂蛋白P60的间接ELISA方法。【方法】利用生物信息学软件对P60蛋白进行抗原性分析,筛选出抗原性最佳的区域,扩增目的基因后构建重组表达载体并进行基因测序,将测序正确的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG诱导抗原性最佳蛋白表达并进行诱导时间优化;利用SDS-PAGE分析该蛋白分子质量大小及其表达形式。以重组蛋白作为抗原,绵羊肺炎支原体阳性血清作为抗体,通过Western blotting方法分析其反应原性。以重组蛋白为包被抗原,建立抗原性最佳蛋白的间接ELISA抗体检测方法,用该方法对20份阴性血清进行检测,计算阴阳临界值;检测该方法的特异性、敏感性和重复性,并用建立的间接ELISA方法与间接血凝法对92份绵羊临床血清样本进行检测。【结果】经DNAStar分析,P60蛋白第58-928位氨基酸区域的平均抗原指数在0.8~1.7之间,亲水指数为0~2.0,证明该区域(P60_(58aa-928aa))抗原性和亲水性较强;通过PCR扩增得到P60_(58aa-928aa)基因,并构建重组表达载体,通过基因测序证明该重组表达载体与预期结果一致。SDS-PAGE结果显示,IPTG诱导浓度为1 mmol/L,诱导10 h时蛋白表达量较高,蛋白分子质量为42 ku,在大肠杆菌中以包涵体的形式表达;Western blotting结果表明,构建的重组蛋白具有良好的反应原性。对ELISA各条件进行优化结果显示:抗原包被浓度为0.5μg/mL,一抗最佳稀释浓度为1∶100,最佳孵育时间为1.5 h,酶标二抗最佳稀释倍数为1∶4000,判定阴阳性血清的临界值为0.36。对口蹄疫病毒(FMDV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)、布氏杆菌(Brucella)、牛支原体(Mb)、丝状支原体山羊亚种(Mmc)的标准阳性血清的检测均为阴性,证明该方法特异性较强;敏感性试验结果表明,血清稀释度为1∶2048时仍为阳性;批内重复试验和批间重复试验的变异系数均<10%,证明该方法具有较好的; 田广原王宇琛周雅坪郭婷赵红梅赵逢淼孙雅婕卞宇晨于佳梁周雨霞; 关键词：绵羊肺炎支原体原核表达间接ELISA

几种杀菌剂对荞麦茎溃疡病菌的生物活性和田间防治效果: 2024年; 荞麦茎溃疡病是影响荞麦产量和品质的重要因素,选用常用真菌杀菌剂,测定其对荞麦茎溃疡病菌生物活性并进行田间防治效果试验。生物活性测定结果显示,40%氟硅唑EC、25g/L咯菌腈FS、15%三唑酮WP、40%福美·拌种灵WP抑制作用较好,其中40%氟硅唑EC 500μg/m L抑制率最高,为89.7%,有效浓度EC_(50)为1.56μg/L。田间防治效果试验中,250 g/L嘧菌酯SC 675~855 m L/hm^(2)、40%氟硅唑EC 150~375 m L/hm^(2)、250 g/L吡唑·醚菌酯EC 570 m L/hm^(2)、40%福美·拌种灵WP 0.15~2.85 g/hm^(2)和50%氟啶胺SC 375~480 m L/hm^(2)防治效果较好,产量和净利润明显提升。生产中,荞麦茎溃疡病可以使用嘧菌酯、氟硅唑、吡唑·醚菌酯、福美·拌种灵和氟啶胺沟施防治。; 郭婷刘雨薇吴进蓉班瑞娟岳文冉李哲王莉花王莉花; 关键词：荞麦丝核菌生物活性

马铃薯疮痂病生防链霉菌菌株PBSH9发酵条件优化: 2024年; 以发酵液菌量为筛选指标,采用单因素方法筛选菌株PBSH9的最佳碳源、氮源、接种量、pH、温度及培养时间,以优化发酵培养条件。结果表明,小麦麸皮最有利于菌株PBSH9的生长,将小麦麸皮以1%浓度替代高氏1号培养基的可溶性淀粉时,菌株PBSH9发酵液菌落数为1.04×10^(11)CFU/mL,抑菌率为60.3%;豆粕饼粉最有利于菌株PBSH9的生长,以0.5%浓度取代高氏1号培养基的硝酸钾时,菌落数及抑菌率最大,分别为1.24×10^(11)CFU/mL和55.6%;将浓度为1×10^(8)CFU/mL种子液以4%比例接种到高氏1号培养基中,发酵液菌量和抑菌率最大,菌落数为1.45×10^(11)CFU/mL,抑菌率为71.9%;菌株PBSH9 pH 6.0~7.0抑菌率最高,分别为66.3%和65.8%;28℃时发酵液菌落数和抑菌率最大,菌落数为1.02×10^(12)CFU/mL,抑菌率为69.1%;在优化发酵培养基中培养6 d时,菌量最大,抑菌率(71.9%)最高。; 宋亚迪郭婷修志君王丽玮杨春芳王淑华张笑宇; 关键词：马铃薯马铃薯疮痂病链霉菌生防菌发酵条件

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郭婷

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