蔡春
- 作品数：36 被引量：145H指数：8
- 供职机构：中南大学更多>>
- 发文基金：World Health Organization湖南省科技厅资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 日本血吸虫CAI基因的亚克隆表达与免疫保护效果研究
- 2003年
- 目的 克隆和表达日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)CAI基因 ,并对表达产物进行免疫保护效果测定 ,评价其作为血吸虫疫苗候选分子的潜能。 方法 将SjCAI基因亚克隆至pGEX 5X 3载体 ,转化入感受态大肠杆菌ER2 56 6 ,在异丙基 β D 硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导下进行表达 ,用表达产物免疫小鼠 ,并设分别注射等体积的弗氏完全佐剂和PBS的两组对照组 ,观察免疫保护效果。 结果 在IPTG诱导下 ,表达载体中的SjGST基因与重组的SjCAI基因在大肠杆菌中获得了高效融合表达 ,将其免疫小鼠 ,诱导产生了 2 9.87%的减虫率和 6 3.71 %的减卵率。 结论 SjCAI基因亚克隆至pGEX 5X 3载体后可在大肠杆菌中高效表达 。
- 罗秀菊袁仕善易新元曾宪芳张顺科唐连飞蔡春章洁Larry McReynolds
- 关键词：日本血吸虫免疫保护基因表达亚克隆
- 日本血吸虫Sj31核酸疫苗联合IFN-γ重组质粒诱导小鼠保护性免疫的研究被引量：5
- 2004年
- 目的 探讨干扰素 γ重组质粒对日本血吸虫组织蛋白酶B核酸疫苗在小鼠抗血吸虫作用的影响。 方法 将小鼠干扰素 γ基因PCR扩增片段克隆入真核表达载体pCDNA3 1以构建重组真核表达质粒pCDNA3 1 IFN γ ,并与日本血吸虫组织蛋白酶B真核表达质粒VR10 12 Sj3 1一同免疫小鼠。小鼠分为 4组 ,其中实验组每鼠同时肌注VR10 12 Sj3 1及pCDNA3 1 IFN γ各 10 0 μg ,3个对照组分别为VR10 12 Sj3 1肌注 10 0 μg ,pCDNA3 1 IFN γ肌注 10 0 μg和载体VR10 12及pCHAN3 1肌注各 10 0 μg。共免疫 3次 ,每次间隔 2周。于末次免疫后两周免疫组化检测表达质粒在小鼠肌细胞的表达 ,于末次免疫后 3周经小鼠皮肤攻击感染 40± 1条日本血吸虫尾蚴。 45d后杀小鼠计算减虫率。 结果 VR10 12 Sj3 1及pCDNA3 1 IFN γ均在小鼠肌细胞表达 ,日本血吸虫Sj3 1核酸疫苗联合IFN γ重组质粒免疫可诱导小鼠产生 2 7 3 7%的减虫率 ,与日本血吸虫Sj3 1核酸疫苗单独免疫组比较减虫率显著 (P <0 0 5 )。 结论 IFN
- 陈欲晓易新元曾宪芳唐连飞王林纤蔡春袁仕善
- 关键词：日本血吸虫IFN-Γ重组质粒小鼠保护性免疫
- 重组日本血吸虫副肌球蛋白诱导水牛保护性免疫的研究被引量：12
- 2000年
- 为观察重组日本血吸虫副肌球蛋白 (r Sj97)对水牛的保护效果。 2 0头水牛随机分为佐剂 (Quil A)对照组和抗原 (r Sj97)免疫组。对照组仅注射 Quil A,而免疫组注射 Quil A加 r Sj97,在第 0、2、15周肌肉注射。第 3次免疫后两周经腹部贴片攻击感染 10 0 0条日本血吸虫尾蚴 ,感染后第 49d剖杀冲虫 ,计数虫数和肝卵数。结果显示 ,与对照组相比 ,r Sj97免疫组的减虫率为 49.9% (P<0 .0 5 ) ,肝脏减卵率 5 7.3% (P<0 .0 1)。提示 r Sj97可诱导水牛产生一定程度的抗血吸虫攻击感染的保护性免疫力 ,并具有一定程度的抗病作用 ,进一步证实了副肌球蛋白可作为抗血吸虫病的候选疫苗分子。
- 周金春易新元曾宪芳张顺科曾庆仁蔡春Joanna WongDon Mc Manus
- 关键词：日本血吸虫免疫水牛
- IL-12对日本血吸虫重组SjGST-Sj32蛋白保护性免疫效果的影响被引量：1
- 2000年
- 为进一步提高重组 Sj GST- Sj32 (r Sj GST- Sj32 )的免疫保护作用 ,用 IL- 12作为佐剂进行免疫增强效果的观察。在 0、2、6周用 r Sj GST- Sj32经皮下免疫小鼠 3次 ,攻击感染后 1、3、5、7、9d经腹腔注射佐剂 IL- 12 ,用减虫率及减卵率表示保护性免疫力。结果与 PBS对照组相比 ,r Sj GST- Sj32 /IL- 12组减虫率为 38.2 % (P<0 .0 1) ,每克肝卵数 (L EPG)减少率为 75 .1% (P<0 .0 1) ,每雌肝卵数 (L EPF)减少率为 72 .9% (P<0 .0 1) ;与单独注射 r Sj GST- Sj32组相比 ,r Sj GST- Sj32 /IL- 12组减虫率为 2 6 .8% (P<0 .0 5 ) ,L EPG减少率为 72 .5 % (P<0 .0 1) ,L EPF减少率为6 6 .2 % (P<0 .0 5 )。表明 IL- 12作为佐剂 ,可同时增强 r Sj GST- Sj32诱导小鼠产生的抗感染和抗生殖免疫保护力。
- 蔡春易新元周金春张顺科舒新华曾宪芳Larry McReynolds
- 关键词：日本血吸虫重组蛋白质IL-12免疫
- 日本血吸虫雌虫抗原模拟表位的筛选及免疫保护性被引量：8
- 2004年
- 目的 筛选日本血吸虫雌虫抗原的模拟表位 ,并探讨其抗日本血吸虫的免疫保护效果。 方法 用日本血吸虫雌虫免疫兔血清IgG作配体对噬菌体随机 12肽库进行 3轮亲和筛选 ,随机挑取 18个噬菌体克隆用Dot ELISA检测其特异性 ,并对其中的 4个阳性克隆进行测序。分别在 0、2、4周用混合噬菌体克隆免疫小鼠 3次 ,第 6周每鼠经腹部感染 40条日本血吸虫尾蚴 ,42d后剖杀冲虫 ,计数虫数和每克肝卵数。 结果 经 3轮筛选 ,特异性噬菌体富集了 2 0 0多倍 ,随机挑取的 18个克隆经Dot ELISA鉴定有 17个能与雌虫抗原免疫兔血清呈阳性反应。DNA自动测序的 4个序列与GenBank的已知序列均无同源性。与对照组相比 ,混合噬菌体克隆免疫小鼠的减虫率为 2 6.5 7% ,减卵率为 65 .3 4%。 结论 采用噬菌体随机肽库技术可获得模拟日本血吸虫雌虫特异性抗原表位的短肽分子 ,这些短肽分子能诱导一定程度的保护性免疫。
- 王林纤蔡春易新元曾宪芳唐连飞罗永慧
- 关键词：噬菌体随机肽库免疫筛选
- 日本血吸虫成虫体外传代培养细胞的生物学鉴定被引量：13
- 2006年
- 本研究结果显示:血吸虫成虫细胞在体外培养中呈半悬浮聚集生长状态,4代内的培养细胞及冻存复苏细胞存活率达90%,并在各代培养中均可见细胞分裂相;传5代细胞的染色体核型为8对16条。超微结构既观察到形态正常细胞,也可见形态异常细胞。表明1640-40特定培养基对血吸虫成虫中的部分细胞体外传代培养获得成功。
- 刘伟曾铁兵曾庆仁蔡春张祖萍龚燕飞蔡力汀张顺科徐锡萍
- 关键词：日本血吸虫细胞传代培养染色体核型
- 日本血吸虫Sj-Ts1基因的亚克隆表达与免疫保护效果测定被引量：1
- 2004年
- 在大肠杆菌中高效表达日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)Sj -Ts1融合蛋白并测定其免疫保护效果。将Sj-Ts1基因亚克隆至 pGEX - 5X - 3原核载体 ,转化入大肠杆菌ER2 5 6 6 ,并用IPTG对该重组菌进行诱导表达中。将此表达产物进行WesternBlot分析后免疫小鼠 ,免疫剂量为 10 0 μg/次 /鼠。并设蛋白佐剂对照和PBS对照。免疫三次后进行攻击感染 ,计数虫负荷及肝卵负荷。在IPTG诱导下 ,亚克隆至 pGEX - 5X - 3的Sj-Ts1基因在大肠杆菌内高效表达融合蛋白SjGST -Ts1,用此融合蛋白免疫小鼠 ,能诱导产生 2 4 16 %的减虫率和 4 8 74 %的减卵率。Sj-Ts1基因亚克隆至 pGEX -5X - 3载体后可在大肠杆菌中高效表达 ,表达产物可诱导小鼠产生一定程度的抗Sj保护性免疫力。
- 王林纤陈欲晓周东明蔡春陈利玉唐连飞罗永慧张顺科曾宪芳易新元
- 关键词：日本血吸虫亚克隆免疫保护效果
- 日本血吸虫Rho GTPase DNA疫苗及亚单位疫苗的构建和分析被引量：2
- 2003年
- 目的 构建日本血吸虫大陆株Sj -RhoGTPase -like真核及原核表达重组质粒 ,并进行鉴定分析。 方法 用PCR法将Sj -RhoGTPase -like基因从已剪切阳性克隆中扩增出来 ,亚克隆至pcDNA3.1和pGEX -5X -3中 ,分别经PCR、双酶切、测序、SDS -PAGE和Westernblot等方法鉴定。 结果 PCR和测序均证明Sj -RhoGTPase -like基因疫苗构建成功 ,重组蛋白经SDS -PAGE电泳可观察到与预期分子量相应的条带 ,转印后可被水牛感染血清识别。 结论 成功构建了Sj -RhoGTPase -like基因的两种重组载体 。
- 张冉易新元曾宪芳黄跃龙蔡春张顺科Larry Mc Reynolds
- 关键词：日本血吸虫亚单位疫苗克隆
- 模拟多肽表位诱导抗日本血吸虫免疫保护性的研究
- 血吸虫病是一种严重危害人类健康的疾病。血吸虫病疫苗的研制成为当今血防工作的重点,但迄今仍未研制出有实用价值的兽用或人用血吸虫病疫苗。噬菌体随机肽库技术是近年来发展起来的一项新技术,是研究蛋白质分子之间的相互作用,新型疫苗...
- 曾宪芳易新元蔡春张冉陈欲晓曾宪忠田明礼
- 关键词：日本血吸虫噬菌体随机肽库免疫保护性
- 文献传递
- 日本血吸虫rGST-Sj32蛋白免疫小鼠感染前后细胞因子水平的变化被引量：6
- 2003年
- 目的 :为进一步探讨rGST Sj32保护性免疫机制。 方法 :用rGST Sj32加弗氏完全佐剂 (FCA)皮下免疫BALB/c小鼠。于免疫前 ,攻击感染前 (第 3次免疫后 2wk)以及攻击感染后10d、30d及 4 5d ,各剖杀免疫组与对照组小鼠 5只 ,取脾细胞培养 ,对体外培养的脾细胞诱生的细胞因子进行分析。结果 :用rSj32刺激体外培养的小鼠脾细胞时 ,第 3次免疫后2wk(即攻击感染前 )剖杀小鼠的脾细胞分泌IL 4、IL 5和IFN γ的水平与佐剂对照组相比较 ,均有不同程度的升高 ,分别为 ( 10 .2 1± 3.6 5 )ng/L (P >0 .0 5 )、( 19.89± 9.5 7)ng/L (P >0 .0 5 )、( 5 .0 9± 2 .5 1) μg/L (P <0 .0 1)。攻击感染后10d、30d及 4 5d ,对照组与免疫组IFN γ的水平未见升高 ;对照组IL 4和IL 5的水平随着感染时间的延长明显升高 ,免疫组升高不如对照组明显。结论 :rGST Sj32疫苗免疫BALB/c小鼠后 ,可诱导以Th1类细胞因子为主的免疫应答 ;
- 蔡春易新元王庆林周金春曾宪芳Larry McReynolds
- 关键词：日本血吸虫重组蛋白免疫细胞因子
