石小玉 作品数:90 被引量:206 H指数:8 供职机构: 南昌大学基础医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江西省自然科学基金 江西省教育厅科学技术研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
白细胞介素13诱导Dami细胞STAT6磷酸化及上调GPⅡb表达 被引量:1 2007年 目的研究重组人白细胞介素13(rhIL-13)诱导巨核细胞白血病细胞株Dami细胞STAT6(signal transducers and activators of transcription 6)磷酸化及对Dami细胞GPⅡb表达的影响。方法RT-PCR检测Dami细胞IL-13Rα1 mRNA、IL-4RαmRNA和GPⅡb mRNA;Western blot检测Dami细胞磷酸化STAT6蛋白表达;流式细胞仪检测Dami细胞GPⅡb蛋白表达。结果Dami细胞表达IL-13 Rα1 mRNA;Dami细胞表达IL-4RαmRNA;IL-13作用Dami细胞2 h,STAT6磷酸化;IL-13组Dami细胞GPⅡb表达高于空白对照组(P<0.05)。结论IL-13诱导Dami细胞STAT6磷酸化并上调Dami细胞GPⅡb表达。 石小玉 蔡伟 李文林 周莹 王志刚关键词:IL-13 STAT6 白细胞介素-13对巨核细胞系-HEL细胞原癌基因c-mpl表达的影响 被引量:6 2001年 目的 :研究重组人白细胞介素 - 13 (rhIL - 13 )刺激巨核细胞系 -HEL细胞的增殖是否与原癌基因c -mpl表达有关。方法 :用MTT比色法和RT -PCR法 ,分别观察了rhIL - 13对HEL细胞增殖的影响和对c -mplmRNA表达的影响。结果 :rhIL - 13促进了HEL细胞的增殖 ,上调了HEL细胞c-mplmRNA的表达。结论 :rhIL - 13促进巨核细胞系 -HEL细胞增殖 ,其部分机制可能是通过上调c -mpl的表达来实现。 许铭炎 石小玉 李文林关键词:白细胞介素-13 巨核细胞 基因表达 细胞增殖 一氧化氮合酶在自发性高血压大鼠视上核及室旁核的分布 被引量:9 1999年 目的:探讨自发性高血压大鼠视上核及室旁核内一氧化氮合酶阳性神经元的改变。方法:用NADPH-di-aphorase组织化学方法,观察和比较了一氧化氮合酶在自发性高血压大鼠和正常对照大鼠视上核和室旁核的分布。光镜下观察下丘脑视上校及室旁核的一氧化氮合酶阳性细胞形态、分布并进行计数。用图像分析仪测其灰度值。结果:视上核内一氧化氮合酶阳性细胞在高血压组明显少于对照组(P<0.01)。而室旁核内阳性细胞数则无明显差异。视上核及室旁核内的一氧化氮合酶阳性细胞灰度值在高血压组均明显高于对照组。提示这两上核内一氧化氮合酶含量的改变可能与高血压的形成、发展有关。 刘曾旭 熊树明 吕诚 李耀斌 石小玉 龙飞关键词:视上核 室旁核 高血压 一氧化氮合酶 重组小鼠干细胞逆转录病毒载体高效基因转染CD41^+、UT7、U937和MDA-MB-435细胞 被引量:5 2004年 目的 :研究重组小鼠干细胞逆转录病毒载体介导基因转染 ,探索一条高效基因转染的途径 ,为重组小鼠干细胞逆转录病毒载体在基因转染中的应用提供理论依据和奠定实验基础。方法 :①逆转录病毒载体的构建 :EC1- 4 (repeats 1- 4ofcadherin - 5extracellulardomains)基因克隆产物和mutant(Ser2 2 2A)MEK 1基因克隆产物 ,Bg1Ⅱ和EcoRⅠ限制性内切核酸酶切割后 ,克隆进入逆转录病毒表达载体pMSCV。②CD4 1+ 细胞的获取和细胞培养 :从脐带血分离的CD34+ 细胞通过TPO诱导表达CD4 1,FACS分离CD4 1+ 细胞。高糖DMEM培养液培养NIH 3T3和MDA -MB - 4 35细胞 ,U937细胞培养在RPMI- 16 4 0培养液 ,UT7细胞是细胞因子依赖性细胞株 ,Iscove’smodifiedDulbeco’s培养液中加入GM -CSF。③测定病毒滴度 :逆转录病毒载体转入包装细胞 2 93,36h后收集病毒上清液 ,感染NIH3T3细胞 ,流式细胞仪测定病毒滴度。④Westernblot:基因转染CD4 1+ 、UT7、U937和MDA -MB - 4 35细胞 ,Westernblot检测基因产物的表达。结果 :2 93细胞产生高滴度MEK1pMSCV病毒 :3 1× 10 7,高滴度EC1- 4pMSCV病毒 :1 0×10 8。用稀释 8倍的病毒转染基因 ,重组逆转录病毒MEK1pMSCV转染白血病细胞株UT7和U973,GFP阳性细胞 (转染阳性细胞 )分别是 6 0 73%、 石小玉 李文林 梁朝 张际青 赵林 李红关键词:基因转染 U937细胞 Caveolin-1 siRNA对与乳腺癌细胞共培养的成纤维细胞自噬体表达影响的研究 被引量:3 2015年 为了探索乳腺癌相关的人成纤维细胞中窖蛋白-1(Caveolin-1,Cav-1)与自噬体的相关性及其对乳腺癌细胞的作用,该研究采用si RNA技术干扰成纤维细胞株ESF表达Cav-1,q RTPCR和Western blot确定si RNA干扰Cav-1表达的效果;Transwell insert方法共培养乳腺癌细胞株BT474和ESF细胞,单丹磺酰戊二胺(monodansylcadaverin,MDC)染色、激光共聚焦显微镜观察Cav-1 si RNA对自噬体表达的影响;q RT-PCR和Western blot检测Cav-1 si RNA对微管相关蛋白1轻链3II(microtubule-associated protein 1 light chain 3 II,LC3II)表达的影响;CCK-8方法检测BT474细胞的增殖和活力。结果显示,靶向Cav-1的si RNA下调了ESF细胞中Cav-1的表达;Cav-1 si RNA促进ESF细胞自噬体和LC3II的表达,转染了Cav-1 si RNA的ESF细胞与BT474细胞共培养对自噬体和LC3II的作用更为显著;BT474细胞在ESFsi Cav-1(ESF cells transfected with Cav-1 si RNA)细胞共培养条件下增殖显著加快。研究表明,Cav-1 si RNA促进了与乳腺癌细胞共培养的成纤维细胞自噬体和LC3II的表达,同时加快了与成纤维细胞共培养的乳腺癌细胞的增殖。 石小玉 肖亮 熊丽霞 孟闯 齐观云 李文林关键词:CAVEOLIN-1 成纤维细胞 乳腺癌 自噬体 SIRNA HIF-1α与乳腺癌 被引量:4 2019年 肿瘤的快速生长导致肿瘤内部缺血缺氧,而缺氧诱导因子-1(HIF-1)作为细胞对缺氧环境适应的重要调节因子,在肿瘤的代谢、生存、血管生成等方面有着重要影响。文章通过探讨HIF-1α在肿瘤代谢中的作用,分析HIF-1α在乳腺癌代谢中可能的作用机制,为乳腺癌的治疗及预后提供治疗策略。 刘赛 石小玉关键词:HIF-1Α 乳腺癌 缺氧 癌相关成纤维细胞 重组人血小板生成素对巨核细胞系-Dami细胞增殖的影响 被引量:1 1999年 为了探讨重组人血小板生成素(recom binanthum an throm bopoietin,简称rhTPO)的生物学活性,采用了血浆凝块培养法,5-溴-2′-脱氧尿核苷(5-BrdU)掺入Dam i细胞DNA-酶联免疫吸附法,研究了rhTPO对巨核细胞系-Dam i细胞增殖的作用。结果发现, 在加有rhTPO的培养基中, Dam i细胞迅速增殖, 集落数量和吸光度值高于对照组。实验组rhTPO浓度为25, 50, 100, 200ng/m l, Dam i细胞集落增殖率分别为21.05% ,57.89% ,105.26% ,121.05% ,吸光度增加率分别为19.35% ,61.29% ,103.23% ,119.35% ,rhTPO促进Dam i细胞增殖的作用在一定范围内存在浓度依赖性。研究结果表明, rhTPO对Dam i细胞具有促进增殖的作用。 李文林 石小玉 关华凤 周莹 章克萍 龙飞关键词:血小板生成素 细胞增殖 ePNP自杀基因载体的构建及其表达 2009年 [目的]构建稳定表达ePNP(E.coliPNP)的细胞模型,为肿瘤的基因治疗提供实验基础。[方法]提取大肠杆菌E.coliK12总DNA,PCR方法克隆大肠杆菌ePNP基因,构建逆转录病毒载体质粒pMSCV-ANGPTL4,鉴定测序。脂质体法将三种逆转录病毒载体pMSCV-ANGPTL4、pVSV、pGAG-POL共转染293-EBNA包装细胞,获得高滴度病毒并感染MDA-MB435细胞。荧光显微镜与RT-PCR检测MDA-MB435细胞ePNP基因的表达。[结果]所克隆的ePNP基因与文献报道一致;成功构建了pMSCV/ePNP重组逆转录病毒载体;ePNP基因在MDA-MB435细胞中获得稳定表达。[结论]pMSCV/ePNP自杀基因载体的成功构建及其表达为ePNP应用于肿瘤基因治疗奠定了基础。 李克强 李文林 饶泽昌 赵林 刘东海 唐洪林 石小玉关键词:嘌呤核苷磷酸化酶 自杀基因 重组逆转录病毒载体 大肠杆菌 干扰素γ抑制IL-13对成纤维细胞的纤维化作用 被引量:4 2013年 目的:研究干扰素γ(IFN-γ)抑制白细胞介素13(IL-13)对成纤维细胞纤维化作用的影响。方法:将成纤维细胞分为实验组和空白对照组,实验组加入IFN-γ(4×105U/L)和IL-13(100μg/L),共同作用24、48和72 h后,分别用羟脯氨酸法、RT-PCR和Western blotting检测成纤维细胞分泌胶原蛋白、I型胶原α1(Col 1A1)mR-NA表达和I型胶原蛋白的表达水平。另外对比空白对照组、IFN-γ组、IL-13组和IFN-γ+IL-13组72 h后Col1A1mRNA表达和I型胶原蛋白的表达水平。结果:MTT结果表明IFN-γ浓度增加到4×105U/L后可显著抑制成纤维细胞的增殖(P<0.01)。羟脯氨酸法检测显示48 h和72 h实验组成纤维细胞分泌的胶原蛋白含量显著低于空白对照组(P<0.05);RT-PCR分析结果揭示48 h和72 h实验组的Col1A1 mRNA表达水平显著低于空白对照组(P<0.05);Western blotting检测也进一步证实了48 h和72 h实验组成纤维细胞分泌I型胶原蛋白的水平显著低于空白对照组。另外各因素组对比结果显示,72 h后IFN-γ组Col1A1 mRNA和蛋白的表达水平显著低于空白对照组(P<0.05),IL-13组显著高于空白对照组(P<0.05),而IFN-γ+IL-13组显著低于显著低于其它组(P<0.01)。结论:IFN-γ可抑制IL-13对成纤维细胞的纤维化作用。 熊丽霞 李文林 蔡震宇 周莹 熊俊平 赵林 何晓燕 石小玉关键词:干扰素Γ 白细胞介素13 成纤维细胞 胶原 白细胞介素13通过STAT6途径促进瘢痕成纤维细胞株胶原合成 被引量:2 2010年 增生性瘢痕和瘢痕疙瘩是一种皮肤纤维化过程,是创伤修复的必然产物。白细胞介素13(IL-13)是与纤维化等多种疾病发生机制密切相关的细胞因子。本文观察重组白细胞介素13(rIL-13)对瘢痕成纤维细胞株(CRL-1762)的胶原合成作用,探讨其作用机制。CRL-1762细胞分为实验组和对照组,实验组加入rIL-13(100μg/L),用细胞计数和HE染色观察细胞增殖和细胞形态;检测细胞培养上清液中羟脯氨酸(Hyp)含量;RT-PCR检测细胞IL-13受体的表达;用Western blot检测STAT6蛋白磷酸化情况。结果显示CRL-1762细胞表达IL-13受体α1;实验组细胞数量显著增加(P<0.01),上清液中Hyp含量显著高于对照组(P<0.01);IL-13作用CRL-1762细胞2 h后磷酸化STAT6蛋白表达最强,4h后衰减。由此可见,CRL-1762细胞表达IL-13受体α1,rIL-13通过STAT6途径促进CRL-1762细胞胶原合成。 熊丽霞 李文林 蔡震宇 蔡伟 邹芳芳 陈厚文 石小玉关键词:白细胞介素13 瘢痕疙瘩 成纤维细胞 胶原