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ST_1肠毒素基因的合成、克隆及其融合蛋白的高效表达被引量：1: 1998年; 用ＤＮＡ合成仪合成了编码ＳＴ１肠毒素第５８到７２位氨基酸残基的ＤＮＡ片段，并将其与表达融合蛋白的载体ＰＧＥＭＥＸ－１重组，转化受体菌ＪＭ１０９（ＤＥ－３）。筛选出的重组克隆经过１ＰＴＧ４小时诱导，ＳＴ１融合蛋白的产量超过超过细菌蛋白总量的４０％，最高达５９．９％。; 刘兴汉王莉林张绍杰初晓白; 关键词：基因重组融合蛋白

新城疫病毒中国标准强毒株F_（48）E_9株F基因的酶切分析: 1996年; 含新城疫病毒Ｆ４８Ｅ９株Ｆ基因的重组质粒ｐＢＦＦ经单酶切，双酶切分析，结果表明，中国的标准强毒株Ｆ４８Ｅ５株的Ｆ基因与国外的一些强毒株相比有较大的差异，多出一个ＢａｍＨＩ酶切位点，一个ＳｅａＩ酶切位点，三个ｐｓｔＩ酶切位点，少了一个ｐｓｔＩ酶切位点。; 王莉林张莹曹殿军霍龙飞卢景良; 关键词：新城疫病毒 F基因酶切分析病毒

抗新城疫病毒糖蛋白单克隆抗体的研制及其特异性分析被引量：11: 1997年; 应用纯化的新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｆ４８Ｅ９株免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，经间接ＥＬＩＳＡ法检测筛选到４２株分泌抗ＮＤＶ单克隆抗体的杂交瘤细胞株。并对各株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类、血凝抑制效价（ＨＩ）、溶血抑制效价（ＨＬＩ）、ＥＬＩＳＡ效价及中和效价加进行了测定，结合单克隆抗体的Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ反应结果鉴定出抗ＮＤＶＨＮ蛋白１１株。; 曹殿军刘明王莉林张莹卢景良; 关键词：新城疫病毒糖蛋白单克隆抗体

新城疫基因工程疫苗研究进展被引量：8: 1995年; 新城疫基因工程疫苗研究进展霍龙飞，王莉林，卢景良（哈尔滨兽医研究所备医生物技术国家重点实验室，哈尔滨）鸡新城疫（ＮＤ）是由新城疫病毒（Ｎｅｗ－ｃａｓｔｌｅＤｉｓｅａｓｅＶｉｒｕｓ，ＮＤＶ）所致的一种死亡率很高急性败血性高度接触性禽类传染病，也是养禽业...; 霍龙飞王莉林卢景良; 关键词：鸡病疫苗基因工程疫苗鸡新城疫

新城疫病毒F_(48)E_(9)株HN基因的克隆与酶切分析被引量：17: 1997年; 为深入探讨新城疫病毒（ＮＤＶ）的结构与功能的关系，扩增和克隆了Ｆ４８Ｅ９株ＮＤＶ的ＨＮ基因。首先以提取的Ｆ４８Ｅ９株ＮＤＶ基因组ＲＮＡ为模板逆转录合成第一链ｃＤＮＡ，然后用ＨＮ基因特异性引物作ＰＣＲ扩增ＨＮｃＤＮＡ，结果得到１条分子量约１．８ｋｂ的ＤＮＡ带，与ＮＤＶＨＮ基因的大小一致。Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交进一步证实其为ＨＮ特异性ｃＤＮＡ。随后采用平端连接法将其克隆到ｐＳＶ·Ｓｐｏｒｔｌ质粒中，应用限制性内切酶ＥｃｏＲＩ、ＳｃａⅠ、ＭｌｕⅠ、ＡｐａⅠ、ＰｓｔⅠ、和ＳｍａⅠ对ＮＤＶＦ４８Ｅ９株ＨＮｃＤＮＡ重组质粒作单酶或双酶切，结果表明，ＮＤＶＦ４８Ｅ９株ＨＮ基因较ＨｉｔｃｈｎｅｒＢ１株的ＨＮ基因缺少１个ＭｌｕⅠ位点（７０５ｂｐ左右），多１个ＰｓｔⅠ位点（８０２ｂｐ左右）。; 曹殿军刘春丽王莉林张莹卢景良; 关键词：新城疫病毒 HN基因

ST_1肠毒素融合蛋白的纯化及部分特性分析被引量：3: 1998年; 用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１５０凝胶和ＤＥ３２离子交换层析，从重组菌ＰＧＥＭＳＴ２株内分离、纯化ＳＴ１肠毒素融合蛋白，回收的ＳＴ１肠毒素融合蛋白占细菌总蛋白量的３１５％。ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳条件呈一条蛋白带。ＳＴ１肠毒素融合蛋白不溶于甲醇、乳鼠试验阴性。对小鼠皮下注射使用安全，对Ｋ９９强毒菌攻击贩保护率达６０％。; 刘兴汉王莉林张绍杰初晓白; 关键词：肠毒素融合蛋白纯化免疫原性

新城疫病毒F48E9株病毒结构蛋白的分析被引量：7: 1997年; 采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、激光扫描技术、ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ和糖蛋白染色方法对新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｆ４８Ｅ９株的结构蛋白进行了分析，结果表明，它具有ＮＤＶ的典型结构特征。; 曹殿军刘继红王莉林张莹卢景良; 关键词：新城疫 F48E9 病毒结构蛋白

新城疫病毒糖蛋白致病作用的研究被引量：5: 1998年; 本实验以分子生物学和现代免疫学方法，对新城疫病毒（ＮＤＶ）中国毒株Ｆ４８Ｅ９和ＬａＳｏｔａ等毒株的糖蛋白的致病作用进行了探讨。结果表明，ＮＤＶＦ和ＨＮ蛋白为糖蛋白，强弱毒株之间Ｆ蛋白裂解位点的氨基酸序列有明显的不同，并决定了毒株的毒力。但ＮＤＶ的致病作用尚需ＨＮ、Ｆ蛋白的协同作用，单一的Ｆ或ＨＮ蛋白不能构成ＮＤＶ的致病作用。; 卢景良曹殿军王莉林张莹; 关键词：新城疫发病机理单克隆抗体

K_(88)、K_(99)、F_(41)三价基因工程菌的构建被引量：11: 1991年; 利用基因工程技术构建的带有K_(99)和F_(41)两种纤毛抗原基因的重组质粒与K_(88)抗原工程菌C_(84)的质粒转化同一受体菌,得到双质粒。同时表达K_(88)、K_(99)、F_(41)三种纤毛抗原的菌株。用小白鼠试验初步证实。该菌株生物学性质稳定,对动物安全,对K_(88)、K_(99)和F_(41)强毒菌的攻击具有较强的保护作用。; 刘兴汉王莉林初晓白张绍杰; 关键词：基因工程腹泻

鸡新城疫病毒HN基因在重组鸡痘病毒中的表达及其保护性的研究被引量：21: 1998年; 利用重组表达质粒ＨＮ－ＰＥＦＬ－２９与鸡痘病毒ＦＰ９共转染鸡胚成纤维细胞，经蚀斑筛选，结合Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，获得含有外源ＨＮ基因的纯化重组病毒。将筛选到的重组病毒经４次传代，细胞可见明显病变。免疫荧光检测结合Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹表明该重组子表达产物主要位于细胞膜上，以糖基化（７４ｋＤ）和非糖基化（６８ｋＤ）２种形式存在，表达产物具有类似于天然ＮＤＶＨＮ蛋白的红细胞吸附活性及神经氨酸酶活性，且这２种活性均可被ＮＤＶＨＮ特异性单抗所抑制。对该表达产物的免疫活性研究表明：用重组病毒免疫４周龄ＳＰＦ鸡的ＥＬＩＳＡ抗体水平和血凝抑制效价均高于ＦＰＶ接种组，但低于ＬａＳｏｔａ弱毒活疫苗接种组。以ＮＤＶ强毒株Ｆ４８Ｅ９攻毒发现：接种重组病毒１０６ｐｆｕ／只时，保护力可达８０％，而１０４ｐｆｕ／只时，保护率仅为６０％，这表明该重组病毒对雏鸡具有一定的保护作用，且该保护作用与接种剂量有一定的相关性。; 曹殿军刘惠莉王莉林闵平张莹卢景良; 关键词：新城疫病毒 HN基因重组禽痘病毒

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王莉林