王晓坤 作品数:11 被引量:16 H指数:3 供职机构: 哈尔滨医科大学附属第二医院 更多>> 发文基金: 博士科研启动基金 黑龙江省卫生厅科研项目 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
线上多模式教学在医学临床实习中的应用 被引量:6 2020年 全球线上理论教学如火如荼地开展,医学高等教育是不可或缺的一部分,但医学的传统临床实习模式已不能满足医学生学习要求及无法实现,而临床实习是医学生成长为合格的执业医师的必经阶段,新的临床实习模式必须尽早有力开始实施。本文以神经病学临床为例,主旨在于探索线上多模式教学在医学高等教育临床实习带教的效果,制定线上多模式教学临床实习教学大纲,建立实用且可复制的多模式临床实习纲领。不断反馈改进,凝练创新性教学模式的核心要点,加以推广,为国内医学教育改革提供参考。 田佳楠 王晓坤 吴家荣 李慧 马煦 杨春晓关键词:医学高等教育 多模式教学 西洛他唑对大鼠皮层细胞糖氧剥离损伤的保护作用 被引量:1 2010年 目的探讨磷酸二酯酶抑制剂西洛他唑对糖氧剥离后大鼠皮层细胞培养的影响及作用机制。方法原代混合培养大鼠皮层细胞,建立糖氧剥离的细胞损伤模型模拟细胞"缺血损伤",然后进行干预。测定细胞培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、神经元型一氧化氮合酶(nNOS)及诱导型一氧化氮合酶(i NOS)的含量;测定一氧化氮(NO)的分泌水平;测定细胞内环磷酸腺苷(cAMP)水平及四唑盐(MTT)比色试验测定细胞活力。结果西洛他唑组及依达拉奉组与糖氧剥离模型组比较,LDH、MDA漏出量显著减少(P均<0.05),GSH-Px释放量明显升高(P均<0.05),nNOS、i NOS的水平及NO的分泌量显著下降(P均<0.05),细胞内cAMP水平明显升高(P均<0.05);细胞存活率显著提高(P均<0.05);西洛他唑与依达拉奉组比较,LDH、MDA漏出量及GSH-Px的释放量无差别,nNOS、i NOS和NO的水平明显降低(P均<0.05),细胞内cAMP水平显著升高(P<0.05);细胞存活率明显提高(P<0.05)。结论西洛他唑对培养大鼠皮层细胞在糖氧剥离损伤中具有保护作用,其作用机制可能通过抗氧化、降低nNOS及i NOS的水平从而降低NO的分泌、升高细胞内cAMP水平来实现的。 吴云 王晓坤 梁庆成 金永华 杨春晓关键词:皮层细胞 西洛他唑 西洛他唑对缺血性脑卒中治疗作用及其机制的研究进展 被引量:1 2010年 王晓坤 吴云 梁庆成关键词:缺血性脑卒中 西洛他唑 抗血小板药 动脉粥样硬化 抗血小板治疗 继发病变 西洛他唑对大鼠脑微血管内皮细胞缺血再灌注损伤的保护作用 被引量:3 2011年 目的研究西洛他唑对大鼠脑微血管内皮细胞缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法以原代方法培养大鼠脑微血管内皮细胞并传代,将第3代传代细胞随机分为正常对照组、西洛他唑组、溶剂对照组和缺血再灌注模型组(再灌模型组)4组,对后3组大鼠建立脑微血管内皮细胞糖氧剥夺后复糖氧模型,模拟"缺血再灌注"过程,并对西洛他唑组和溶剂对照组在造模同时分别以终浓度1×10-5mmol/L西洛他唑〔二甲基亚砜(DMSO)为溶剂〕和0.05%(体积分数)DMSO进行干预。糖氧剥夺3 h复糖氧24 h后,测定各组细胞上清液中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)水平及细胞内环磷腺苷酸(cAMP)水平,并以四唑盐(MTT)比色实验测定细胞活力。结果西洛他唑组与再灌模型组比较,eNOS水平明显提高,iNOS水平明显降低,cAMP水平及细胞存活率显著提高(均P<0.05)。结论西洛他唑对大鼠脑微血管内皮细胞的缺血再灌注损伤有保护作用,其作用机制可能与促进eNOS水平升高和iNOS水平降低有关。 吴云 梁庆成 王晓坤 丛林关键词:西洛他唑 脑微血管内皮细胞 缺血再灌注损伤 多巴胺对吗啡成瘾大鼠海马区痛觉调制的研究进展 2015年 当今社会日益增长的吗啡等阿片类药物的非法滥用已经严重威胁到人类的健康。然而,迄今为止尚没有找到能够较为有效的防治阿片成瘾的方法。目前研究已知,阿片成瘾的形成所涉及的脑区及核团包括中脑腹侧被盖区(VTA)、伏隔核(NAc)、海马等,其成瘾涉及的神经递质系统包括多巴胺、5-羟色胺等。本文将就多巴胺及海马在痛觉调制及药物成瘾过程中的作用进行综述,为吗啡的成瘾与戒断的进一研究及治疗提供线索。 刘新宇 苗宇 杨春晓 马煦 王晓坤关键词:多巴胺 海马 吗啡 成瘾 痛觉调制 西洛他唑对离体培养大鼠皮层细胞缺血再灌注损伤的保护作用 2011年 目的:研究磷酸二酯酶抑制剂西洛他唑对离体培养大鼠皮层细胞缺血再灌注损伤的影响及作用机制。方法:取新生Wistar大鼠皮层细胞进行原代培养,分为5组:正常对照组、西洛他唑组、依达拉奉组、溶剂对照组及缺血再灌注模型组。通过建立糖氧剥离后复糖氧的细胞损伤模型模拟细胞"缺血再灌注损伤",然后进行干预。细胞经4 h糖氧剥离24 h复糖氧培养后,测定培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及一氧化氮(NO)的含量;测定细胞内环磷酸腺苷(cAMP)水平,并通过四唑盐(MTT)比色实验测定细胞活力。结果:西洛他唑和依达拉奉均可减少"缺血再灌注"损伤细胞的LDH和MDA漏出量,提高GSH-Px释放量,降低nNOS、iNOS和NO的水平,升高细胞内cAMP水平,使细胞存活率显著提高;西洛他唑与依达拉奉组相比,LDH、MDA漏出量及GSH-Px的释放量无差别,nNOS、iNOS和NO的水平明显降低,细胞内cAMP水平显著升高,细胞存活率明显提高。结论:西洛他唑对大鼠皮层细胞缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用机制可能通过抗氧化、降低nNOS及iNOS的水平,从而降低NO的分泌、升高细胞内cAMP水平来实现的。 王晓坤 梁庆成 吴云 金永华 杨春晓关键词:皮层细胞 缺血再灌注损伤 西洛他唑 西洛他唑对糖氧剥离大鼠脑微血管内皮细胞的保护作用 2010年 目的探讨磷酸二酯酶(PDE)3抑制剂西洛他唑对大鼠脑微血管内皮细胞糖氧剥离损伤的影响及作用机制。方法原代培养大鼠皮层微血管内皮细胞,建立糖氧剥离细胞模型模拟"缺血"过程,分5组:正常对照组、西洛他唑组、依达拉奉组、溶剂对照组、模型组。糖氧剥离6h后,测定细胞上清中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)水平、细胞内环磷腺苷酸(cAMP)浓度,及采用四唑盐(MTT)比色实验测定细胞活力。结果西洛他唑及依达拉奉均可明显提高缺血细胞模型上清中eNOS水平,同时降低iNOS水平,提高细胞内cAMP水平及细胞存活率(均P<0.05),且西洛他唑作用更为显著。结论西洛他唑对培养大鼠皮层微血管内皮细胞在缺血损伤中具有保护作用,其作用机制可能是通过选择性抑制PDE3从而增加cAMP水平,间接增加eNOS水平、降低iNOS水平来实现的。 吴云 王晓坤 梁庆成 张苏明 丛林关键词:西洛他唑 脑微血管内皮细胞 中枢神经系统表面铁沉积症1例报道及文献复习 2023年 中枢神经系统表面铁沉积症(Superficial siderosis of central nervous system,SSCNS)是一种全球罕见的含铁血黄素沉积在软脑膜、脑组织、脑神经和脊髓表面的中枢神经系统变性疾病,但目前对该疾病的认识仍有不足,临床医生极易漏诊或误诊。本研究报道1例以走路不稳起病,病程中逐渐出现双耳听力下降、头晕等症状,结合影像学检查最终确诊为SSCNS的老年女性患者,以进一步提升临床医生对该病的认识。 于丹 吴家荣 宋子微 刁爽 杨春晓 王晓坤关键词:软脑膜 中枢神经系统表面铁沉积症 老年女性患者 含铁血黄素沉积 脑神经 MiR-381下调Hes1表达调控神经干细胞增殖和向神经元的分化 被引量:1 2017年 目的:探讨miRNA-381在神经干细胞(neural stem cell,NSCs)的体外增殖、分化中的作用及相关机制。方法:采用光镜观察法、免疫组化法对原代获取及诱导分化后的NSCs予以鉴定;QPCR及Western blot法检测miRNA-381、nestin、β-tubulin-Ⅲ和Hes1的mRNA及蛋白表达;CCK-8法检测不同时间点NSCs的增殖情况;荧光素酶报告基因法验证miR-381对Hes1野生型及突变型3'非编码结合区的靶向作用。结果:原代培养细胞呈明显的神经球形态,且高表达nestin蛋白,经b FGF诱导后则高表达β-tubulin-Ⅲ;miR-381转染后,NSCs中miR-381、nestin、β-tubulin-Ⅲ的mRNA和蛋白水平均明显升高(p<0.001),免疫荧光法也进一步验证miR-381转染后的NSCs其β-tubulin-Ⅲ的荧光强度显著增强;此外,miR-381转染24 h、48 h及72 h后,NSCs的增殖能力均高于阴性对照组(p24h<0.01,p48h<0.001,p72h<0.001);荧光素酶法结果显示miR-381能显著降低野生型Hes1载体的3'非编码区的荧光素酶活性,而Hes1基因载体的突变型3'UTR的荧光素酶活性不受到miR-381的影响(p<0.001);另外,miR-381过表达能明显降低Hes1蛋白的表达;而二者共转染的NSCs增殖能力在转染后24 h、48 h及72 h,均明显低于单纯miR-381转染组(p<0.01或p<0.001);同时,共转染后β-tubulin Ⅲ的mRNA及蛋白水平均明显低于单纯miR-381转染组(p<0.001)。结论:miR-381通过下调Hes1表达促进NSCs的增殖和向神经元的分化。 史晓东 郑娇琳 焉春华 田佳楠 李慧 马煦 王晓坤 聂雪丹 杨春晓关键词:神经干细胞 神经元 ENHANCER 基于德尔菲法和层次分析法的医学生腰椎穿刺教学评价指标体系构建 被引量:1 2023年 目的构建医学生腰椎穿刺教学评价指标体系, 旨在创建涵盖理论知识、技能实践、职业素养的科学考核评价方法, 用以全面评估医学生腰椎穿刺术教学效果, 从而更有效地提升医学生的临床技能实践能力。方法通过文献回顾、小组讨论等初步拟定医学生腰椎穿刺教学评价指标方案, 邀请临床一线工作和医学相关20名专家, 应用德尔菲专家函询对方案进行修订, 并应用层次分析法量化条目, 确立最终各级指标权重。结果本研究两轮函询问卷的有效回收率均为100%。在未更换专家的情况下进行第二轮函询, 权威系数为0.88。肯德尔和谐系数分别为0.136和0.184。经过两轮专家函询, 最终初步构建了包括3个一级指标(理论知识、临床综合能力、职业素养)、7个二级指标及22个三级指标的医学生腰椎穿刺教学评价指标体系。结论本研究构建的医学生腰椎穿刺教学评价指标体系科学、可信, 能为医学生培养及考核提供量化依据, 具有理论及实践意义。 王佳 李然 马煦 谢一搏 李嘉晨 吴家荣 王晓坤 杨春晓关键词:腰椎穿刺 层次分析法 德尔菲法