- Ox-LDL对PMA诱导的THP-1巨噬细胞自噬的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)对PMA诱导的THP-1巨噬细胞自噬的影响。方法 PMA诱导THP-1细胞24 h,使其分化为巨噬细胞,再分别用0、10、20、40或80 mg/L的Ox-LDL处理24 h,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹技术(Western blotting)分别检测Beclin-1以及LC3的mRNA及蛋白表达;细胞免疫荧光检测LC3在细胞内的含量;MDC染色检测自噬囊泡的形成。结果随着Ox-LDL浓度的增加,THP-1源性巨噬细胞Beclin-1 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05);LC3 mRNA表达无明显改变(P>0.05),但蛋白水平LC3II/LC3I显著降低(P<0.001);免疫荧光结果表明随着Ox-LDL浓度的增加,LC3II含量降低,MDC染色结果显示自噬囊泡随着Ox-LDL浓度的增加而减少。结论 Ox-LDL抑制PMA诱导的THP-1巨噬细胞自噬。
- 白洁孟军刘艳辉李小红危当恒
- 关键词：OX-LDLTHP-1巨噬细胞自噬
- 氧化型低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞TET2表达及自噬的影响被引量：1
- 2012年
- 目的观察氧化型低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞自噬的影响及其调节机制。方法氧化型低密度脂蛋白孵育人脐静脉内皮细胞24 h,RT-PCR检测TET2 mRNA表达,Western blot检测TET2以及自噬标记物Beclin 1、LC3的表达。TET2 siRNA转染人脐静脉内皮细胞,Western blot检测Beclin 1、LC3的表达。结果人脐静脉内皮细胞经不同浓度氧化型低密度脂蛋白孵育24 h后,浓度依赖性地下调TET2 mRNA以及蛋白的表达(P<0.05),并且下调Beclin 1表达以及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值。TET2 siRNA转染人脐静脉内皮细胞后,Beclin 1表达以及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值明显降低。结论氧化型低密度脂蛋白促进人脐静脉内皮细胞自噬,可能与下调TET2表达相关。
- 危当恒贾小英刘艳辉郭凤霞刘慧婷王佐阮长耿
- 关键词：氧化型低密度脂蛋白血管内皮细胞自噬
- Ox-LDL对THP-1巨噬细胞自噬的影响及其作用机制的初步研究
- 目的：氧化低密度脂蛋白(oxdized low density lipoprotein, Ox-LDL)是低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)被活性氧(ROS)或者二价金属离子(Cu，F...
- 刘艳辉
- 关键词：OX-LDLTHP-1源性巨噬细胞自噬
- 异常剪切应力上调组织蛋白酶L在动脉粥样硬化斑块中表达被引量：1
- 2011年
- 目的观察组织蛋白酶L(Cathepsin L)在异常剪切切应力诱导的动脉粥样硬化斑块中的表达,探讨Cathepsin L在动脉粥样硬化病变中的作用。方法采用套环法建立兔颈总动脉局部狭窄的动物模型,喂养4周;数值模拟法模拟局部狭窄远心端和近心端流场特性以及剪切应力分布;酶法测定血浆中总胆固醇、甘油三酯以及HDL水平;HE染色观察病理学改变;油红O染色观察病变处脂质的蓄积;免疫组织化学法检测Cathepsin L的表达。结果 4周后,兔血脂水平没有明显改变。套环形成局部狭窄后,颈总动脉血流流场发生显著的扰动,狭窄远心端有涡流以及二次流形成;狭窄近心端形成局部高剪切应力区域,而在远心端形成振荡的低剪切应力区域(0～0.3 Pa)。HE染色显示颈总动脉狭窄的近心端和远心端均有明显的内膜增生以及动脉粥样硬化斑块形成,近心端比远心端病变更严重。油红O染色显示有大量的脂质沉积;免疫组织化学染色结果表明病变中有大量的Cathepsin L表达,主要分布于斑块中的巨噬细胞和平滑肌细胞,并且近心端Cathepsin L的表达量明显高于远心端量,而对照侧血管仅有微量的Cathepsin L表达。结论切应力特性调节Cathepsin L的表达,Cathepsin L可能在异常剪切应力诱导的动脉粥样硬化斑块的发生发展中起着重要的调节作用。
- 危当恒贾小英刘艳辉桂培根
- 关键词：组织蛋白酶L动脉粥样硬化
- 组织蛋白酶L在动脉粥样硬化病变中的表达以及对巨噬细胞脂质蓄积的影响被引量：7
- 2011年
- 目的观察组织蛋白酶L在动脉粥样硬化病变中的表达以及对巨噬细胞脂质蓄积的影响。方法颈总动脉套环并饲以高脂饮食建立兔颈总动脉粥样硬化模型,免疫组织化学方法检测斑块内组织蛋白酶L的表达。氧化型低密度脂蛋白孵育RAW264.7巨噬细胞24 h,逆转录聚合酶链反应、Western blot以及荧光分光光度法检测组织蛋白酶L表达和活性。组织蛋白酶L抑制剂预处理巨噬细胞,油红O染色以及高效液相色谱法观察细胞内脂质蓄积。结果正常血管中不表达组织蛋白酶L,斑块内组织蛋白酶L高表达。巨噬细胞经不同浓度氧化型低密度脂蛋白孵育24 h后,组织蛋白酶L mRNA的表达量在各组间无明显差异(P>0.05),但蛋白表达量以及活性明显增加(P<0.05)。组织蛋白酶L抑制剂剂量依赖性地抑制巨噬细胞内脂质积蓄。结论组织蛋白酶L在动脉粥样硬化斑块中高表达并参与巨噬细胞脂质代谢。
- 危当恒夏敏贾小英刘艳辉田国平
- 关键词：组织蛋白酶L氧化型低密度脂蛋白动脉粥样硬化巨噬细胞
- 动脉粥样硬化的表观遗传学研究进展被引量：4
- 2013年
- 动脉粥样硬化是环境因素与遗传因素相互作用所致的慢性炎症疾病。表观遗传修饰可能是链接环境因素与遗传因素的桥梁,深入了解表观遗传修饰如DNA甲基化、组蛋白修饰以及微小RNA对动脉粥样硬化形成和发展的影响及其作用机制,将进一步阐明动脉粥样硬化的发病机制。并且由于表观遗传修饰可逆,这可能为动脉粥样硬化的治疗提供新的策略和靶点。
- 刘艳辉危当恒
- 关键词：动脉粥样硬化表观遗传DNA甲基化组蛋白修饰微小RNA
