胡建听
- 作品数：6 被引量：16H指数：3
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- 高温对原代支持细胞增殖能力和occludin紧密连接蛋白的影响(英文)
- 2013年
- 目的:研究高温对原代大鼠睾丸支持细胞增殖作用和对紧密连接蛋白的损伤机制。方法:体外分离培养雄性Wistar大鼠睾丸支持细胞(Sertoli cell,SC),免疫组化FasL鉴定。实验分为对照组(36℃)和实验组(37℃、38℃、39℃)。在相应的温度下培养5d后,CCK-8法检测SC增殖作用,Western印迹法检测OCLN表达水平。结果:体外培养SC的纯度>90%,CCK-8结果显示,细胞增殖活性在36℃时最强,37～39℃时逐渐降低;Western印迹显示,36℃时OCLN表达量最高;高于36℃时,OCLN表达量随着温度的增加而降低(P<0.05)。结论:高温影响SC增殖活性,破坏了支持细胞紧密连接蛋白的正常表达和血睾屏障的完整性,从而影响正常精子的形成。
- 胡建听王沛涛孙在利李小朋王新生
- 关键词：高温支持细胞紧密连接蛋白精子发生
- 双酚A对体外大鼠睾丸支持细胞闭锁蛋白Occludin表达的影响被引量：2
- 2012年
- 目的观察双酚A（BPA）对体外大鼠睾丸支持细胞增殖能力与闭锁蛋白Occludin（OCLN）表达的影响，探讨BPA对精子发生的损伤机制。方法体外分离培养雄性Wistar大鼠睾丸支持细胞，油红O染色鉴定。实验分为BPA染毒组（25laM、50uM和100IIM分别处理细胞24h）、溶剂对照组（无血清DMEM／F12＋DMSO＋细胞悬液）和空白对照组（无血清DMEM／F12）。CCK-8法测支持细胞增殖活性，WesternBlot法检测OCLN表达水平。结果分离培养大鼠睾丸支持细胞纯度〉90％。CCK-8实验结果显示：BPA对支持细胞增殖活性具有抑制作用，BPA浓度〉103uM时，存活率明显降低，细胞存活率〈44％，其差异有统计学意义（P〈0．05）。WesternBlot法检测结果显示，OCLN蛋白表达随着BPA染毒剂量的增加而降低，呈剂量依赖性，不同染毒剂量组与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论BPA可抑制睾丸支持细胞增殖活性和OCLN的表达，干扰支持细胞正常的生精过程。
- 冯友亮郝伟玉胡建听王沛涛姚如永王新生
- 关键词：双酚A睾丸支持细胞精子发生
- 温度对体外大鼠睾丸支持细胞增殖及occludin蛋白表达的影响被引量：5
- 2012年
- 目的:通过观察不同温度对原代大鼠睾丸支持细胞增殖作用与紧密连接蛋白occludin(OCLN)表达的影响,探讨温度因素在男性生殖功能降低或男性不育中的作用机制。方法:体外分离培养雄性Wistar大鼠睾丸支持细胞(Sertoli cell,SC),油红O染色及免疫组化FasL鉴定。实验分为对照组(34℃)和实验组(35℃、36℃、37℃、38℃、39℃)。在相应的温度下培养4 d后,CCK-8法检测SC增殖作用,HE染色观察细胞形态及结构,Western印迹法和免疫荧光法检测OCLN表达水平。结果:体外培养SC的纯度为(96.20±1.95)%,CCK-8结果显示,细胞增殖活性在34～36℃时逐渐增强,36～39℃时逐渐降低,并在镜下观察发现细胞核固缩、裂解明显;免疫荧光及Western印迹显示,36℃时OCLN表达量最高;高于36℃时,OCLN表达量随着温度的增加而降低(P<0.01)。结论:温度升高(>36℃)抑制SC的增殖活性,并降低SC紧密连接蛋白的表达量。因此,高温对SC活性和紧密连接完整性的影响,可能是导致男性生育能力下降或不育的机制之一。
- 胡建听邵翠华王沛涛刘勇郝伟玉冯友亮刘世海王新生
- 关键词：温度支持细胞紧密连接蛋白精子发生
- 不同温度下体外大鼠睾丸支持细胞胶质细胞源性神经生长因子的表达被引量：6
- 2014年
- 目的:通过观察不同温度下体外大鼠睾丸支持细胞(Sertoli cell,SC)胶质细胞源性神经生长因子(GDNF)表达特点,探讨高温致不育的机制。方法:采用组合酶消化法和选择性贴壁法分离雄性Wistar大鼠睾丸SC,将分离的SC分别置于不同温度进行体外培养,观察其贴壁、形态学变化,FasL免疫组化鉴定。实验分为对照组(35℃)、实验组(36℃、37℃、38℃、39℃)。CCK-8法检测SC增殖情况,HE染色观察细胞形态及结构,RTPCR、免疫荧光及Western印迹检测细胞GDNF的表达。结果:本实验条件下,体外分离培养SC纯度=(95.30±2.15)%(n=10),CCK-8实验结果显示,36℃时细胞增殖率最高(P<0.01),>36℃时,随着温度的提高,增殖率逐渐降低,39℃对细胞增殖具有明显抑制作用(P<0.01);免疫荧光结果显示,GDNF表达于SC胞质,36℃时荧光最强,RT-PCR及Western印迹检测结果显示,高于36℃时,GDNF mRNA及蛋白的表达随着温度的增加而降低,36℃、37℃、38℃、39℃4组与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:不同温度下,体外培养SC的增殖能力和GDNF表达明显不同。>36℃时,随着温度的提高,增殖能力受到抑制,GDNF表达水平显著降低。本研究结果证实,高温下大鼠睾丸SC正常功能受到抑制,从而影响生精功能。
- 赵吉存孙在利李小鹏曹廷帅胡建听王洪强刘湘萍王沛涛
- 关键词：温度支持细胞胶质细胞源性神经生长因子
- 低氧对原代支持细胞增殖能力和occludin蛋白表达的影响被引量：5
- 2013年
- 目的:观察低氧对原代大鼠睾丸支持细胞生长活性、occludin蛋白表达的影响。方法:18～22日龄Wistar大鼠,通过两步酶消化法,建立原代支持细胞培养体系,经油红O、免疫荧光法鉴定。传代后随机分为以下氧浓度组进行培养:20%、15%、10%、5%和1%。分别培养至6、12、24、48、72 h,CCK-8测定细胞增殖活性,West-ern印迹测定occludin蛋白表达量,并进行差异性分析。结果:油红O染色见胞质内脂滴染成红色,免疫荧光见FasL蛋白表达阳性,细胞纯度>95%。与20%氧浓度相比,细胞在15%和10%氧浓度下增殖率逐渐降低,5%和1%氧浓度下,细胞增殖率明显下降(P<0.01);从12 h开始,随着氧浓度降低和时间延长,occludin表达量明显下降(P<0.01)。结论:低氧会抑制支持细胞生长,并减少occludin蛋白表达。推测低氧环境损伤支持细胞参与的血睾屏障完整性,影响睾丸的生精过程。
- 郝伟玉邵翠华冯友亮胡建听李强王洪强王沛涛
- 关键词：低氧支持细胞细胞增殖OCCLUDIN
- 温度对体外大鼠睾丸支持细胞增殖活力及occludin蛋白表达的影响
- 目的观察不同温度对原代大鼠睾丸支持细胞增殖活力与紧密连接蛋白Occludin /(OCLN/)表达的影响。探讨不同温度在雄性生殖功能障碍中的作用机制。
方法体外分离青春期雄性Wistar大鼠睾丸支持细胞/(Se...
- 胡建听
- 关键词：温度支持细胞OCCLUDIN血睾屏障精子发生
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