沈中元
- 作品数：96 被引量：239H指数：10
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 检测家蚕微孢子虫的探针及其应用
- 检测家蚕微孢子虫的探针及其应用，核苷酸序列如下所示：6‑FAM‑CTCAGTAACTCTTATTTGATTTGATGTATT/THF/GGATTCTAACTATGT‑C3SPACER。本发明基于RAA技术，提供了快速检测...
- 王润芃沈中元唐旭东张轶岭王强何平魏尔鋆
- 感染BmNPV家蚕中肠组织cDNA文库的构建
- 为了探索家蚕核型多角体病毒（BmNPV）蛋白间的相互作用,采用CLONTECH SMART（switching mechanism at 5′end of RNA transcript）技术,在酵母菌株Y187中构建了感...
- 管蕊沈中元唐旭东徐莉朱峰陶恒平陈大睿
- 关键词：酵母双杂交CDNA文库
- 文献传递
- 基于CRISPR/Cas12a系统的家蚕微孢子虫可视化检测方法及其试剂盒
- 本发明公开基于CRISPR/Cas12a系统的家蚕微孢子虫可视化检测方法及其试剂盒，试剂盒包括能够识别家蚕微孢子虫微孢子虫小亚基rRNA基因的RPA引物、crRNA、AsCas12a蛋白及ssDNA报告分子；同时本发明提...
- 吴萍赵志梦周雪敏吴伊湘沈中元赵卫国
- 家蚕微孢子虫核糖-5-磷酸异构酶A基因的克隆及表达特征分析
- 2019年
- 核糖-5-磷酸异构酶A(ribose 5-phosphate isomerase A,RpiA)是多种生物中普遍存在的一种高度保守的蛋白酶,在磷酸戊糖途径(PPP)中起着核心作用,参与原核生物与真核生物核糖-5-磷酸(R5P)与核酮糖-5-磷酸(Ru5P)之间的可逆异构化反应及植物二氧化碳固定的卡尔文循环。为探索RpiA在家蚕微孢子虫侵染家蚕后能量代谢与物质合成过程中所发挥的作用,通过PCR扩增得到NbRpiA基因的编码区。该开放阅读框全长345 bp,编码114个氨基酸,预测蛋白质的分子质量约为13.145 kD,等电点为7.72,未发现明显已知功能结构域。实时荧光定量PCR检测发现,NbRpiA基因在家蚕微孢子虫感染家蚕后7 d内均有表达:从感染后2 h起,NbRpiA基因的表达水平呈缓慢上升的趋势,第2天达到最高,随后表达水平逐渐降低,从第4天开始表达水平大幅降低,至第7天降至最低。初步推测NbRpiA可能在家蚕微孢子虫孢子发芽及增殖阶段发挥作用。研究结果为了解NbRpiA在家蚕微孢子虫能量代谢与物质合成中的作用提供了初步线索。
- 尚瑞沙齐静茹陈红丽张志林张轶岭沈中元
- 关键词：家蚕微孢子虫实时荧光定量PCR
- 转运蛋白TSPO及其激动剂、抑制剂在家蚕微孢子虫相关药物中的应用
- 本发明公开了转运蛋白TSPO、编码转运蛋白TSPO的核酸或基因、其重组载体或重组菌株在影响家蚕微孢子虫增殖中的应用。通过在药物中加入转运蛋白TSPO的重组载体或激动剂可有效抑制家蚕微孢子虫的增殖，在家蚕卵巢细胞内加入转运...
- 唐旭东刘梦瑾苏亚萍吕丁丁张轶岭沈中元钱平
- 从蓝萤叶甲分离出的大型微粒子孢子对家蚕的病原性研究被引量：6
- 1993年
- 家蚕微粒子病是蚕种及养蚕生产的一大病害,其病原是家蚕微粒子孢子,但也有一些从野外昆虫中分离得到的微粒子孢子能感染寄生家蚕。我们从四川采集来的蓝萤叶甲(俗称蓝叶虫)中分离收集到一种大型微粒子孢子(以下简称蓝叶虫微粒子),其检出率为42/57。这种微粒子孢子形态为长卵圆形,大小为4.6—5.2×2.6 3.3μm,比较整齐,其间也有少数大型孢子(6.7×3.6μm)。在光学显微镜下观察,该孢子表面光滑,呈淡绿色,其析光性比家蚕微粒子孢子更强。我们将这种微粒子孢子纯化后作了对家蚕病原性等方面的试验,现将结果报告如下。
- 沈中元黄可威徐莉
- 关键词：家蚕微粒子病病原
- 家蚕类泛素化翻译后修饰蛋白NEDD8的cDNA克隆、表达分析和亚细胞定位被引量：1
- 2016年
- 【目的】NEDD8是一种重要的蛋白质翻译后修饰蛋白,对底物蛋白的功能具有重要的调节作用。本研究旨在探索家蚕Bombyx mori中NEDD8的功能。【方法】利用RT-PCR技术,从家蚕Bm N细胞中克隆了家蚕NEDD8完整的开放阅读框。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测家蚕NEDD8在不同发育阶段、5龄第3天幼虫不同组织中以及Bm NPV感染Bm N细胞后的相对表达量。通过构建GFP融合表达的重组Bm NPV(B.mori nucleopolyherovirus)感染家蚕Bm N细胞,在共聚焦显微镜下观察NEDD8在细胞中分布情况,用GFP抗体进行Western blot验证。【结果】克隆获得了NEDD8基因。序列分析表明,家蚕NEDD8高度保守,与家蚕泛素蛋白氨基酸序列一致性最高。qRT-PCR分析结果表明,NEDD8在家蚕的不同组织中均有表达,其中头部中表达量最高,其次是丝腺中,而在精巢和卵巢中表达量最低;在家蚕5龄第3天幼虫始到化蛹后第3天NEDD8的表达量开始逐渐增加,化蛾后降至低水平;在家蚕杆状病毒感染Bm N细胞的早期和极晚期NEDD8的表达量都有明显增加。GFP-NEDD8融合表达定位显示NEDD8在Bm N细胞内普遍存在,分布于整个细胞中,并且在感染48 h后存在细胞质内的聚集现象。【结论】NEDD8编码序列在物种间高度保守;NEDD8在家蚕幼虫头部中表达量最高,在化蛹阶段表达量逐渐增加;NEDD8在Bm N细胞内普遍存在并且可能与参与Bm NPV复制。本研究所得结果为进一步研究NEDD8在家蚕中的生物学功能及修饰底物蛋白的作用机制奠定了基础。
- 于洁徐莉沈中元唐旭东
- 关键词：家蚕泛素化细胞定位
- 丙硫咪唑对家蚕微孢子虫β-tubulin基因表达抑制作用的研究
- 咪唑能够特异性结合在微孢子虫的β 微管蛋白基因上，抑制β 微管蛋白与α 微管蛋白组装微管或使已组 装的微管解聚，使纺锥体不能形成，从而抑制细胞的有丝分裂。为了从分子生物学角度验证丙硫咪唑对家蚕微孢子 虫治疗作用的效果，阐...
- 陈大睿沈中元唐旭东徐莉朱峰陶恒平管蕊
- 关键词：丙硫咪唑家蚕微孢子虫Β-TUBULIN基因表达实时荧光定量PCR
- 文献传递
- 菜粉蝶微孢子虫对家蚕的病原性研究被引量：4
- 1996年
- 家蚕微粒子病主要是由家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,简称N.b)的感染和寄生引起的,N.b孢子除能寄生家蚕外,还能寄生许多野外昆虫。近年来,在各地母蛾检查中,经常发现一些与N.b孢子形态大小不同的微孢子虫,给检种工作带来许多困难。为了弄清这些异型微孢子虫对家蚕的病原性及对养蚕生产的危害性,进行了各类微孢子虫的收集、分离和生物学特性研究,曾发现从蓝萤叶甲、桑尺蠖和丝棉木金星尺蠖等野外昆虫分离到的几种微孢子虫对家蚕具有致病性。
- 沈中元徐莉王红林黄可威
- 关键词：家蚕病原
- 全杀威对蚕的病原体消毒效果研究被引量：2
- 1992年
- 全杀威(又名90蚕用消毒净)是有机氯的复合散剂。400倍水溶液对家蚕病毒多角体,800倍液对家蚕病原真菌,1600倍液对家蚕病原细菌和微粒子孢子有明显的消毒效果。是广谱性高效消毒药剂。250倍液可用于蚕室、蚕具消毒;800倍液用于叶面消毒。使用时以现配现用为好。
- 黄可威陆有华覃光星沈中元
- 关键词：家蚕病原体消毒
