梁耀峰
- 作品数：5 被引量：27H指数：3
- 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划“十一五”国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鸡传染性支气管炎病毒H52株TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：7
- 2012年
- 本研究建立了一种快速的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H52株定量检测方法,为进一步研究疫苗的效价检测和质量监控新方法奠定基础。针对IBV核蛋白(N)基因,设计特异的H52株荧光定量PCR检测引物和TaqMan-MGB探针,优化反应体系和条件后进行特异性、敏感性、重复性试验,探讨荧光定量RT-PCR与EID50方法测定病毒含量的相关性,并通过体外转录技术对病毒基因拷贝数进行定量分析。该方法特异性强,与其他禽源病毒均无交叉反应;该方法可检测到5.60×101拷贝/μL的病毒核酸,与常规PCR相比,敏感性高10倍;重复性试验的变异系数为0.9%～3.2%;与EID50检测结果的相关系数r=0.934,两种方法在检测H52株病毒效价上具有很好的相关性。本研究建立的TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR方法,适合于对鸡传染性支气管炎病毒H52株病毒含量的快速定量检测。
- 梁耀峰郭霄峰宋立刘洋
- 关键词：荧光定量RT-PCRTAQMAN-MGB探针鸡传染性支气管炎病毒
- 猪细小病毒和猪源脑心肌炎病毒的二重PCR检测方法的建立被引量：2
- 2012年
- 试验旨在建立能同时检测猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)和猪源脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EM-CV)的二重PCR检测方法。根据GenBank中PPV VP2基因和EMCV 3D基因序列,利用Premier 5.0软件设计出PPV和EMCV的特异性引物。通过优化反应条件,建立了能同时特异性检测PPV和EMCV的二重PCR方法,PPV和EMCV的敏感性检测极限分别达7.62和1.22×10-1pg/μL。通过对临床36份样品的检测结果表明,该二重PCR检测方法敏感、特异,适合于临床检测应用。
- 朱向博刘业兵王晶钰张晓杰梁耀峰王利勤董睿陈婷李成山
- 关键词：PPVEMCV二重PCR
- IBV S10株结构基因分析及荧光定量RT-PCR检测方法的建立
- 选取本实验室一株从肾脏分离的鸡传染性支气管炎病毒(S10株)，对该毒株进行分子生物学分析，研究其与国内外参考毒株间的同源性和系统发育关系;根据N基因序列，建立S10株荧光定量PCR的检测方法，并将该方法用于病毒含量的监测...
- 梁耀峰
- 关键词：鸡传染性支气管炎荧光定量RT-PCR
- 中国部分地区猪源和牛源金黄色葡萄球菌耐药性及凝固酶分型研究被引量：14
- 2012年
- 【目的】了解中国动物源金黄色葡萄球菌的耐药现状,以及凝固酶血清型和基因型分布情况,为控制动物源金黄色葡萄球菌的传播和流行提供理论依据。【方法】用微量肉汤稀释法测定细菌耐药性;用凝固酶分型血清确定血清型别;扩增凝固酶基因(coa)并进行序列测定,用mega软件进行序列分析。【结果】共鉴定出124株金黄色葡萄球菌。耐药性检测结果表明,在13种测试抗菌药中,金黄色葡萄球菌对氨苄西林和青霉素的耐药率最高,接近100%,其次是红霉素75%,其它10种药物的耐药率在50%以下,头孢西丁耐药率27%,未发现万古霉素耐药菌株;凝固酶血清分型率达91%,共分出6个型,VII型,VI型和复合型占优势,未分离到Ⅲ型和Ⅴ型;扩增凝固酶基因,共分为6个基因型;构建了凝固酶基因的系统进化树。【结论】中国动物源金黄色葡萄球菌的耐药状况比较严重,猪源菌株的耐药率要高于牛源菌株。凝固酶血清型别多样,分布相对较集中,具有独特的流行特征;凝固酶表型与其基因的进化特征并没有出现直接对应关系,但为进一步开展兽医临床金黄色葡萄球菌分子流行病学调查研究奠定了理论基础。
- 刘洋梁耀峰焦新安宋立张纯萍宁宜宝徐士新
- 关键词：金黄色葡萄球菌耐药性
- 食源性抗菌药耐药性风险分析指南介绍被引量：4
- 2013年
- 介绍了2011年国际食品法典委员会(CAC)制定的《食源性抗菌药耐药性风险分析指南》主要内容,为非人用抗菌药相关的食源性抗菌药耐药性应用及我国制定抗菌新兽药的安全评价原则、风险评估方案和管理政策提供参考。
- 马苏宋立梁耀峰刘洋
- 关键词：食品安全
