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对氧磷酸酯酶-1Glu-Arg192位多态性与冠心病关系的研究被引量：7: 2001年; 目的 :探讨对氧磷酸酯酶 - 1(PON- 1)基因 Glu- Arg192位多态性、血清 PON- 1活性与冠心病的关系。　　方法 :用多聚酶链限制片段多态性反应技术对 12 3例冠心病 (CHD)患者 (CHD组 )及 110例正常人 (正常对照组 )的PON- 1192位进行基因分型 ,用酚乙酸酯为底物测定血清 PON- 1活性。　　结果 :重庆居民 PON- 1基因 192 A、B等位基因频率在正常对照组为 0 .43、0 .5 7,CHD组为 0 .40、0 .6 0。 CHD组的PON- 1AA、AB、BB基因型的构成比与正常对照组无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ,正常对照组 3种基因型之间血脂无显著相关 (P>0 .0 5 ) ,CHD组的 PON- 1活性 (75 .6± 2 3.5 KU/ L )比正常对照组 (10 8.4± 18.3 KU/ L )显著下降 (P<0 .0 1)。　　结论 :重庆居民 PON- 1192 B等位基因与 CHD无关 ,血清 PON- 1活性与 CHD有一定的关系。; 刘万里曾昭淳何全张革邓国兰; 关键词：冠心病基因多态性高密度脂蛋白

人内皮抑素cDNA克隆和初步表达被引量：2: 2001年; 目的：克隆人内皮抑素基因，获得初步表达产物，为进一步研究打下基础。方法：用RT-PCR方法从中国汉族人正常肝组织扩增出内皮抑素cDNA，T/A插入pUCm-T载体，测序，再插入表达载体 pKPL-3a，转化大肠杆菌 POP2136，42℃诱导表达，SDS-PAGE分析表达蛋白。结果：中国人内皮抑素cDNA开放阅读框架全长552bp，编码184个氨基酸，其85位谷氨酸和98位天冬氨酸密码子的第三位碱基出现改变，但编码的氨基酸不变。结论：构建了中国人内皮抑素的克隆载体和表达载体，初步表达了约20kD人重组内皮抑素。; 张革曾昭淳刘万里; 关键词：人内皮抑素分子克隆基因表达 CDNA

血管发生抑制因子restin的克隆表达及其抗血管活性的初步研究被引量：3: 2002年; 目的 :克隆人血管发生抑制因子restin(hRS) ,在E .coli中融合表达 ,并测定其抗血管活性。方法 :用RT PCR法从中国人胎盘组织中扩增hRS基因 ,重组入pGEM T载体中并测序鉴定 ,构建原核表达载体pGEX hRS ,表达融合蛋白GST hRS。融合蛋白经亲和纯化及凝血酶切后 ,采用鸡胚绒毛膜尿囊膜试验检测其抗血管生成活性。结果 :RT PCR产物为 5 64bp ,测序结果与Genbank中胶原XV(COL15A1)的C端序列一致 ,但在 2 1位 (TCT→TCG)引起丝氨酸的同义突变 ,82位 (ACA→TCA)引起丝氨酸突变为苏氨酸。诱导表达的人GST hRS融合蛋白经凝血酶切后 ,分子量为 2 0kD ,具有抗血管生成活性。结论 :hRS的成功克隆、表达为抗血管生成治疗实体瘤的研究奠定了实验基础。; 张革柯细松冯涛周兰曾昭淳; 关键词：RESTIN 抗血管生成活性胎盘组织基因克隆

对氧磷酯酶1与2型糖尿病肾病的关系被引量：13: 2002年; 目的　探讨血清对氧磷酯酶 1(PON1)活性与 2型糖尿病 (DM)并发肾病 (DN)的关系。方法　血清PON1活性用酚乙酸酯为底物测定 ,血浆氧化型低密度脂蛋白 (ox LDL)用ELISA法测定 ,尿 2 4小时微量白蛋白用放免法测定。结果　 91例 2型DM患者的PON1活性比 5 4例正常对照显著降低〔(138.2± 31.4 )kU/Lvs (184 .1± 2 9.5 )kU/L ,P <0 .0 0 1〕 ,且 2型DM的Ⅰ组 (UAER <30mg/ 2 4h)、Ⅱ组 (UAER 30～ 30 0mg/ 2 4h)和Ⅲ组 (UAER >30 0mg/ 2 4h)相比 ,PON1活性依次显著下降〔(15 1.8± 2 4 .5 )kU/L ,(12 4 .5± 32 .8)kU/L ,(10 1.1± 36 .6 )kU/L ,P <0 .0 1〕 ,而ox LDL的浓度却依次显著升高〔(6 16 .2± 135 .7) μg/L ,(75 3.9± 132 .5 ) μg/L ,(875 .1± 15 3.2 ) μg/L ,P <0 .0 1〕。PON1活性与ox LDL的浓度呈高度负相关 (r =- 0 .83,P <0 .0 0 1) ,也与UAER呈负相关 (r =- 0 .2 8,P<0 .0 5 ) ,多元回归分析表明PON1活性是 2型DM并发DN的高度危险因素 (P <0 .0 1)。结论　PON1活性在 2型DM显著下降 ,且在并发DN的 2型DM患者下降更显著。PON1活性与ox LDL呈负相关。PON1活性降低是; 曾昭淳刘万里王红漫张革柯细松曾繁荣; 关键词：非胰岛素依赖型糖尿病糖尿病肾病对氧磷酯酶1 氧化型低密度脂蛋白

人内皮抑素在大肠杆菌中的高效表达及活性研究被引量：2: 2002年; 目的 :表达人内皮抑素蛋白 ,制备多克隆抗体 ,检测其生物学活性。方法 :采用PCR法扩增人内皮抑素基因 ,构建pGEX -ES融合表达载体 ,IPTG(异丙基硫代 - β-D半乳糖苷 )诱导表达。初步纯化的内皮抑素包含体蛋白制备兔多克隆抗体 ,Western -blot检测其在小鼠肝、肾等的表达。亲和纯化的内皮抑素蛋白用内皮细胞抑制实验检测其生物学活性。结果 :诱导表达的人内皮抑素蛋白经凝血酶酶切后 ,分子量约为 2 0kD ,具有抑制内皮细胞生长的活性。制备的多克隆抗体检测出内皮抑素在小鼠肝、肾等组织的表达。结论; 张革柯细松丁爱玲银巍杨琨朱振宇; 关键词：内皮抑素大肠杆菌生物学活性实体瘤

人内皮抑素cDNA的克隆: 内皮抑素(endostatin)是XVIII型胶原C-末端183个氨其酸残基片段,是1997年发出对血管发生和肿瘤生长有专一性抑制作用的20kD的蛋白质.在动物实验中,具良好的抑瘤效果,并且无毒副作用,不产生耐药性.除此...; 张革; 关键词：分子克隆; 文献传递

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张革