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XTP3基因融合蛋白的表达纯化及多克隆抗体制备被引量：2: 2008年; 目的构建稳定表达乙肝病毒XTP3蛋白的原核表达载体并在大肠埃希菌中诱导融合蛋白的表达,制备兔抗XTP3蛋白多克隆抗体并检测该抗体在乙肝肝癌、正常肝组织中的作用效果。方法PCR获得XTP3基因片段,插入至pET-32a(+)中构建原核表达载体pET-32a(+)-XTP3,测序正确后转化大肠埃希菌BL21,IPTG诱导表达。SDS-PAGE、Western blotting分析鉴定融合蛋白的表达。利用Ni+亲和柱对表达蛋白进行纯化及柱上复性。免疫新西兰兔,制备多克隆抗体并进行ELISA、Western blotting及免疫组化验证。结果成功构建pET-32a(+)-XTP3表达载体并在大肠埃希菌中诱导出高水平表达的XTP3融合蛋白,目的蛋白分子量为52kD,SDS-PAGE分析表明为包涵体表达。经亲和树脂纯化后免疫新西兰兔,成功获得融合蛋白及兔抗XTP3多克隆抗体。ELISA检测证明多克隆抗体效价>1:128000。免疫组化证实本实验中XTP3多克隆抗体在肝癌组织中的表达呈明显的细胞膜阳性,特异性良好。结论成功表达、纯化了XTP3基因融合蛋白,获得高特异性、高效价兔抗XTP3多克隆抗体,为进一步研究XTP3蛋白的生物学特性奠定了基础。; 徐浩赵龙凤成军刘秀财王琦李国力洪源兰孟东孙成福; 关键词：原核表达

HBV经胎盘垂直传播的分子机制研究: 目的研究乙型肝炎胎盘传播的机制,调查胎盘组织中HBV感染与胎儿宫内感染的关系,为临床诊断和预防宫内感染的提供理论依据和方法。方法60例携带有HBsAg的孕妇分娩后,对胎盘组织,使用HE方法,调查病理形态学改...; 孙成福; 关键词：原位杂交原位PCR; 文献传递

艾滋病患者肝组织瘦素的表达及与肝脂变的关系被引量：3: 2008年; 目的:调查北京地区艾滋病患者肝脂变的发生率,研究艾滋病患者肝组织中瘦素与肝脂变的关系.方法:应用免疫组织化学法检测18例国人艾滋病患者肝组织中瘦素、CD68及TNF-α的表达,评价这些患者肝脏的组织学改变及脂变状况,分析性别、年龄、肝功能、血脂水平、空腹血糖、HIV病毒载量、CD4+细胞计数和CD8+细胞计数与肝脂变的关系.结果:本组病例艾滋病患者肝脂变的发生率为61.1%(11/18),其中大泡脂变占72.7%(8/11),合并肝病相关性机会性感染者占22.2%(4/18).18例肝组织中瘦素检出率为44.4%,有肝脂变的肝组织其瘦素及CD68表达的阳性率高于无脂变组,但无统计学意义,脂变组TNF-α的阳性率显著高于无脂变组(100%vs42.9%P=0.012).除CD8+细胞计数(×106个/L)在脂变组显著低于无脂变组(142.0±93.0vs515.6±320.7,P=0.026)外,其余因素如年龄,体质量指数、肝功能、血脂水平、空腹血糖、HIV载量、CD4+细胞计数及是否合并丙型肝炎感染均与肝脂变的发生无显著相关.结论:艾滋病患者中肝脂变发生率较高,肝脂变的发生与瘦素的表达未见明显相关,可能与肝组织损伤修复机制有关.; 兰孟东孙成福赵红心沈冰张亮赵辉卢联合王笑梅郎振为李兴旺毛羽; 关键词：艾滋病 HIV感染瘦素肿瘤坏死因子-Α 免疫组化

乙型肝炎病毒胎盘垂直传播的机制: 2009年; 目的研究胎盘组织中HBV感染与胎儿宫内感染的关系。方法携带HBsAg的孕妇,血清HBV DNA阴性12例;血清HBV DNA阳性19例;血清HBV DNA阳性,孕晚期拉米夫定治疗16例;血清HBV DNA阳性,孕晚期免疫球蛋白(HBIG)治疗19例。使用免疫组化与原位聚合酶链反应(In situpolymerase chain reaction,IS PCR),检测胎盘组织中的HBcAg与乙型肝炎共价环状DNA(HBV covalentlyclosed circular DNA,HBV cccDNA)。结果胎盘绒毛炎发生率与婴儿发生宫内感染率具有明显相关性(P<0.05);胎盘HBcAg的感染率与婴儿发生宫内感染率之间具有明显的相关性(P<0.05);治疗后,胎盘HBVccc DNA感染与婴儿发生宫内感染没有显著差异性(P>0.05)。结论胎盘组织发生炎症,使部分绒毛发生纤维素样坏死,胎盘屏障受损,通透性增加,HBV易通过胎盘屏障感染胎儿;HBcAg在胎盘中的表达,表明HBV感染与复制,是导致宫内感染的危险因素;阻断治疗可能抑制了感染胎盘组织cccDNA复制,使宫内感染的危险性降低。; 孙成福兰孟东成军李朝品郎振为李国力王琦; 关键词：原位聚合酶链反应免疫组织化学

乙型肝炎病毒胎盘垂直传播机制的研究进展被引量：2: 2009年; 孙成福兰孟东; 关键词：乙型肝炎病毒感染慢性HBV携带者公共卫生问题母婴垂直传播新生儿感染慢性携带者

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孙成福