薛仁宇
- 作品数:244 被引量:563H指数:16
- 供职机构:苏州大学更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 虾白斑综合症病毒病核酸样品制备方法及虾白斑综合症病毒检测方法
- 本发明属于生物技术中的病毒检测领域,具体涉及一种虾白斑综合症病毒病诊断用核酸样品制备方法以及利用核酸样品经LAMP扩增后检测虾白斑综合症病毒的方法:取处死的新鲜的虾的组织,稍剪碎后加到缓冲液III中,快煮、离心后取上清作...
- 薛仁宇贡成良曹广力魏育红朱越雄沈卫德周小燕
- 文献传递
- 稳定转化家蚕BmN细胞表达人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子被引量:12
- 2009年
- 为了建立稳定转化家蚕细胞持续表达外源基因的技术体系,构建了基于piggyBac转座子的带有人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因(hGM-CSF)和新霉素抗性基因(neo)表达元件的转基因载体pigA3GFP-IE-neo-FH-hGM-CSF-polyA-fib-L-intron1,以及带有hGM-CSF和吉欧霉素(zeocin)抗性基因的昆虫细胞转化载体pIZT-IE-hGM-CSF,分别转染家蚕卵巢BmN细胞,并以含相应抗生素G418或zeocin的培养液筛选,得到稳定的转化细胞系FH-hGM-CSF和IE-hGM-CSF。ELISA检测结果显示,hGM-CSF在FH-hGM-CSF和IE-hGM-CSF转化细胞系的表达水平分别为1.534 55 fg/个细胞和2.227 38 fg/个细胞。
- 李曦赵越周文林曹广力薛仁宇贡成良
- 关键词:PIGGYBAC转座子
- 美国白蛾核型多角体病毒p35基因的克隆及序列分析被引量:11
- 2002年
- 对美国白蛾核型多角体病毒 (HycuNPV ,Hyphantriacuneanucleopolyhedrovirus)p35基因的序列分析表明 :HycuNPVp35编码序列 90 0bp ,编码 2 99氨基酸。同源性分析表明 :HycuNPVp35与BomoNPVT3、AucaNPV、SpliNPV、LeseNPV、HearNPV在核苷酸水平上为 99 9%、 95 7%、 93 6 %、 80 2 %和 87 2 % ,在氨基酸水平上为 99 7%、 90 3%、 77%、 6 4 9%和 73 2 % ,显示了杆状病毒p35基因在进化上的保守性。BomoNPVT3中位的H1 2 2 ,在HycuNPV中被R取代。推测HycuNPVp35蛋白的功能及抑制细胞凋亡的能力与BomoNPVT3p35蛋白的相似。
- 曹广力薛仁宇朱越雄魏育红贡成良
- 关键词:美国白蛾核型多角体病毒P35基因克隆
- 蟹组织中致病性嗜水气单胞菌的分离及其特性被引量:3
- 2002年
- 1999年 6月从江苏省启东市某水产养殖场患病濒死的中华绒螯蟹肝胰腺中分离出 3株致病菌。经回感实验证实了菌株在 2 4h内对健康蟹的致死率分别为 10 0 %、75 %和 6 0 % ,回感温度升高可导致死亡时间缩短。经细菌形态、生理生化特性等鉴定为嗜水气单胞菌 ,分别定名为 ES- 1、ES- 2和 ES- 3菌株。3株菌的最适生长温度在 35℃ ,p H8,Na Cl浓度 0~ 1%。
- 朱越雄曹广力贡成良薛仁宇魏育红
- 关键词:嗜水气单胞菌中华绒螯蟹
- 家蚕丝蛋白Fhx/P25基因启动子区域的克隆及序列分析被引量:19
- 2007年
- 为研究家蚕Fhx/P25基因在时空上的调控机制,通过PCR扩增获得家蚕丝素蛋白Fhx/P25基因的启动子序列并进行克隆和序列分析。进一步构建了由Fhx/P25启动子驱动报告基因DsRed的表达载体pSK-P25-DsRed-PolyA,并通过家蚕BmN细胞进行瞬时表达。结果显示:Fhx/P25基因的启动子序列符合真核生物启动子特点,具有丝腺特异性表达启动子的特征,TATA框的保守序列为TATAA,位于-28—-32处,CAAT基序有3个,其中-110—-117和-90—-87处的2个CAAT基序可能具有活性;二级结构分析显示:Fhx/P25启动子区域具有复杂的茎环结构,这可能与蛋白表达的组织特异性、时间性以及活性有关。基因启动子可以驱动红色荧光基因DsRed在家蚕BmN培养细胞中的瞬时表达。
- 刘炜彬贡成良薛仁宇周文林诸戌娴曹广力
- 关键词:家蚕启动子
- 地区性蟹病的诊疗和蟹的健康养殖
- 2000年
- 魏育红薛仁宇贡成良
- 关键词:蟹病病情健康养殖
- 一种表达红色荧光蛋白的重组家蚕质型多角体病毒的构建方法
- 本发明公开了一种表达红色荧光蛋白的重组家蚕质型多角体病毒的构建方法。具体而言,本发明的方法包括下列步骤:1)获得病毒基因组;2)设计并合成引物;3)获得病毒基因组的cDNA;4)对cDNA进行PCR扩增;5)将扩增产物进...
- 贡成良曹广力薛仁宇胡小龙郭睿
- 文献传递
- 基于RNA-Seq技术检测分析家蚕卵巢发育高表达基因被引量:3
- 2013年
- 为了从分子水平解析家蚕卵巢发育和卵子发生的机制,对家蚕卵巢组织进行深度RNA测序,并对高表达基因进行KEGG通路富集分析。取5龄3 d、5龄6 d及化蛹2 d的家蚕卵巢分别抽提RNA,并合成cDNA,将3组样品混合后进行RNA-Seq测序,得到的总reads条带数为6 306 078,平均长度为100 bp,其中clean reads达到98.87%,测序饱和度良好,证明测序数据真实可靠。clean reads对应的基因数为9 609个。以家蚕Actin3基因为参照,计算所测基因的log2(Fold_change),将log2(Fold_change)>2的基因定义为高表达基因,共有66个基因为高表达基因。利用KEGG通路富集分析发现这些基因主要集中在能量代谢、蛋白质合成、信号转导等路径中。研究结果为理解家蚕卵巢发育及卵子的发生提供了新的线索。
- 宋作伟黄茉莉薛仁宇曹广力贡成良
- 关键词:家蚕卵巢
- ie-1和lef-1基因dsRNA表达元件转染及转化细胞对家蚕核型多角体病毒增殖的抑制被引量:12
- 2008年
- 通过RNAi介导可以抑制病毒增殖,将相应的RNAi元件通过转基因转入宿主有可能使宿主对病毒产生一定的抗性。根据家蚕核型多角体病毒(BmNPV)基因组中的病毒复制必需基因ie-1、lef-1设计相应的RNA干扰区段,并构建相应的转基因载体转入家蚕BmN细胞中,瞬时表达结果显示转染了转基因RNAi载体的BmN细胞均对BmNPV有一定的抑制作用。IE dsRNA在病毒滴度为10-4时有抑制作用,在病毒滴度为10-5时有比较好的作用;LEF dsRNA则在病毒滴度为10-5时有抑制作用,在病毒滴度为10-6时有较好的抑制作用。通过转基因及G418筛选后,转基因IE dsRNA细胞在病毒滴度为10-4显示出一定的抑制作用,在病毒滴度为10-5表现了明显的抑制作用;而转基因LEF dsRNA细胞在病毒滴度为10-5有一定的抑制作用,但只维持了一个时段。
- 薛仁宇曹广力王崇龙刘波沈卫德贡成良
- 关键词:家蚕核型多角体病毒家蚕细胞
- 一种家蚕生物反应器制备人白介素28A的方法及其制药用途
- 本发明涉及基因工程领域,具体涉及一种家蚕生物反应器制备带有人白介素28A的方法,通过基因工程方法获得重组的带人白介素28A(hIL-28A)基因的家蚕Bombyx mori重组杆状病毒,并用该病毒接种家蚕幼虫或蛹,使人白...
- 贡成良陆叶郑小坚薛仁宇曹广力
- 文献传递