蒲静
- 作品数：37 被引量：37H指数：4
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- 一种适用于微小组织切片制作的包埋盒
- 本实用新型公开了一种适用于微小组织切片制作的包埋盒，包括盒体和盒盖；盒体包括底板以及竖直固定于底板边缘的侧板，侧板和底板围合成容纳腔，容纳腔底部设置有若干固定座，固定座内可插拔的安装有置物框；盒盖与盒体相连或分离设置，其...
- 俞晓丽王翔孙苗蒲静刘心蕊邱意开张樱馨裴秀英
- 文献传递
- 结核分枝杆菌TB10.4亚单位疫苗的构建及免疫原性研究
- 2015年
- 目的构建结核分枝杆菌TB10.4基因的原核表达载体,表达和纯化该蛋白,构建亚单位疫苗,并对其免疫原性进行研究。方法从重组质粒p ET-SUMO-TB 10.4获得基因片断后,将其插入到载体p ET-28a(+),转化Ecoli DH5α感受态细胞,随机筛选阳性克隆,测序正确后并将该重组质粒转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,经SDS-PAGE分析后,用Ni-NTA亲和层析柱进行纯化并复性。随机将C57BL/6雌性小鼠分为Tris-HCl组、TB10.4组(佐剂为DDA/Poly I∶C)及卡介苗(BCG)3组,每组10只,每只小鼠每次免疫200μL,其中DDA250μg及Poly I∶C 25μg,蛋白量为20μg,而BCG为5×106CFU,分别于1、4、7周皮下免疫小鼠。末次免疫4周后,用特异性抗原TB10.4刺激脾淋巴细胞,检测其分泌IFN-γ水平;用ELISA检测血清特异性抗体Ig G2b、Ig G1。结果构建了原核表达重组质粒p ET-28a-TB10.4,并在分子量约为10.4k Da处观察到蛋白条带;小鼠血清中产生特异性抗体Ig G2b与Ig G1,体外脾淋巴细胞受TB10.4刺激时分泌IFN-γ水平显著高于Tris-HCl组(P<0.05)及BCG组(P<0.05)。结论 TB10.4蛋白与佐剂构建了亚单位疫苗,该疫苗可在C57BL/7小鼠中诱导抗原特异性免疫应答,可作为新型结核亚单位疫苗的候选疫苗予以进一步研究。
- 胡健裴秀英苏芹苏芹王博高玉婧蒲静
- 关键词：结核分枝杆菌免疫原性
- 2，4-二氨基嘧啶类化合物及其盐、制备方法及其作为抗结核分枝杆菌药物的应用
- 本发明提供的一种2，4‑二氨基嘧啶类化合物，化学结构通式如下式(I，II)：<Image file="DDA0001058254830000011.GIF" he="232" imgContent="drawing" i...
- 王昊洪伟谭晓丽欧阳溢凡杨浩王瑜张鹏常喆李京洋杨彦辉蒲静孙涛
- 文献传递
- ROCK抑制剂在促进卵母细胞基因Bmp15和Gdf9表达量上调中的应用
- 本发明公开了一种ROCK抑制剂在促进卵母细胞基因Bmp15和Gdf9表达量上调中的应用。其中，ROCK抑制剂Y27632可促进卵母细胞特异性基因Bmp15和Gdf9表达量上调，促进卵泡细胞增殖发育。本申请采用了无血清培养...
- 裴秀英俞晓丽张樱馨王燕蓉常青马会明杨延周马文智付旭锋何瑞蒲静刘心蕊邱意开张彦平
- 文献传递
- 一种Rho-ROCK信号通路抑制剂Y27632对小鼠卵泡体外发育影响的研究方法
- 本发明公开了一种Rho‑ROCK信号通路抑制剂Y27632对小鼠卵泡体外发育影响的研究方法，取出生后12天的小鼠卵巢，通过不同分离方法获得腔前卵泡，采用微滴的方式进行卵泡生长和卵母细胞体外成熟培养。实验设置空白对照组和含...
- 俞晓丽蒲静刘心蕊罗晓强邱意开张樱馨王翔裴秀英
- 小鼠卵巢玻璃化冻存中FSH干预对移植卵巢VEGF和VEGFR-2表达的影响被引量：1
- 2014年
- 目的通过在玻璃化冻存液中给予重组人促卵泡刺激素(rhFSH),观察冻存卵巢异体异位移植后VEGF和VEGFR-2表达的变化,探索卵巢玻璃化冻存中的FSH干预对移植卵巢血流重建相关因子的影响。方法对4周龄C57BL/6J小鼠卵巢进行异体肾被膜下移植,实验分为新鲜移植组(FCG)、单纯玻璃化冻存移植组(VCG)和0.3IU·mL-1FSH干预玻璃化冻存移植组(VG-FSH)。通过监测受体小鼠动情周期的变化、卵巢组织切片中正常卵泡百分比、移植后2、7、14、28d卵巢VEGF及其受体VEGFR-2的表达,判断FSH干预效果。结果 FSH干预冻存组的正常卵泡数、VEGF及VEGFR-2的表达均高于单纯玻璃化冻存组(P<0.05),且均低于新鲜移植组;FSH干预冻存组动情周期恢复所需时间明显低于冻存组(P<0.05),而明显长于新鲜移植组(P<0.05)。结论玻璃化冻存全程添加FSH干预,有利于冻存卵巢移植后的卵泡存活及功能恢复,可能与上调促血管生成的VEGF、VEGFR-2蛋白的表达有关。
- 颜贝单园园蒲静王燕蓉高玉婧张淑雅杨延周裴秀英
- 关键词：小鼠卵巢FSH玻璃化冻存VEGFVEGFR-2
- Rho/ROCK抑制剂Y27632对小鼠腔前卵泡体外培养的影响被引量：4
- 2019年
- 目的探讨Rho/ROCK信号通路抑制剂Y27632对小鼠卵泡体外发育的影响。方法取出生后12.5d的小鼠卵巢,采用机械法收集单个腔前卵泡,用微滴培养法对其进行培养。设置对照组和含有Y27632的处理组,培养期间观察卵泡和卵母细胞生长状态,同时,测量对照组和处理组的卵泡直径和卵母细胞直径,用荧光定量PCR技术检测颗粒细胞、卵母细胞以及凋亡相关基因的表达情况,同时用细胞荧光染色技术监测卵泡中颗粒细胞的凋亡情况。结果通过形态学观察,培养基中添加Y27632后,整个卵泡生长过程中,卵泡的增长直径为(25.90±3.69)μm和卵母细胞增长直径为(4.37±1.89)μm,与对照组相比差异均无统计学意义(P均>0.05)。经荧光定量PCR技术检测发现,随着卵泡的不断发育,颗粒细胞表达相关基因Amh、Lhr、Fshr和Foxl2,与对照组相比有差异,而卵母细胞特异性基因Bmp15则无变化。卵母细胞成熟后经微管染色发现,Y27632的添加并不影响卵母细胞完成第一次减数分裂。通过卵泡活力检测的结果得知,处理组的颗粒细胞凋亡现象少于对照组,凋亡基因Bad低于对照组,且能引起凋亡抑制基因Xiap的上调。结论小鼠卵泡经微滴法培养后,添加Y27632能提高颗粒细胞的基因Amh、Lhr、Fshr和Foxl2的表达。同时可降低颗粒细胞的凋亡,从而维持卵泡的正常发育。
- 俞晓丽蒲静蒲静刘心蕊刘心蕊张樱馨裴秀英
- 关键词：小鼠腔前卵泡体外培养卵母细胞成熟
- 肉苁蓉多糖在促进雌性生殖干细胞增殖分化方面的应用
- 本发明提供了一种肉苁蓉多糖在促进雌性生殖干细胞增殖分化方面的应用，具体为在体外培养体系中加入肉苁蓉多糖可以促进雌性生殖干细胞的增殖分化，尤其是提升雌性生殖干细胞体外定向分化为卵母细胞的能力，这为研究体内外卵母细胞发生能力...
- 裴秀英俞晓丽邱意开吴际余建强王燕蓉刘心蕊蒲静
- 一种诱导人多能干细胞体外分化为停滞在减数分裂II期的卵母细胞的方法
- 本发明公开了一种诱导人多能干细胞体外分化为停滞在减数分裂II期的卵母细胞的方法，该方法分为三步，首先将细胞密度为80％的多能干细胞更换PGC‑m培养基，于35～40℃、3％～6％CO<Sub>2</Sub>下培养10天，...
- 俞晓丽王宁王翔任亚辉王华岩张樱馨邱意开蒲静刘心蕊裴秀英王燕蓉
- 文献传递
- 热休克蛋白60基因定点诱变导致其在细胞内定位的改变被引量：1
- 2011年
- 目的研究将热休克蛋白60(HSP60)蛋白序列中第70位的丝氨酸(serine)突变为丙氨酸(alanine)后,HSP60在细胞内定位的改变。方法将PrC/CMV-HSP60P1重组质粒中HSP60P1编码第70位丝氨酸的碱基定点诱变为编码丙氨酸的碱基序列,转染至小胶质细胞BV-2细胞株中表达。细胞经10h缺氧处理后,裂解细胞,应用差速离心方法分离细胞膜、细胞质和线粒体,应用Western-blot方法检测各细胞器中HSP60的含量。结果在转染未诱变PrC/CMV-HSP60P1质粒的细胞中,正常情况下,HSP60大部分分布在线粒体,少部分在胞浆,细胞膜中未见表达;缺氧刺激后,HSP60在细胞膜、胞浆和线粒体中均有表达;然而70位丝氨酸突变为丙氨酸后,只观察到HSP60在胞浆和线粒体中的表达,而在细胞膜上未见表达。结论作为磷酸化位点的Serine70对HSP60在细胞内的定位具有关键作用。
- 王银李云鸿滕鹏成文静张玉梅苗珍花蒲静马娇张楠游丽琴
- 关键词：HSP60定点诱变磷酸化位点
