杨净思 作品数:70 被引量:287 H指数:10 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 国家高技术研究发展计划 美国中华医学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 化学工程 农业科学 更多>>
悬浮吸附方法生产H_2株甲肝减毒活疫苗的产量质量及免疫效果 被引量:3 2001年 :目的 在生产规模条件下 ,对悬浮和单层吸附方法应用于H2 株甲肝减毒活疫苗生产进行了 5年产量质量及人体免疫效果的比较。方法 采用悬浮吸附方法和单层吸附方法并进行比较。结果 悬浮吸附方法HAV增殖高峰比单层吸附方法提前 4天 ,抗原滴度高一个稀释度 ,病毒繁殖全程细胞质量优于单层吸附方法 ,整个生产周期可缩短 9天。历年大规模对比生产和人体免疫效果观察结果表明 :悬浮吸附方法生产甲肝疫苗滴度略高于单层吸附方法 ,两者生产的疫苗在人体免疫效果方面无显著差异。结论 悬浮吸附方法更适宜H2 株甲肝减毒活疫苗工业化、规模化生产。 杨净思 曹逸云 王晓辉 胡凝珠 蒋国润 柯华昕 杨晓蕾 王东宝 董德祥关键词:免疫效果 皮内免疫部分剂量组分无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗的免疫持久性 2023年 目的评价皮内免疫(intradermal,ID)部分剂量组分无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗(diphtheria-tetanus-acellular component pertussis and Sabin-derived inactivated poliovirus vaccine,DTacP-sIPV)的免疫持久性。方法将40只Wistar大鼠(雌雄各半)分别经ID部分剂量(DTacP-sIPV 1/5和1/10剂量,即1/5D和1/10D ID组)及肌肉注射(intramuscular,IM)全剂量DTacP-sIPV(全剂量IM组),同时设空白对照组(ID PBS)。于0、1、2月共免疫3次,末次免疫后12个月经尾静脉采血,分离血清。微量中和试验法检测抗脊髓灰质炎病毒中和抗体滴度,间接ELISA法检测大鼠血清中抗白喉毒素(diphtheria toxin,DT)、破伤风毒素(tetanus toxin,TT)、百日咳毒素(pertussis toxin,PT)、丝状血凝素(filamentous haemagglutinin,FHA)和百日咳黏附素(pertactin,PRN)的IgG抗体滴度,并计算抗体几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)及抗体阳性率。末次免疫后12个月,经雾化吸入百日咳杆菌气雾进行攻击,攻击时间为30 min,于气雾攻击后2、5、14 d检测各组大鼠白细胞数及肺、气管、鼻部位的菌落克隆形成数(colony-forming unit,CFU)。结果与全剂量IM组比较,1/5D和1/10D ID组脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中和抗体阳性率差异均无统计学意义(P均>0.05),空白对照组各型抗体阳性率均为0。1/5D、1/10D ID及全剂量IM组DT、TT、PT、FHA和PRN的IgG抗体阳性率均为100%,空白对照组IgG抗体阳性率均为0。与攻击后2 d比较,空白对照组大鼠经百日咳杆菌气雾攻击后5 d的白细胞数明显升高(F=3.48,P<0.05),随后开始下降;其他组均随时间的延长保持平稳(F=0.14~1.30,P>0.05)。气雾攻击后,空白对照组大鼠肺部细菌载量明显高于其他3组(F=19.00~206.00,P<0.05),攻击后14 d仍可检测到百日咳杆菌;除空白对照组外,其他3组大鼠肺部细菌载量均于攻击后5 d达峰值,14 d时基本清除,各时间点组间差异无统计学意义(F=1.14~1.25,P>0.05)。空白对照组各时� 李婧妍 蔡路奎 马艳 马艳 胡文著 温嘉纳 史荔 杨净思关键词:免疫持久性 Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗毒种的遗传稳定性 被引量:5 2016年 目的分析Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated poliomyelitis vaccine,sabin strain,s IPV)毒种(亚主种子、工作种子)及疫苗代次病毒(SO+4)的遗传稳定性。方法比较疫苗株SabinⅠ、Ⅱ型及PfizerⅢ型亚主种子、工作种子及疫苗代次病毒的感染性滴度及D抗原含量的变化情况,并对上述病毒进行全基因组测序。结果各代次Sabin株病毒滴度均维持在7.62-8.62 lg CCID50/ml,D抗原含量均维持在30-128 DU/ml。与Gen Bank上登录的SabinⅠ(AY184219.1)、Ⅱ(AY184220.1)、Ⅲ型(AY184221.1)减毒株原始种子(SO)基因序列相比,Sabin株亚主种子(SO+2)、工作种子(SO+3)及疫苗代次病毒(SO+4)均未出现碱基突变。结论 s IPV毒种及疫苗代次病毒的全基因序列与原始种子相比,均未发生变化,毒力均一,遗传性状方面保持了较好的稳定性。 邓燕 朱云 梁海孝 杨璐洁 罗娜 王虓宇 王海 杨卉娟 徐明珏 杨净思 孙明波关键词:脊髓灰质炎灭活疫苗 全基因组测序 Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗的研发及应用进展 被引量:6 2022年 脊髓灰质炎(简称脊灰)是一种仅能通过接种疫苗预防,尚无特异性治疗方法的急性肠道传染病。目前,全球消灭脊灰行动已到最后阶段,在所有国家被证实阻断脊灰野病毒(wild polio virus,WPV)传播后,全球将停止使用口服脊灰减毒活疫苗(oral polio vaccine,OPV),进入后脊灰时代。世界卫生组织(World Health Organization,WHO)倡导发展中国家生产、使用Sabin株脊灰灭活疫苗(inactivated polio vaccine made from Sabin stains,sIPV)。2015年,全球首剂sIPV单苗在我国获批上市,并于2016年纳入国家儿童免疫规划(National Immunization Program,NIP),开始实施IPV/bOPV序贯免疫接种程序。sIPV自研发及上市以来,安全性和免疫原性良好,被WHO纳入全球疫苗采购目录,其将作为后脊灰时代的重要产品广泛使用。本文对全球脊灰防控进程作一综述,对比两种脊灰疫苗,回顾并展望sIPV的研发和应用。 石昊昱 廖国阳 车艳春 易力 杨雨璠 李佳炫 尹兴晓 杨净思关键词:脊髓灰质炎 脊髓灰质炎疫苗 DTaP为基础的联合疫苗研究进展 吸附无细胞百日咳疫苗、白喉和破伤风类毒素联合疫苗(Adsorbed acellular pertussis vaccine, diphtheria toxoid & tetanus toxoid combined... 郑惠文 孙明波 杨净思关键词:联合疫苗 吸附无细胞百白破联合疫苗 脊髓灰质炎灭活疫苗 乙型肝炎疫苗 B型流感嗜血杆菌结合疫苗 新型Ⅱ型口服脊髓灰质炎减毒活疫苗研究进展 被引量:4 2021年 全球消灭脊髓灰质炎行动(GPEI)于2016年4月调整脊髓灰质炎疫苗免疫接种战略,将三价口服脊髓灰质炎疫苗(tOPV)转换为二价口服脊髓灰质炎疫苗(bOPV),并在全球全面撤出Ⅱ型口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(OPVⅡ)。然而在OPVⅡ撤出以后,亚洲和非洲多地暴发Ⅱ型循环疫苗衍生脊髓灰质炎病毒(cVDPVⅡ)。为了彻底消灭脊髓灰质炎病毒,GPEI于2010年启动研发新型Ⅱ型口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(nOPVⅡ),并于近年开始考虑是否有必要重启OPV。本文概述了OPVⅡ撤出前后cVDPVⅡ的流行病学情况,影响OPV重启的相关因素以及nOPVⅡ相关研究进展。 陈诗怡 李颖 杨净思 尹兴晓关键词:脊髓灰质炎病毒 疫苗衍生脊髓灰质炎病毒 急性弛缓性麻痹 肠道病毒71型与乙型肝炎病毒联合疫苗免疫原性的初步评价 被引量:9 2015年 目的初步评价肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)与乙型肝炎(简称乙肝)病毒(hepatitis B,HBV)联合疫苗中两种抗原之间的相互作用及其免疫小鼠诱导的特异性免疫应答水平。方法将EV71灭活疫苗抗原和重组HBV疫苗抗原(HBs Ag)按常规剂量,采用直接吸附法吸附Al(OH)3佐剂,配制成EV71-HBV联合疫苗,并设单苗组、佐剂对照组和空白对照组(PBS),分别于0、28 d各经腓肠肌免疫BALB/c小鼠1次,于初免后第2、4周和第2剂免疫后第2、4、8周经尾动脉采血,分离血清,采用双抗体夹心ELISA法检测血清中Anti-HBs水平,微量中和试验检测血清中EV71中和抗体效价;并于初免后第3、4周和第2剂免疫后第1、2、4周取小鼠脾脏,分离脾单个核细胞(mononuclear cell,MNC),采用酶联免疫斑点试验(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)检测MNC中抗原特异性IFNγ的分泌水平。结果第2剂免疫后第2周,各疫苗组小鼠血清EV71中和抗体和Anti-HBs阳转率均达100%,各检测时间点疫苗组间抗体效价差异均无统计学意义(P>0.05),佐剂对照组和空白对照组抗体均无阳转。各疫苗组分泌IFNγ的斑点形成细胞(spot forming cell,SFC)数在5个检测时间点有所波动,第2剂免疫后第1周,所有疫苗组IFNγ分泌水平均明显升高,达5个检测时间点的峰值,第2剂免疫后第2周显著下降,但在第2剂免疫后第4周又小幅升高;除第2剂免疫后第2周EV71-HBV联合疫苗组SFC数显著高于EV71单苗组外(P<0.05),其他检测时间点EV71-HBV联合疫苗组与单苗组的SFC数差异均无统计学意义(P>0.05);佐剂对照组和空白对照组的ELISPOT检测结果均为阴性。结论一定剂量的EV71和HBV联合疫苗可诱导小鼠产生良好的体液免疫和细胞免疫应答,两种抗原间未发现相互作用。 陈梦娇 杨晓蕾 刘龙丁 郑惠文 罗娜 尹晓晓 李洪哲 邓燕 李在晗 孙明波 杨净思关键词:肠道病毒71型 乙型肝炎病毒 联合疫苗 体液免疫 细胞免疫 甲型肝炎减毒活疫苗生产中病毒释放的最佳方法探索 被引量:2 2001年 目的 探索甲型肝炎减毒活疫苗 (简称甲肝活疫苗 )生产中感染细胞释放病毒的最佳方法。方法 采用超声波细胞粉碎仪、- 70℃及液氮冻融 3种方法粉碎细胞 ,对细胞破碎情况、病毒抗原滴度和感染性滴度进行了比较。结果 超声波连续粉碎 3次 (90秒 /次 )、- 70℃反复冻融粉碎 4次和液氮冻融粉碎 6次 ,细胞破碎率分别为 94%、82 %和 81% ;病毒抗原滴度和感染性滴度均达高峰 ;抗原滴度均为 1∶2 5 6 ,感染性滴度 (logCCID50 /ml)分别为 8 6 7、6 5和 6 0。继续超声和 -70℃冻融粉碎细胞 ,病毒抗原滴度和感染性滴度基本不变 ,而液氮冻融至第 10次时 ,抗原滴度无明显变化 ,感染性滴度下降2 0logCCID50 /ml。结论 超声波破碎率最高 ,细胞碎片最小 ,病毒充分释放 ,且不损伤病毒 ;- 70℃和液氮冻融破碎率较低 ,细胞碎片较大 ,病毒释放效率低 ,病毒损伤以液氮冻融为重。 杨净思 胡云章 蒋国润 杨晓蕾 柯华昕 杨伟 杨蓉关键词:甲型肝炎 减毒活疫苗 超声波 冻融 婴儿脊灰母传抗体对Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗不同序贯免疫接种程序效果的影响 被引量:5 2018年 目的探讨婴儿脊髓灰质炎(简称脊灰)母传抗体对Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Sabin inactivated poliovirus vaccine,s IPV)与不同剂型脊髓灰质炎减毒活疫苗(oral poliovirus vaccine,OPV)采用不同序贯免疫程序接种效果的影响。方法选取柳州市600名2月龄无脊髓灰质炎疫苗免疫史的常住健康婴儿,分为6个序贯免疫组,其中1剂s IPV+2剂b OPV 2组:s IPV+2b OPV(糖丸)组、s IPV+2b OPV(液体)组;2剂s IPV+1剂b OPV 2组:2s IPV+b OPV(糖丸)组、2s IPV+b OPV(液体)组;2剂s IPV+1剂t OPV 2组:2s IPV+t OPV(糖丸)组,2s IPV+t OPV(液体)组。每组100人。按照0、28、56 d程序,分别在婴儿2、3、4月龄时接种相应疫苗。检测免前、全程免后28 d血清中脊灰中和抗体滴度,计算阳转率及GMT。结果 6个序贯免疫组免前各项指标分布均匀,各型脊灰抗体阳性率、抗体水平及分布均无明显差异。共有518例免前和免后配对血清抗体检测结果的研究对象进入免疫原性分析。s IPV+2b OPV组与2s IPV+b OPV组Ⅱ型抗体、2s IPV+t OPV(糖丸)组Ⅲ型抗体免前阴性和免前阳性者接种疫苗后阳转率差异均有统计学意义;s IPV+2b OPV(糖丸)组Ⅲ型抗体,2s IPV+b OPV(糖丸)组与2s IPV+b OPV(液体)组Ⅱ型抗体,2s IPV+t OPV(糖丸)组Ⅰ、Ⅱ型抗体的免前阳性与免前阴性者接种疫苗后的GMT差异均有统计学意义;2s IPV+t OPV(糖丸)Ⅰ型抗体组与2s IPV+t OPV(液体)Ⅱ型抗体组中,免前8~<32、≥32两种滴度水平的免后GMT差异均有统计学意义。结论脊灰疫苗序贯免疫效果受脊灰母传抗体干扰。 刘小畅 黄腾 车艳春 杨晓蕾 李国良 叶慧 赵志梅 蒋蕊鞠 赵婷 李菁 王俊荣 何俊辉 杨净思 莫兆军关键词:脊髓灰质炎减毒活疫苗 脊髓灰质炎灭活疫苗 母传抗体 一种规模化培养人二倍体细胞制备F基因型腮腺炎减毒活疫苗的方法 本发明涉及疫苗制备技术领域,尤其涉及一种大规模培养人二倍体细胞生产腮腺炎减毒活疫苗的方法。本发明提供了一种大规模培养人二倍体细胞生产腮腺炎减毒活疫苗的方法,包括如下步骤:(1)将人二倍体细胞接种至生物反应器中进行培养;(... 杨净思 王微 王晶晶 平玲 杨振清 邱恒