张俊武
- 作品数:70 被引量:219H指数:8
- 供职机构:中国医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划美国中华医学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 异丁酰胺活化成年小鼠中胚胎εy珠蛋白基因的转录被引量:1
- 2000年
- 实验自己合成的异丁酰胺对小鼠活体内胚胎珠蛋白基因转录的影响。在以每天500~900mg/kg体重的剂量注射15天后,鼠胚胎εymRNA水平可达到未注射对照的3~6倍。受注射小鼠的血红蛋白浓度(HGB)、红细胞计数(RBC)、红细胞压积(HCT)及白细胞计数(WBC)基本上均在正常范围内。受注射家兔的血液钾、钠、氯含量无异常变化,血浆离子渗透压亦保持稳定。这些结果说明异丁酰胺能够有效地在成年小鼠体内作用于早期成红细胞,激活胚胎εy-珠蛋白基因的转录,并且不显示血液学和电解质毒性,进一步证明了其在β-地中海贫血治疗中的潜在价值。
- 张雪青陈平张俊武
- 关键词:毒性实验
- MicroRNA-103在K562红系分化过程中的作用和机制研究
- 微小RNA(MicroRNA)是一类长度约为17-25个核苷酸的非编码RNA分子,它通常在转录后水平调节靶基因的表达。随着越来越多microRNA的发现和功能阐明,microRNA已经公认为真核生物转录后水平的普遍调节方...
- 杨桂花刘晓玲王芳余佳王小爽袁金云张俊武
- 文献传递
- 在Yunnanese(<'A>γδβ)<'O>-地盆缺失3′端点立即下游900bp区发现若干调节蛋白结合基序--可能与<'G>γ珠蛋白基因的再活化有关
- 张雪青张俊武
- 关键词:基因MRNA人肺癌
- 用RACE结合cDNA文库筛选的方法获取新的锌指蛋白基因被引量:22
- 2002年
- 大多数有重要功能的蛋白质都含相应的由保守氨基酸顺序组成的功能结构域。本文首先根据蛋白质功能结构域保守氨基酸序列设计简并引物 ,用PCR方法扩增出基因EST序列 ,再利用改进的快速扩增cDNA末端(RACE)方法从cDNA文库中扩增出基因非同源部位 ,然后以非同源序列为探针 ,筛选cDNA文库。利用此方法成功地从人骨髓cDNA文库中克隆到几个编码锌指蛋白并代表原有EST的新的全长cDNA。这一策略也应适用于筛选编码具有其他序列保守性功能结构域蛋白的基因。
- 杜占文刘立仁张俊武
- 关键词:RACECDNA文库锌指蛋白基因新基因
- 应用简并引物RT-PCR扩增锌指结构域筛选新基因被引量:4
- 2001年
- 目的 应用简并引物RT-PCR扩增并克隆TF-ⅢA型锌指蛋白基因表达序列标签(EST),以最终获得新的锌指蛋白基因。方法分别用TPA和Hemin诱导人红白血病(HEL)细胞,提取总RNA。根据TF-ⅢA型锌指蛋白保守序列设计简并引物,并以之进行RT-PCR扩增,然后将其克隆到pGEM-T easy载体中测序,应用DNAsis软件分析序列并通过GenBank blast进行序列比较。结果克隆并测序了30个扩增片段,22个是锌指蛋白基因的EST,其中17个是新的锌指蛋白基因EST。结论应用简并引物RT-PCR克隆一些具有保守氨基酸顺序结构域的蛋白基因EST是可行的,并具有简便、高效等优点。此外,还可有目的地克隆一些具有重要功能结构域的蛋白质基因。
- 杜占文张俊武
- 关键词:锌指蛋白RT-PCR基因克隆
- 在Yunnanese(Aγδβ)^0—地贫3′缺失端点下游鉴别到两个增强子样顺序被引量:2
- 2002年
- 利用荧光酶报告基因系统搜索了Yunnanese (Aγδβ) 0 地中海贫血缺失 3′端点下游 11 5kb区域内的调控顺序 .确定缺失 3′端点立即下游区 1 7kb片段 ,在人红白血病细胞K5 6 2及鼠红白血病细胞MELGM979中 ,可使γ 珠蛋白基因启动子驱动的荧光酶基因表达增加 3 8~ 4 0倍 ,而在HeLa细胞中仅增加 1 5倍 .位于缺失 3′端点约 10kb的一个长 1 4kb片段在K5 6 2和MELGM979中 ,可使γ 基因启动子驱动的荧光酶基因表达增加 2 4~2 9倍 ,而在HeLa细胞中无增加 .结果说明这两段顺序均有增强子活性 ,并且这种活性具有一定的红细胞特异性 .进一步证明 1 7kb片段内包含多个转录调节蛋白结合模体的 430bp片段包含了 1 7kb片段的大部分增强子活性 .这些结果为缺失导致增强子样顺序并入到接近Gγ 基因 ,是Yunnanese (Aγδβ) 0 地贫缺失突变体中胎儿Gγ 珠蛋白基因 ,在成人期持续活跃表达原因的假设提供了实验证据 .
- 黄小东张俊武
- 关键词:成人胎儿
- miR-196a-5p抑制小鼠胚胎干细胞的自我更新
- 2014年
- 目的研究miR-196a-5p在小鼠胚胎干细胞(m ESC)自我更新中的功能。方法定量PCR法确定miR-196a-5p在m ESC早期分化过程中的表达。在胚胎干细胞中过表达miR-196a-5p类似物,通过集落形成实验、细胞周期分析、碱性磷酸酶染色和Oct4染色确定miR-196a-5p过表达对m ESC自我更新及增殖的影响。结果 miR-196a-5p在m ESC早期分化过程中表达上升(P<0.05),在m ESC中过表达miR-196a-5p类似物后,ESC的集落形成及增殖能力被明显抑制(P<0.01),碱性磷酸酶活性下降,Oct4蛋白水平也出现明显下降。结论 miR-196a-5p具有抑制m ESC自我更新的能力,在m ESC早期分化过程中可能发挥重要作用。
- 赵华路姚南魏雪菊王兰兰张俊武黄粤余佳
- 关键词:小鼠胚胎干细胞自我更新
- miR-24通过靶基因Sp1调控β-类珠蛋白表达被引量:3
- 2013年
- 为了研究miR-24对于珠蛋白表达的调控作用,并明确其作用机制。首先采用定量PCR的方法确定miR-24在红系分化过程中的表达变化情况,以及miR-24过表达后珠蛋白的表达变化情况。进而通过报告基因实验以及Western blotting的方法确定miR-24的靶基因。通过表型回复实验证明miR-24是否通过靶基因调控珠蛋白的表达。结果发现在hemin诱导的K562细胞以及EPO诱导的造血干/祖细胞向红系分化过程中,miR-24表达上调,在K562细胞中过表达miR-24可以促进红系分化过程中ε-和γ-珠蛋白的表达上调,进一步的研究表明miR-24是通过靶基因Sp1来行使对珠蛋白的调控作用的。以上结果表明miR-24通过负调节其靶基因Sp1促进红系分化过程中珠蛋白的表达上调。
- 马艳妮王斌巩蓓王芳赵华路张俊武余佳
- 关键词:珠蛋白SP1红系分化K562细胞
- 锌指蛋白HZF1基因的功能及其应用
- 本发明涉及一个编码蛋白基因的功能及其应用,更具体地,本发明涉及一个锌指蛋白HZF1基因的功能及其在诊断或治疗与HZF1功能相关的红系分化和巨核细胞分化相关的肿瘤、贫血和细胞减少症中的应用。
- 张俊武彭瀚杜占文
- 文献传递
- 人急性髓系白血病小鼠模型的建立
- <正>目的:为了在小鼠体内研究人白血病的发生发展机制,我们构建了人急性髓系白血病小鼠模型。方法:首先通过对NOD/SCID免疫缺陷小鼠进行亚致死剂量的X射线全身照射(剂量为300cGy),随后进行小鼠尾静脉注射人白血病细...
- 林海双宋利张俊武
- 文献传递