吴谨
- 作品数:75 被引量:168H指数:7
- 供职机构:四川大学华西基础医学与法医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金四川省应用基础研究计划项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:医药卫生政治法律生物学自动化与计算机技术更多>>
- 基于Y染色体SNP遗传标记的法医学复合检测试剂盒
- 本发明属于法医遗传学领域,具体涉及一种用于法医个体识别和亲缘关系鉴定的基于Y染色体SNP遗传标记的法医学复合检测试剂盒。本发明要解决的技术问题是实现利用Y染色体SNP遗传标记对人类生物学检材进行法医学亲缘关系鉴定和个人识...
- 侯一平魏蔚颜静罗海玻张霁李英碧吴谨
- STR滑脱模型的构建及其影响因素被引量:4
- 2006年
- 目的探索建立体外STR滑脱模型,研究STR滑脱产生的影响因素,探讨STR的发生机制。方法首先通过全基因组扩增技术—简并寡核苷酸引物PCR(Degenerateoligonucleotide-primedPCR,DOP)对模板DNA样本进行扩增放大,然后以其产物作为后续STR分析的模板,对以上实验过程中的一系列实验条件进行控制,观察滑脱现象的产生情况。结果初步建立了STR的滑脱模型,观察到了STR滑脱现象的发生。结论STR的发生是一系列综合因素作用的结果,DNA模板用量、MgCl2的浓度、DNA聚合酶的性质、样本以及STR的基序组成等因素均可能参与了这一过程。
- 邓建强李英碧吴谨侯一平
- 关键词:短串联重复滑脱
- 成都汉族D2S2944和D1S2134的遗传多态性和种属特异性研究被引量:3
- 2004年
- 目的 获得中国成都地区汉族群体中短串连重复序列 (STR) D2 S2 94 4与 D1S2 134两个位点的多态性分布资料和评价它们在法医学上的应用。方法 用 PCR、聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染技术 ,对 12 0个成都汉族无血缘关系的个体进行分析 ,并选择猴、猪、狗、牛、羊、鸡、鸭、鱼、猫、兔、豚鼠、家鼠、鳝鱼、蛙 14种常见的动物作为种属特异性评价的对照样本 ,对这两个位点进行种属特异性评价。结果 发现 D2 S2 94 4有 8个等位基因 ,2 2种基因型 ,观察杂合度 (h)为 0 .82 4 ;个体识别率 (DP)为 0 .92 5 ;多态信息含量 (PIC)为 0 .78;非父排除率 (EP)为 0 .6 4 4 ;D1S2 134有 10个等位基因 ,2 6种基因型 ;h为 0 .76 9;DP值为 0 .92 0 ;PIC为 0 .79,EP值为 0 .5 4 3;基因型分布经过相关软件分析 ,符合 Hardy- Weinberg平衡定律。通过种属特异性的评价发现 D2 S2 94 4与 D1S2 134具有较好的人类种属特异性。结论 D1S2 134和 D2 S2 94 4位点多态性好 ,非父排除率和个人识别率高 ,种属特异性好 ,可作为法医学亲子鉴定和个人识别的候选标记 ,且方法简便、可靠 ,重复性好。
- 周雪平李英碧张伟娟贾政军侯一平吴谨
- 关键词:短串联重复多态性种属特异性
- 6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光分析体系的构建被引量:2
- 2006年
- 目的 为在310基因分析仪上进行6FAM—HEX—TMR—ROX四色荧光STR复合扩增分型建立基础条件。方法 以pGEM载体作为靶DNA,设计引物扩增获得500~80bp的13个长度不等DNA片段,以这些片段纯化物作为模板DNA,分别扩增获得6FAM、HEX、TMR和ROX标记的Matrix标准物,用4种Matrix标准物在310基因分析仪上构建可用于6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光分析的Matrix文件。结果 扩增所得的13个非标记片段,长度分别为80、100、120、140、160、180、200、220、260、300、340、400、500bp,在非变性聚丙烯酰胺凝胶连续电泳-银染凝胶上均表现为单条带,6FAM、HEX、TMR、ROX分别标记的片段通过310基因分析仪检测均为单峰。混合ROX标记的80、120、180、220、260、300bp的6个片段获得的内标,显示出良好的线性关系。结论 建立了有效的6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光分析Matrix,为进行多个STR基因座荧光标记复合扩增检测奠定了基础。
- 刘莉吴谨侯一平张霁戴浩霖廖淼张林陈国弟李英碧
- 关键词:法医物证学荧光分析内标
- 应用复合诱导突变分离PCR法检测mtDNA的单核苷酸多态性
- 2007年
- 目的 应用复合诱导突变分离PCR(multiplexed mutagenically separated PCR,MS-PCR)技术、银染分型,建立线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)编码区单核苷酸多态(single nucleotide polymorphism,SNP)分型系统,探讨其应用价值。并调查了成都汉族群体mtDNA编码区4个SNP基因座等位基因频率和单倍型分布情况。方法 根据SNP基因座(C12705T、A8701G、G8584A、C10400T)设计两条片段相差4个碱基的等位基因特异性引物和一条公共引物,4个SNP基因座复合扩增,PCR产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染显带后确定样本的基因型。结果不同SNP基因座为长度不同的单一谱带,其分型结果与直接测序一致。在成都汉族160名无关个体中,4个SNP基因座C12705T、A8701G、G8584A、C10400T等位基因频率分别为0.3813/0.6187、0.4813/0.5187、0.8250/0.1750、0.4938/0.5062;共检出6种单倍型,单倍型的基因多样性为0.7137。结论 建立的MMS-PCR银染分型系统是一种简单、快速、准确、有效的SNP分型方法,对建立mtDNA编码区SNP数据库,研究群体遗传学、进化学和进行法医学个人识别和亲子鉴定有重要意义。
- 冉鹏李英碧颜静张蓓蕾张霁单华鑫叶志鹏侯一平张林廖淼吴谨
- 关键词:线粒体DNA单核苷酸多态汉族
- Y染色体复合扩增银染试剂盒
- 一种Y染色体复合扩增银染试剂盒,其特征是由分离包装的短引物YPA、短引物YPB、缓冲液(无MgCl<Sub>2</Sub>)、DNA聚合酶、MgCl<Sub>2</Sub>、A基因座长引物YPA-A-P1和A基因座长引物...
- 侯一平李英碧应斌武冀强董建国吴谨张霁
- 文献传递
- 用荧光标记短串连重复复合扩增技术监测骨髓移植存活被引量:1
- 2007年
- 目的探讨荧光标记短串联重复(STR)复合扩增技术监测骨髓移植存活的价值,为观测骨髓移植疗效提供可靠方法。方法用荧光标记引物对D12S391、D18S865、D20S161这3个STR位点进行PCR复合扩增,用ABI310遗传分析仪对扩增后产物进行分离和分型,并对56例移植后病人做移植物存活鉴定检测。结果有52例移植后病人的3个STR位点的分型完全表现供者源性,与受者移植前不同;4例表现为供/受体干细胞混合嵌合状态。结论荧光标记STR复合扩增体系特异性强,成本低,个体识别力高,检测灵敏、快速、简便,结合临床判断可作为骨髓移植效果评定的有力指标。
- 叶懿吴谨廖淼王卓罗海玻李英碧
- 关键词:复合扩增骨髓移植嵌合体
- WPY对重症急性胰腺炎大鼠肺内IL-1β mRNA表达的影响被引量:4
- 2004年
- 目的 :观察中药WPY对重症急性胰腺炎 (severeacutepancreatitis,SAP )肺组织内IL 1 βmRNA表达的影响。方法 :SD大鼠 48只随机分为 4组 ,正常对照组、SAP模型组、WPY高 ,低剂量治疗组。采用牛磺胆酸钠胰腺被膜下注射诱导大鼠SAP模型 ,分别于术后 3、6、1 2小时检测血清淀粉酶 ,半定量RT PCR检测肺组织IL 1 βmRNA的表达。 结果 :造模组血清淀粉酶显著升高 ,WPY治疗后血清淀粉酶显著下降 ;正常对照组、造模组和治疗组肺组织均可见IL 1 β的表达 ,造模组较正常对照组表达高 ,且随时间 3、6、1 2h变化肺组织内IL 1 β表达呈递增趋势 ,用WPY后 ,随着药物剂量增加IL 1 β表达呈递减趋势。 结论 :中药WPY可以降低大鼠急性胰腺炎早期 3 ,6,1 2h血清淀粉酶和肺内IL 1 βmRNA的表达 ,从而提示WPY可以减轻细胞因子介导的全身炎症反应。
- 察雪湘周黎明万莉红周雪平吴谨蒋俊明
- 关键词:IL-1ΒMRNA肺内定量RT-PCR检测血清淀粉酶细胞因子介导牛磺胆酸钠
- 分子克隆技术制备4个短串联重复基因座等位基因分型标准物及应用于群体遗传学被引量:7
- 2005年
- 目的短串联重复序列(shorttandemrepeats,STR)分型的准确性和标准性是目前急需解决的关键问题之一,本研究采用分子克隆技术制备优质标准的4个(D1S1676、D2S2735、D11S1977和D22S444)STR基因座等位基因分型标准物,并用于中国成都汉族人群的群体研究,探讨该技术的实用性。方法PCR扩增出4个基因座的各等位基因片段后,将其插入pGEMR-T重组质粒中,DNA测序证实插入片段的大小和结构,等位基因片段按国际标准进行命名后,经转染、扩大培养、扩增及再鉴定后制备出该4个基因座的等位基因分型标准物,进行群体研究。结果这4个基因座的等位基因分型标准物得以大量成功制备,并成功地应用于成都地区汉族群体研究。结论分子克隆技术是制备STR等位基因分型标准物的可靠方法;群体资料显示,D1S1676和D2S2735基因座是一个适合中国成都汉族群体分析和法医学应用的遗传标记,而D11S1977和D22S444基因座在中国成都汉族群体中的应用价值有限。
- 邓建强应斌武石美森颜静贾振军李英碧吴谨张霁侯一平
- 关键词:等位基因分型分子克隆技术基因座汉族群体群体遗传学短串联重复
- 一种21号染色体数目的快速检测方法
- 一种21号染色体数目的快速检测方法,其特征是按以下步骤进行:a.从待检样本中提取样本DNA;b.对样本DNA中的21号染色体上特异性STR位点LFG20、LFG21、LFG24、LFG26、LFG29、LFG33、LFG...
- 侯一平张霁颜静吴谨石美森邓建强
- 文献传递