乔红伟 作品数:47 被引量:182 H指数:7 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 理学 更多>>
我国实验动物微生物、寄生虫检测标准与国外检测情况的比较 实验动物微生物、寄生虫检测标准,是实验动物质量检测的重要指标。是科研及研究的重要保障之一。我国《实验动物微生物、寄生虫检测标准》作为国家强制性法律、法规颁布以来,对我们国家实验动物大、小鼠的质量保证起到了至关重要的作用。... 乔红伟 魏强关键词:实验动物 文献传递 牛蛙(Rana catesbeiana)皮肤cDNA文库的构建与鉴定 被引量:3 2008年 以牛蛙皮肤组织为材料获得总RNA,用偶联Oligo(dT)的磁珠纯化mRNA后,利用含SfiⅠ酶切位点的CDSⅢ引物在逆转录酶的作用下合成cDNA的第1链,以含SfiⅠ酶切位点的CDSⅢ引物和SMART引物,利用LD-PCR合成双链cDNA,双链cDNA经SfiⅠ酶切,通过T4DNA连接酶连接到经过相同酶切的λTripIEx2载体,体外包装后转染E.coliXLI-Blue宿主菌,进行滴度测试和文库扩增。结果构建的牛蛙皮肤cDNA文库原始库容量为1.42×10^6PFU/mL,插入片段长度在0.5~1.5kb,重组率为89.5%,扩增后的文库滴度为1.35×10^9PFU/mL,构建的文库质量符合要求,可用于大规模的功能基因分析。 赵瑞利 韩俊友 李莲瑞 乔红伟 雷连成 胡博 谢芳 刘丽凡 韩文瑜关键词:CDNA文库 牛蛙 抗菌肽 猪霍乱沙门菌疫苗株介导的猪瘟基因疫苗及实验免疫研究 以减毒胞内寄生菌作重组质粒的载体,已成为DNA疫苗的第三种免疫接种方式,为DNA疫苗的研制开辟了更新、更广阔的应用前景。猪霍乱沙门菌弱毒株是预防仔猪副伤寒的高效、安全的疫苗株。用其作载体,将含猪瘟病毒E2抗原蛋白基因的真... 乔红伟关键词:猪瘟病毒 免疫保护试验 文献传递 小鼠脑脊髓炎病毒标准血清制备及间接ELISA检测方法的应用 被引量:1 2009年 目的制备小鼠脑脊髓炎病毒(TMEV)标准血清,建立ELISA检测方法,实现一种病毒多种检测方法的比对研究。方法用TMEV感染3周龄SPF级BALB/c小鼠,制备免疫用抗原。分别在0、7、14d以腹腔注射的方式免疫SPF级6-8周龄BALB/c小鼠,免疫血清用IFA、IEA法进行鉴定;TMEV感染BHK-21细胞,制备EHSA抗原,确定酶结合物、抗原和标准阳性血清的最佳工作浓度,建立TMEVEHSA检测方法,进行敏感性、特异性、重复性和稳定性实验。结果制备TMEV免疫血清,以IFA、IEA测定血清效价分别为1:640和1:320,与痘苗病毒、小鼠肺炎病毒、小鼠肝炎病毒、仙台病毒和呼肠孤病毒-Ⅲ型均无交叉反应;建立了ELISA检测方法,确立了各种试剂的最佳工作浓度,其中酶结合物最佳工作浓度为1:10000,抗原为2.5μg/mL,阳性参考血清为1:200;EHSA检测灵敏度为1:3200。板内特异抗原、正常抗原平均变异系数为4.67%和5.7%,板间为4.39%和7.61%。稳定性实验相对偏差均小于20%。结论本研究制备的TMEV免疫血清可作为血清学检测方法中的标准质控血清;建立的ELISA方法重复性、稳定性好,敏感性和特异性强,可用于小鼠脑脊髓炎病毒血清抗体检测。 谢军芳 佟巍 侯丽波 乔红伟 丛喆 王卫 蒋虹 魏强关键词:标准血清 ELISA 新疆部分地区牛结核病PPD监测与分析 被引量:7 2006年 2001年-2003年对新疆部分地区(巴州、阿克苏、博州、伊犁、昌吉、塔城和石河子)牛结核病用“提纯结核菌素皮内变态反应”进行调查,调查数据用SPSS软件统计建立模型,显示2001年-2003年七地州检测牛只分别为16 793,21 153头和43 951头,阳性率分别为0.46%,0.33%和0.57%。其中,巴州地区阳性率明显偏高。昌吉和石河子地区2001年-2002年保持一个较低的水平,2003年牛结核病的阳性率较前两年升高了1%。 李舵 盛卓君 刘进 彭小玲 乔红伟 陈德坤关键词:牛结核病 ELISPOT方法检测SIVmac239感染猴特异性细胞免疫水平 目的为了完善现有的SIV/恒河猴模型,掌握恒河猴被SIV感染后体内细胞免疫应答状态,为评价HIV疫苗提供方法和数据上的参考,我们测定了SIV感染猴体内病毒特异性的细胞免疫水平。方法实验前选出4只无SIV、STLV、SRV... 王卫 冯育芳 许琰 丛喆 佟巍 蒋虹 乔红伟 涂新明 魏强关键词:IFN-Γ 细胞免疫 文献传递 SARS-CoV细胞空斑试验 被引量:6 2009年 目的建立适用于生物安全三级实验室操作的SARS-CoV空斑试验方法。方法SARS-CoV10倍系列稀释接种Vero-E6细胞,用0.6%琼脂糖覆盖中性红着色(琼脂糖-中性红法)或覆盖1%甲基纤维素,4%甲醛固定,结晶紫染色(甲基纤维素-结晶紫法),空斑计数。结果琼脂糖-中性红法病毒滴度为6.14 Lg pfu/mL,甲基纤维素-结晶紫法病毒滴度为6.57 Lg pfu/mL。结论二种空斑试验方法相比,病毒滴度无明显差异。甲基纤维素-结晶紫空斑试验法形成的空斑比琼脂糖-中性红法清晰、操作简单安全、结果可长期保存。 蒋虹 乔红伟 丛喆 佟巍 魏强关键词:SARS冠状病毒 淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒在实验大鼠中的感染状况 被引量:6 2010年 目的对实验室留存的大鼠血清样本进行淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)抗体检测,调查LCMV在我国实验大鼠中的感染情况。方法依据现行国家标准中规定的免疫荧光试验(IFA)方法对我实验室保存的172份大鼠血清样本(包括48份无级别、100份清洁级和24份SPF级大鼠血清样本)进行LCMV抗体检测。结果无级别大鼠血清样本(n=48)15份阳性,阳性率为33.25%,强阳性样本滴度可达1∶1280;SPF级及清洁级大鼠血清样本全部阴性。结论大鼠可以感染LCMV,实验动物等级标准应增加对大鼠LCMV的检测。 佟巍 乔红伟 魏强 张丽芳 代小伟 刘先菊 王艳荣 刘云波SHIV-KB9感染猴病毒组织分布研究 目的研究当SHIV艾滋病恒河猴模型的血浆病毒载量处于低水平或阴性时,SHIV在宿主组织中的分布情况。方法 SHIV-KB9感染恒河猴2只,定期检测其血浆载量,选取感染18个月后病毒载量为很低水平和阴性时,经安死术后取淋巴... 侯俊 乔红伟 丛喆 王卫 刘秀英 佟巍 蒋虹 涂新明 魏强关键词:病毒载量 文献传递 牛蛙(Rana catesbeiana)蛙皮抗菌肽基因的克隆、测序及其表达 被引量:12 2007年 利用RT-PCR的方法从牛蛙皮肤组织中克隆到大小为270bp的片段RCABP,将其克隆到pGEM-T载体,测序获得1个新的碱基序列。将此基因克隆到原核表达载体pQE-80L,获得融合表达质粒pQE-80L/DHFR/ABP,在1%IPTG诱导下进行表达。SDS-PAGE检测表明,重组蛙皮抗菌肽蛋白的表达量占菌体总蛋白的24%,以包涵体形式存在。体外抑菌试验表明,所构建的质粒能在大肠杆菌中表达具有体外抑菌活性的蛙皮抗菌肽,该融合蛋白具有良好的应用前景。 韩俊友 乔红伟 赵瑞利 胡博 谢芳 王金玲 郑伟 雷连成 韩文瑜关键词:牛蛙 基因表达