华南农业大学兽医学院农业部兽用疫苗创制重点实验室
- 作品数：61 被引量：196H指数：9
- 相关作者：李静怡陈筱薇王文华李娇梁艺瑜更多>>
- 相关机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室南方医科大学检验与生物技术学院更多>>
- 发文基金：国家肉鸡产业技术体系建设专项广东省科技计划工业攻关项目公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 惠阳胡须鸡禽白血病病原学调查及受体基因遗传多态性分析
- 为了解广东省地方品系鸡——惠阳胡须鸡禽白血病(AL)的感染情况以及病毒受体基因遗传多态性,本研究从广东省7个惠阳胡须鸡养殖场共采集抗凝血1728份,经处理后同时接种DF-1细胞和CEF细胞进行病毒分离,共分离出了48个E...
- 陈杨一骏张杰严立福赵子君陈建曹伟胜
- 关键词：禽白血病病原学受体基因遗传多态性
- 种禽场A亚群禽白血病病原学调查及分离株遗传进化分析
- 为了解广东地区种禽场A 亚群禽白血病病毒(ALV-A)流行情况,本研究从A、B、C、D 4 个种禽场共采集1561 份血浆样品,接种DF-1 细胞7d 后,取上清进行p27 抗原ELISA 检测,共检出71 份阳性样品,...
- 冯敏谭利强代曼曼郝建勇秦建如黄小容廖明曹伟胜
- 关键词：种禽场全基因序列
- Ⅱ群禽腺病毒pⅢa基因的原核表达及抗原性分析
- 2013年
- 为了研究Ⅱ型禽腺病毒pⅢa基因的抗原性,试验根据Ⅱ型禽腺病毒火鸡出血性肠炎病毒(HEV)VAS株的全基因序列(GenBank序列号为AY849321.1)设计了1对引物,采用PCR扩增出pⅢa的完整基因,将其连接到质粒表达载体pET-32a(+),获得的阳性克隆命名为pET-32a-pⅢa,再将pET-32a-pⅢa转化至E.coil BL21(DE3),经37℃、1.0 mmol/L IPTG诱导表达5 h,应用SDS-PAGE分析超声裂解后的上清液和沉淀。结果表明:目的蛋白以可溶性蛋白形式存在,蛋白分子质量约为76 ku,目的蛋白具有较好的抗原活性。
- 刘雪美秦建如赵海燕李育豪曹伟胜
- 关键词：原核表达抗原性分析
- P13K/AKT信号转导通路在ALV-J感染中作用的初步研究
- 为探讨ALV-J在宿主细胞中复制与P13K/AKT信号转导通路的关系，将血管瘤病变型ALV-J毒株HN06和骨髓瘤病变型ALV-J毒株NX0101分别感染DF-1细胞，通过WESTERN BLOT和REAL-TIMEPC...
- 关键词：J亚群禽白血病病毒P13K/AKT
- 文献传递网络资源链接
- J亚群禽白血病病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量：8
- 2013年
- 本研究利用J亚群禽白血病病毒(subgroup J avian leukosis virus,ALV-J)gp85单因子血清纯化后的抗体成功建立了检测ALV-J抗原的双抗体夹心ELISA方法(DAS-ELISA)。结果表明,该方法具有良好的特异性、重复性和稳定性,对ALV-J抗原的最小检出量为0.165μg/mL。用该法对48份临床血浆样品进行检测,结果与PCR方法的符合率达到85.2%。
- 廖亚琳梁艺瑜王秀珑冯敏谭利强曹伟胜
- 关键词：双抗体夹心ELISA
- 不同样品对黄羽种鸡禽白血病病毒净化检测效果的影响被引量：7
- 2015年
- 【目的】评估黄羽种鸡禽白血病的净化工作,比较源于同一鸡群不同样品对禽白血病病毒（ALV）检测结果的影响.【方法】采用ALV抗原ELISA方法对广东一黄羽种鸡场采集的2 691枚种蛋进行检测,根据检测结果采集其中70份不同S/P区间所对应的母鸡抗凝血,分离血浆后分别同时接种于CEF和DF-1细胞,用病毒分离方法进行检测,并用PCR方法进行亚群鉴定.【结果和结论】从送检种蛋蛋清共检出ALV p27阳性样品243份,阳性率为9.03%（243/2 691）;蛋清不同ELISA S/P区间所对应的病毒分离情况分别为：蛋清ELISA S/P≥2.0的鸡只其血样CEF和DF-1细胞病毒分离率均为100%;1.5≤S/P〈2.0的鸡只病毒分离率均为88.9%;1.0≤S/P〈1.5的鸡只病毒分离率均为85.7%;0.2≤S/P〈1.0的鸡只病毒分离率分别为60%-75%（CEF）和40%-50%（DF-1）;0.1≤S/P〈0.2的鸡只病毒分离率为62.5%（CEF）和50%（DF-1）;S/P〈0.1的鸡只分别为27.2%（CEF）和9.1%（DF-1）的病毒分离率.PCR结果显示,所有7份CEF＋DF-1-的CEF培养物中有6份为内源性ALV-E.研究表明,在蛋清ELISA检测时,S/P越高的阳性蛋清样品其对应母鸡越可能是外源性ALV病毒血症阳性;有一定比例S/P较低的阳性蛋清样品是由对应母鸡体内的内源性ALV排毒所致;而净化初期少数蛋清S/P为阴性的蛋清,其对应母鸡仍可能检出外源性ALV,说明在黄羽种鸡外源性ALV净化方案中单独使用1次蛋清ELISA检测可能会给禽白血病的净化检测造成一定的“误诊”和“漏检”.
- 郝建勇秦建如邱倩倩袁丽霞饶明章廖明曹伟胜
- 关键词：黄羽种鸡禽白血病病毒病毒检测
- 两株H6N2亚型鸡源禽流感病毒的分离鉴定被引量：2
- 2012年
- 本研究利用血凝抑制试验(HI)、反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、基因测序等方法,对广东省某活禽交易市场进行流行病学调查时获得的两株非H5、H9亚型禽流感病毒65株和C7株进行了亚型鉴定。结果表明这两株病毒均具有血凝活性,且能被抗H6亚型禽流感病毒标准阳性血清特异性抑制。用针对禽流感病毒的M基因、H6亚型禽流感病毒HA基因、N2亚型禽流感病毒NA基因特异性鉴定引物对65株和C7株进行RT-PCR扩增,分别获得特异性目的片段。测序及BLAST分析表明两株分离株与H6N2亚型禽流感广东分离株的HA基因和NA基因核苷酸序列相似性均高达95%以上。将该两分离株鉴定为H6N2亚型禽流感病毒,并命名为A/Chicken/Guangdong/65/2009、A/Chicken/Guangdong/C7/2009。
- 贾宝琴焦培荣韦良孟单芬袁润余徐成刚廖明
- 关键词：禽流感病毒
- 副猪嗜血杆菌外膜蛋白P2的提取及鉴定
- 2014年
- 为简化副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)外膜蛋白中的单一蛋白外膜蛋白P2(OmpP2)的分离步骤,降低膜蛋白分离的设备要求,本试验用Hps标准3型(SW114)、5型(Nagasaki)菌株作为试验材料,选用溶菌酶、核酸酶对Hps进行酶解以获得其完整外膜,然后利用含有2%tritonX-100缓冲液对外膜进行进一步解离,最后利用适量浓度的胰酶对强疏水蛋白进行酶解,实现了Hps高纯度OmpP2的体外快速提取。SDS-PAGE结果显示,上述2株菌OmpP2大小分别约为43和38ku;基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-TOF)鉴定结果显示,从上述蛋白酶解下来的肽段经比对与Hps的OmpP2完全吻合。斑点杂交(Dot-blot)显示采自Hps患病猪血清在点有5型菌株(Nagasaki)OmpP2和点有3型菌株(SW114)OmpP2NC膜上均发生杂交显色反应,该结果暗示OmpP2是一个具有免疫活性的抗原。本研究为OmpP2功能及免疫保护性研究奠定了基础,也为副猪嗜血杆菌病免疫学诊断提供新的参考。
- 罗银珠徐成刚周素明冯赛祥贺现辉樊惠英廖明辛朝安
- 关键词：副猪嗜血杆菌
- 两株H6N2亚型鸡源禽流感病毒的分离鉴定
- 本研究利用血凝抑制试验(HI)、反转录—聚合酶链式反应(RT—PCR)、基因测序等方法，对广东省某活禽交易市场进行流行病学调查时获得的两株非H5、H9亚型禽流感病毒65株和C7株进行了亚型鉴定.结果表明这两株病毒均具有血...
- JIA Baoqin贾宝琴JIAO Peirong焦培荣WEI Liangmeng韦良孟SHAN Fen单芬YUAN Runyu袁润余XU Chenggang徐成刚LIAO Ming廖明
- 关键词：核苷酸序列
- galU和galE基因敲除对副猪嗜血杆菌脂寡糖分子质量的影响被引量：1
- 2013年
- 副猪嗜血杆菌所引起的疾病每年给全世界养猪业造成巨大的经济损失,但是其毒力因子和致病机制仍不清楚。galU(编码UDP-葡萄糖焦磷酸化酶)和galE(编码UDP-半乳糖-4’-异构酶)是与多糖合成相关的2个基因,为了解它们的缺失对副猪嗜血杆菌脂寡糖分子质量的影响,利用热酚法抽提脂寡糖,经过SDS-PAGE和银染。结果显示,galU和galE的缺失导致脂寡糖的泳动速度明显加快,表明这两个基因与脂寡糖的分子质量密切相关。
- 李静怡徐成刚冯赛祥贺现辉邹易廖明
- 关键词：副猪嗜血杆菌脂寡糖GALE
