贵州医科大学基础医学院
- 作品数：1,031 被引量：2,557H指数：18
- 相关作者：陈汉彬王菲孟立科张姝彭传林更多>>
- 相关机构：中国中医科学院中医药信息研究所武汉大学人民医院同济大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科技计划项目贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 基于Met/PI3K/Akt信号通路研究五味子甲素对人鼻咽癌细胞HONE-1增殖、迁移和侵袭的影响被引量：5
- 2020年
- 目的:研究五味子甲素对人鼻咽癌细胞HONE-1增殖、迁移和侵袭的影响及其可能机制。方法:以HONE-1细胞为研究模型,使用不同浓度[0(空白对照)、10、20、40μmol/L]的五味子甲素处理后,分别采用CCK-8试验、划痕试验和Transwell小室试验检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力变化;通过计算机分子对接分析五味子甲素与酪氨酸蛋白激酶(Met)蛋白的结合能力;采用Western blotting法检测细胞中磷酸化酪氨酸蛋白激酶(p-Met)、磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)的相对表达量。结果:与空白对照比较,10、20、40μmol/L五味子甲素处理后细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著减弱(P<0.05);分子对接结果显示,五味子甲素能与Met蛋白的活性口袋稳定结合;Western blotting试验结果显示,与空白对照比较,10、20、40μmol/L五味子甲素处理后细胞中p-Met、p-PI3K、p-Akt、Bcl-2和N-cadherin蛋白的相对表达量均显著降低(P<0.05)。结论:五味子甲素可通过抑制Met/PI3K/Akt信号通路的活化来抑制HONE-1细胞的增殖、迁移和侵袭。
- 陈腾祥梁黎曾智锐雷珊王婧雅孙远梅兰金芝薛燕
- 关键词：五味子甲素增殖酪氨酸蛋白激酶
- 中脑腹侧被盖区SIRT1过表达对海洛因依赖小鼠学习记忆和突触结构可塑性的影响
- 2024年
- 目的探讨中脑腹侧被盖区(VTA)过表达沉默信息调节因子1(SIRT1)对海洛因依赖小鼠学习记忆能力和突触结构可塑性的影响。方法42只C57BL/6J小鼠分为生理盐水对照组(SCG组,n=14)、海洛因依赖组(HDG组,n=14)以及SIRT1过表达海洛因依赖组(SIRT1-OE+H组,n=14),后两组采用逐日递增注射海洛因液体建立海洛因依赖小鼠模型,SIRT1-OE+H组需先VTA注射rAAV9-rSIRT1腺相关病毒;观察小鼠条件位置偏爱(CPP)及Morris水迷宫(MWM)学习记忆行为;转染rAAV9-rSIRT121 d时,透射电镜观察VTA脑区突触超微结构,蛋白质印迹(Western blot)检测小鼠VTA脑区突触可塑性相关蛋白的表达。结果CPP试验中,与SCG相比较,HDG组小鼠在伴药箱中停留延长、CPP评分增高,SIRT1-OE+H组改变更加显著(P<0.05);MWM的定位航行试验结果显示,第4天和第5天,SIRT1-OE+H组逃避潜伏期延长(P<0.05);空间探索试验结果显示,HDG与SIRT1-OE+H组小鼠穿越平台次数增多(P<0.05),但目标象限停留时间比率、目标象限路程比率差异无统计学意义(P>0.05);透射电镜结果显示,HDG和SIRT1-OE+H组突触后膜致密物增厚,突触界面曲率增大;Western blot结果显示SIRT1-OE+H组中突触素(Syn)、突触后致密区蛋白95(PSD95)、生长相关蛋白43(Gap43)表达较SCG明显增多(P<0.05)。结论SIRT1参与了海洛因依赖过程,其机制可能是SIRT1过表达增强了突触可塑性,促进了海洛因引起的奖赏效应,但SIRT1对空间学习记忆能力的影响不显著。
- 马旋谭雨维刘美君郑欣雅赵传睿尹丹王茜李豪夏白娟
- 关键词：中脑腹侧被盖区突触可塑性海洛因
- 基于整合生物标志物响应指数分析磷石膏渗滤液对斑马鱼鳃和肠道组织的毒性效应
- 2024年
- 目的探讨以整合生物标志物响应(IBR)指数分析磷(P)化工区P石膏渗滤液对斑马鱼鳃和肠道组织的毒性作用。方法600尾斑马鱼随机均分为对照(充分曝气的自来水)组和不同浓度(0.052%、0.104%及0.208%)P石膏渗滤液(采自某磷化工区P石膏渗滤池)组,暴露28 d,分别于第7、14、21及28天分批麻醉处死,取鳃和肠道组织制备组织匀浆液,检测各组斑马鱼鳃和肠道组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性及丙二醛(MDA)的含量,计算IBR指数综合评价不同浓度P石膏渗滤液对斑马鱼的毒性效应。结果暴露第7天时,与对照组比较,0.052%组斑马鱼鳃组织SOD和GPx活性增加且肠道组织GPx活性下降(P<0.05),0.104%组斑马鱼鳃组织SOD和GPx活性及MDA含量增加且肠道组织SOD和GPx活性下降(P<0.05),0.208%组斑马鱼鳃组织SOD、CAT、POD活性及MDA含量增加且肠道组织SOD和POD活性下降、CAT活性和MDA含量增加(P<0.05);暴露第14天时,与对照组比较,0.052%组斑马鱼鳃组织GPx活性增加(P<0.05),0.104%组斑马鱼鳃组织CAT、POD、GPx活性增加且肠道组织SOD、CAT、POD、GPx活性及MDA含量增加(P<0.05),0.208%组斑马鱼鳃组织SOD活性下降和GPx活性、MDA含量增加且肠道组织CAT活性增加(P<0.05);暴露第21天时,与对照组比较,0.052%组斑马鱼鳃组织POD活性下降且肠道SOD、CAT活性下降(P<0.05),0.104%组斑马鱼鳃组织SOD活性和MDA含量增加且肠道组织CAT活性下降(P<0.05),0.208%组斑马鱼肠道组织CAT、POD活性下降(P<0.05);暴露第28天时与对照组比较,0.052%组斑马鱼鳃组织CAT活性增加且肠道SOD、POD及GPx活性增加(P<0.05),0.104%斑马鱼鳃组织SOD活性增加且肠道组织SOD、CAT活性增加(P<0.05),0.208%组斑马鱼鳃组织SOD、CAT、GPx活性增加且肠道组织CAT、GPx活性增加(P<0.05);0.052%、0.104%及0.208%组斑马鱼鳃组织IBR指数均于暴露第14天达到最低,0.052%�
- 刘龙郭子毓王敏潘莎王涛
- 关键词：磷石膏肠道
- 幽门螺杆菌临床标本的最佳运送条件及最适培养基的实验研究
- 目的:探索幽门螺杆菌临床标本的最佳运送条件和最适培养基.方法:将实验菌株加入小牛血清、牛奶运送液,分别置不同温度及气体环境6h后接种于哥伦比亚血琼脂微需氧培养;将20例临床标本分别接种于MH和哥伦比亚血琼脂微需氧培养5天...
- 王琼杨杰潘科黄亚琴陈峥宏王菲綦廷娜
- 白纹伊蚊雌蚊唾液腺匀浆血小板聚集抑制与抗凝血活性的探讨被引量：1
- 2018年
- 本文旨在探讨白纹伊蚊Aedes albopictus唾液腺匀浆粗蛋白(salivary gland extract,SGE)血小板聚集抑制和抗凝血活性,为后续单个唾液蛋白在蚊虫吸血中的功能研究奠定基础。采用比浊法检测低、中、高浓度SGE在不同血小板聚集激活剂作用下对人血小板聚集活性的影响,手工法检测不同浓度SGE对人全血部分凝血活酶时间,凝血酶原时间,凝血酶时间的影响。结果显示,低浓度SGE对Ⅰ型胶原诱导的血小板聚集有显著抑制作用,随着浓度升高具有明显的量效关系,最高抑制率可达90. 36%;高浓度SGE对凝血酶诱导的血小板聚集具有显著抑制作用。SGE对ADP诱导的血小板聚集无明显抑制作用。SGE对人血浆APTT、PT、TT均有延迟效应,1. 25 ng/m L SGE即对TT有显著延迟效应。研究结果表明,白纹伊蚊SGE不仅对胶原诱导的血小板聚集有明显的抑制作用,而且可作用于血液级联凝集全过程。
- 李世琪闫妍翟慧王政艳程金芝吴家红
- 关键词：白纹伊蚊血小板聚集抗凝血
- 贵州2起麻疹暴发疫情病毒分离株基因特征分析被引量：2
- 2016年
- 目的对2014年11月—2015年3月贵州发生的2起麻疹暴发疫情病毒分离株进行基因特征分析。方法采集暴发麻疹病例咽拭子标本，经Vero/SLAM细胞分离培养，从阳性培养物中提取病毒RNA，用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增麻疹病毒核蛋白（N）基因，对扩增产物进行测序与分析。结果2起麻疹暴发共分离到11株麻疹病毒野毒株，均为H1基因型中的H1a基因亚型；进化树分析有2个明显的分支。11株暴发麻疹病毒与H1a基因亚型参考株Chin9322的核苷酸和氨基酸遗传距离差异分别为1.1%～1.6%和0.7%～3.4%。推导出氨基酸序列与参考株Chin9322及近年来贵州流行株比较，结果显示有6株在主要位点[47（G-S）、82（S-G）、122（R-K）]发生变异；2株在位点98（P-L）发生变异。结论H1a基因亚型麻疹病毒是引起2014—2015年贵州省2起麻疹疫情的主要病原，也是贵州省以及全国本土流行的优势基因亚型；且多个不同的H1a基因亚型病毒传播链在贵州省持续流行。本研究为贵州省麻疹的控制和消除提供了一定的基础资料。
- 唐小敏张丽叶绪芳任刚左丽
- 关键词：麻疹病毒基因型
- 埃及伊蚊丝氨酸蛋白酶抑制剂23的基因克隆表达与多克隆抗体制备
- 2017年
- 埃及伊蚊serpin23(丝氨酸蛋白抑制剂23)在雌蚊唾液腺特异高表达,是蚊虫唾液组分的主要蛋白之一。本文设计特异性引物序列,采用RT-PCR技术扩增获得埃及伊蚊广东电白株serpin23成熟肽序列,构建重组表达质粒pET-28a(+)-serpin23并测序验证。经IPTG诱导表达、KCl染色、切胶纯化获取了目的蛋白;制备了小鼠特异性抗serpin23蛋白多克隆抗体。结果显示:获得serpin23成熟肽序列,全长1 197bp,编码399个氨基酸。等电点pI为6.13,具有serpin结构域和一个功能未知的FAINT结构域。pET-28a(+)-serpin23重组质粒可表达了大小约为47 kDa、以包涵体表达为主的融合蛋白。Western Blot结果证明serpin23重组蛋白可以与抗-His标签和抗-serpin23抗体发生免疫反应,约47 kDa处产生特异性条带。本研究成功获得了埃及伊蚊广东电白株serpin23重组表达蛋白和抗serpin23多克隆抗体,为后续功能研究奠定基础。
- 翟慧王政艳吕清巧程金芝李世琪杨茜商正玲吴家红
- 关键词：埃及伊蚊克隆表达WESTERNBLOT
- 巨噬细胞与单核细胞的细胞骨架调控相关的差异基因表达被引量：2
- 2019年
- 目的:分析单核细胞(Mo)向巨噬细胞(Mφ)分化的过程中,细胞骨架的调控相关基因及信号通路的表达变化。方法:CEO数据库获得Mo和Mφ的芯片数据,经RStudio软件分析获得差异表达基因(DEGenes),利用STRING在线工具对DEGenes构建蛋白质相互作用网络(PPI),Cytoscap软件筛选出DEGenes的核心模块;对筛选出的DEGenes的核心模块进行GO和KEGG分析。结果:Mφ相对于Mo的差异表达基因共476个,主要涉及的信号通路包括NOD样受体信号通路和吞噬体信号通路,这些通路中CCL18、CXCL8和C3等相关基因与细胞骨架的调控密切相关。结论:Mo向Mφ分化过程中细胞骨架调控相关基因的表达发生了显著改变。
- 宋咏刚胡文慧余鹏石玉玲石玉玲胡祖权赵雪胡祖权
- 关键词：巨噬细胞单核细胞细胞骨架生物信息学基因芯片
- 川芎嗪防治大鼠脑缺血/再灌注损伤后炎症反应与细胞凋亡的作用被引量：12
- 2021年
- 目的探讨川芎嗪(TMP)防治大鼠炎症反应与细胞凋亡的作用机制。方法选取180只健康雄性SD大鼠,将其随机分为假手术组(sham)、脑缺血/再灌注损伤组(CIRI)、尼莫地平组(N)和TMP组,TMP再分为低剂量组(L)、中剂量组(M)和高剂量组(H) 3个亚组,CIRI组采用改良线栓法制备CIRI模型;TMP各组于术前30 min分别尾静脉注射5 mg/kg、10 mg/kg和30 mg/kg TMP进行干预,N组尾静脉注射尼莫地平(1 mg/kg),sham组和CIRI组给予等剂量的生理盐水。各组SD大鼠于构建CIRI模型苏醒后立即进行神经功能缺损评分,同时各组再灌注24 h进行2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色、苏木精-伊红(HE)染色及尼氏(Nissl)染色检测顶叶皮质缺血半暗带形态变化;ELISA检测顶叶皮质白细胞介素(IL)-1β及IL-8的表达,TUNEL检测顶叶皮质中的神经细胞凋亡,免疫荧光染色法检测β-catenin的阳性细胞在顶叶皮质表达,Western blotting检测顶叶皮质Bax和Bcl-2的表达。结果与sham组相比,CIRI组神经功能缺损评分显著增高(P<0.01),HE与Nissl染色见神经细胞肿胀变性,部分呈空泡样改变,细胞核固缩深染,神经元数量减少(P<0.01),尼氏体数量显著减少(P<0.01);炎症因子IL-1β和IL-8的浓度显著上升(P<0.01),凋亡细胞与β-连环蛋白(β-catenin)阳性细胞及其平均吸光度值均显著增多、增高(P<0.01);Bcl-2蛋白表达下降,而Bax蛋白表达显著增加(P<0.01)。与CIRI组比较,N组及TMP干预组大鼠的神经功能缺损评分降低(P<0.01),HE及Nissl染色发现大神经元水肿减轻,少许神经元被破坏,神经元数量增多(P<0.01),尼氏体数增多(P<0.01);炎症因子IL-1β和IL-8浓度显著下降(P<0.01),凋亡细胞与β-catenin阳性细胞及平均吸光度值均显著减少(P<0.01);Bcl-2蛋白表达增加,而Bax蛋白表达显著下降(P<0.01);与N组比较,随着TMP浓度的递增,神经功能、炎症反应与神经元病理变化呈现量效关系(P<0.05)。结论 TMP干预处理后可以减轻�
- 谢明钟朕欧阳训彦郑延益朱俊德
- 关键词：川芎嗪脑缺血再灌注损伤Β-连环蛋白免疫印迹法
- 基于AKT-HK2-NF-κB信号通路的辣椒素对CIA大鼠的作用机制
- 2024年
- 目的探讨辣椒素(CAP)对大鼠类风湿性关节炎(RA)蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(AKT)/己糖激酶2(HK2)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的作用及机制。方法SD大鼠尾根部皮下注入牛Ⅱ型胶原与弗氏完全佐剂的乳化剂,构建胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠模型作为模型组,空白组大鼠尾根部注入等体积的生理盐水;将造模成功的SD大鼠随机分为CAP低、中、高剂量组(CAP剂量分别为1、2、3 mg/kg)以及阳性对照组(雷公藤剂量为40 mg/kg),于造模成功2周后灌胃3周,空白组与模型组灌胃等量生理盐水;造模前后及给药期间测量大鼠足肿胀程度,给药3周取大鼠踝关节切片、HE染色观察组织学变化,Western blot检测大鼠关节滑膜组织AKT、HK2、NF-κB的表达,RT-qPCR检测AKT、HK2、NF-κb mRNA的表达,ELISE检测大鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)含量。结果与模型组相比,CAP高剂量组大鼠右后足AI评分降低(P<0.05),大鼠足肿胀度减轻(P<0.05);与阳性对照组相比,CAP高剂量组大鼠右后足AI评分及大鼠足肿胀度差异无统计学意义(P>0.05);HE染色显示,与空白组相比,模型组大鼠踝关节区滑膜出现增生,软骨下骨质结构破坏,同时伴有炎性细胞的浸润和滑膜血管翳的侵袭;与模型组相比,阳性对照组及CAP各组大鼠在进行药物干预后,关节滑膜组织增生均得到不同程度的抑制,且CAP高、中剂量组大鼠关节滑膜组织内浸润的炎症细胞以及新生血管数均有所减少;与模型组比较,阳性对照组和CAP高剂量组IL-6含量降低(P<0.05);与模型组大鼠比较,CAP高、中剂量组及阳性对照组大鼠滑膜组织AKT、HK2、NF-κB mRNA及蛋白表达水平下降(P<0.05)。结论高剂量CAP可减轻RA大鼠踝关节的炎症反应,其机制可能与抑制AKT-HK2-NF-κB通路相关蛋白及降低血清IL-6水平有关。
- 郑云松皮浩吕何子晗雷欢欢马书怡吴宁吴遵秋
- 关键词：辣椒素蛋白激酶B
