军事医学科学院军事兽医研究所全军基因工程重点实验室 作品数:157 被引量:262 H指数:8 相关作者: 张立树 刘玉生 贾鹏 张钰 牟伟峰 更多>> 相关机构: 吉林大学畜牧兽医学院 吉林大学农学部 暨南大学生命科学技术学院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 吉林省科技发展计划基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 理学 更多>>
联合应用新城疫病毒及其HN基因对小鼠Lewis肺癌抑制效应研究 自从20世纪50年代Caslary发现新城疫(Newcastle disease,ND)病毒使农场主晚期胃癌的转移受到抑制以来,新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)的抗肿瘤作用一直被人们所... 李霄 金宁一 连海 陈立刚 管国芳 孙丽丽关键词:新城疫病毒HN基因 LEWIS肺癌 抑癌 文献传递 Apoptin对肝癌细胞的体内、外抑制效应 2009年 目的:探讨Apoptin对人肝癌细胞株HepG-2及C57BL/6小鼠H22移植瘤的抑制作用。方法:应用脂质体转染法将重组质粒pVAX1-Apoptin转染HepG-2细胞,应用Western blotting检测Apoptin蛋白在转染后HepG-2细胞中的表达,应用MTT检测Apoptin对HepG-2细胞生长的抑制作用,通过AO/EB染色法检测pVAX1-Apoptin致肿瘤细胞凋亡作用。建立C57BL/6小鼠H22荷瘤模型,瘤内注射pVAX1-Apoptin,观察pVAX1-Apoptin对体内肿瘤的抑制作用。结果:Apoptin基因可在HepG-2细胞中有效表达,pVAX1-Apoptin能够诱导HepG-2细胞凋亡,并显著地抑制其生长,48h抑制率为69.28%。pVAX1-Apoptin瘤内注射能够有效抑制移植肿瘤的生长,抑制率为46.71%;治疗后39d小鼠生存率为40%,显著高于对照组(P<0.05)。结论:Apoptin转染可抑制HepG-2细胞的生长,重组质粒pVAX1-Apoptin瘤内注射对移植肿瘤有显著的抑制作用。 刘立明 金宁一 李霄 田明尧 杨恩成 刘妍 赵翠青 张金双 钱爱东关键词:肝肿瘤 APOPTIN HEPG-2 增殖 凋亡 O型口蹄疫病毒O/LZ株基因组全长cDNA的构建 被引量:1 2006年 目的构建O型口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)O/LZ株基因组全长cDNA。方法根据FMDV基因组和克隆载体的限制性内切酶酶切位点,将FMDV基因组设计为4段,进行反转录和扩增(RT-PCR),得到的片段分别克隆到质粒pMD18T-vetcor,筛选阳性重组质粒,测序正确的重组质粒(pMD18-S、pMD18-I、pMD18-P1和pMD18-P2)保存备用。然后对S区、I区和P2片段重新设计引物,其中S区的上游引物引入T7启动子序列;I区上游引物引入6个C,下游引物带有FMDV基因组中唯一酶切位点NruⅠ;用于3′端扩增的下游引物引入16个T,并以pMD18-S和pMD18-I为模板,对S区和I区进行融合PCR获得IS,以pMD18-P2为模板对P2片段进行2次PCR,获的带16个T的P3片段。将扩增片段克隆到pMD18T-vetcor,在pBuescriptⅡSK(-)中进行长片段的连接,获得基因组全长cDNA克隆。结果获得O型FMDV O/LZ株全基因组,并在此基础上构建了O/LZ株FMDV全长cDNA。结论成功构建了O型FMDV O/LZ基因组全长cDNA克隆,为进一步获得具有感染性的FMDV分子克隆,并研究该病毒基因组结构和功能奠定了基础。 马鸣潇 金宁一 刘慧娟 沈国顺 金明兰 郑敏 鲁会军 贾雷力 金扩世关键词:口蹄疫病毒 CDNA RT-PCR 基因组 DNA疫苗与亚单位疫苗联合免疫制备马抗SARS-CoV抗体IgG SARS在全球的传播对人类健康和经济发展造成严重危害。2003年底SARS的传播已经被控制,但它可能一直在动物库中循环,随时都有可能再次暴发。而对于一种病毒性疾病,当前最有效的防治方法就是疫苗接种。但是一种疫苗的研制到临... 王瑞琳 金宁一 赵博 金洪涛 贾雷立 金明兰关键词:DNA疫苗 亚单位疫苗 联合免疫 文献传递 载基因壳聚糖纳米粒的制备及免疫增强作用的初步研究 目的制备壳聚糖载基因纳米粒,并对其体外转染效率及其在小鼠体内的免疫增强效果进行初步研究。方法以本课题组构建的口蹄疫DNA疫苗为模型药物,采用复凝聚法制备纳米粒;用透射电镜观察形态;用纳米粒度分析仪测定粒径、多分散度和ze... 计越 金宁一 鲁会军 马鸣潇 金明兰 李旭 刘慧娟 郑敏关键词:壳聚糖 纳米粒 转染 免疫原性 文献传递 HIV-1多表位治疗性DNA疫苗构建研究 @@艾滋病的发生与流行,不仅严重威胁人类生命健康与社会经济稳定持续发展,而且也对科学界提出严峻挑战。最新统计数据表明,全球艾滋病感染人数愈3300多万;我国亦超过80多万;平均每天全球就新增大约6800多名感染者。如此庞... 李昌 李霄 田明尧 申镇维 金洪涛 金宁一关键词:DNA疫苗 艾滋病疫苗 人体临床试验 文献传递 共表达O型口蹄疫病毒P1-2A基因和猪白细胞介素18的重组鸡痘病毒的构建 被引量:4 2006年 目的:为获得能有效预防O型口蹄疫病毒的重组鸡痘病毒活载体疫苗奠定基础。方法:在O型口蹄疫病毒P1-2A基因上游引入Kozak序列,下游通过Linker与细胞因子IL-18联接,获得P1-2A基因与猪IL-18基因融合表达基因盒P1-2A-IL-18,将该表达基因盒克隆至鸡痘病毒中间转移载体pUTAL-3C中,构建重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTAL-3C-P1-2A-IL-18。通过脂质体转染法,将pUTAL-3C-P1-2A-IL-18与鸡痘病毒282E4株共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),通过BrdU三次加压筛选,挑选出单克隆重组病毒株。结果:经RT-PCR和间接免疫荧光法鉴定,证明所筛选的1株重组鸡痘病毒在CEF中能正确表达P1-2A-IL-18基因盒。结论:成功获得了一株共表达O型口蹄疫病毒P1-2A基因和猪白细胞介素18基因的重组鸡痘毒疫苗候选株rFPV-3C-P1-2A-IL-18。 刘慧娟 金宁一 马鸣潇 金明兰 张林 李旭 计越 鲁会军 金扩世关键词:口蹄疫病毒 IL-18基因 O型口蹄疫病毒O/LZ株拯救 本研究以本室构建的 O 型口蹄疫病毒 O/LZ 株全长 cDNA 为模板,使用 T7RNA 聚合酶系统在体外进行转录,得到病毒 RNA.用脂质体转染法将转录物 RNA 导入 BHK 细胞,可观察到典型的口蹄疫病毒致细胞病... 马鸣潇 金宁一 沈国顺 刘慧娟 霍晓伟 金明兰 郑敏 鲁会军关键词:口蹄疫病毒 RNA 文献传递 抗原表位及多表位疫苗研究进展 随着分子生物学、分子免疫学、计算机在生物学中的应用,研究细胞表位的方法越来越多;利用基因重组技术,将筛选、优化的细胞表位构建具有安全性高、稳定性好、免疫效力强的的多表位疫苗;随着人们时多表位疫苗研究的深入,它在疾病的预防... 金明兰 南文龙 韩松 朱占波 金宁一关键词:抗原表位 多表位疫苗 基因重组技术 免疫效力 文献传递 实时荧光定量PCR方法检测人癌组织中RFP蛋白的表达 2005年 目的检测RFP(Ret finger protein)蛋白在人正常组织及人癌组织中的分布。方法采用实时荧光定量PCR方法,以18 S rRNA为内对照,检测RFP在人正常组织及人癌组织中的表达水平。结果RFP表达水平子宫颈鳞状细胞癌组织高于正常子宫颈组织,子宫内膜腺癌组织高于正常子宫内膜组织,胃腺癌组织高于正常胃组织,食管鳞状细胞癌组织高于正常食管组织,而子宫内膜腺癌组织高于子宫颈鳞状细胞癌组织,胃腺癌组织高于食管鳞状细胞癌组织,脑癌组织高于正常脑组织。结论RFP可能成为治疗恶性肿瘤的一个潜在的分子靶点。 张静敏 金宁一 连海 管国芳 李宵 安汝国 高桥雅英关键词:基因表达