清华大学生命科学学院基因组研究所
- 作品数:19 被引量:63H指数:5
- 相关作者:王兆绰朱姗姗更多>>
- 相关机构:北京大学基础医学院北京大学基础医学院生理学与病理生理学系中国科学院西北高原生物研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划中国科学院知识创新工程更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学建筑科学文化科学更多>>
- T细胞因子4显性负调节基因ΔNTCF4对肾癌细胞GRC-Ⅰ生物学性状的影响被引量:2
- 2006年
- 目的观察T细胞因子4(TCF4)显性负调节基因ΔNTCF4对肾癌细胞GRC-1生长、增殖等生物学行为的影响。方法将缺失N末端的TCF4显性负调节基因真核表达质粒pCDNA3-ΔNTCF4和pCDNA3空载体分别转染肾癌细胞GRC-Ⅰ,建立稳定表达ΔNTCF4基因的肾癌细胞系GRC-Ⅰ/ΔNTCF4和空载体细胞系GRC-Ⅰ/Mock,光镜下观察细胞生长状态,绘制生长曲线,MTT法检测细胞增殖活性,免疫细胞化学和Western blot检测Wnt信号通路下游靶基因C-Myc、Cox-2蛋白表达水平。结果稳定表达ΔNTCF4基因的GRC-Ⅰ/ΔNTCF4细胞形态由圆形变为长条状,细胞生长速度变慢,核分裂相减少,出现向正常肾小管细胞逆转的趋势;GRC-Ⅰ/ΔNTCF4细胞增殖活性受到明显抑制,与GRC-Ⅰ对照细胞相比抑制率达11.2%~35.5%(P<0.05),而GRC-Ⅰ/Mock与对照细胞相比差异无统计学意义;表达显性负调节基因的肾癌细胞系GRC-Ⅰ/ΔNTCF4中Cox-2蛋白表达水平显著降低。结论转染T细胞因子4显性负调节基因ΔNTCF4能部分抑制肾癌细胞GRC-Ⅰ生长,降低Wnt通路靶基因C-Myc、Cox-2表达,为通过阻断Wnt信号通路对肾癌进行细胞信号治疗提供了实验依据。
- 叶雄俊林桂亭常智杰张志文辛殿祺王晓峰郭应禄
- 关键词:肾肿瘤T细胞因子4
- 一种新的氧合球蛋白——神经球蛋白被引量:1
- 2003年
- 神经球蛋白 (neuroglobin ,NGB)是最近发现的一种新的可以和氧可逆性结合的血红蛋白家族成员 ,主要表达于脊椎动物的脑中 .NGB蛋白是由 151个氨基酸组成的单体蛋白 ,有着古老的进化起源 .迄今为止 ,已证明它具有储存、转运氧气和保护神经细胞的功能 .NGB基因的表达调节至少有两条信号转导途径参与 .
- 赵同标常智杰赵新全
- 关键词:氧气神经细胞
- ATF5与TCF4相互作用及其对Wnt信号通路的调控被引量:4
- 2003年
- 应用酵母双杂交技术, 鉴定Wnt通路关键信号分子TCF4与cAMP效应元件结合蛋白家族新成员-- 激活转录因子5(ATF5)之间的相互作用, 酵母表型分析和β-半乳糖苷酶(β-gal)活性测定结果发现, 两者的作用位于ATF5蛋白C端含有碱性亮氨酸拉链(bZIP)区域(162~ 282 aa). 通过受TCF启动的荧光酶报告系统分析ATF5对Wnt信号通路的影响, 结果显示ATF5蛋白C端能进一步加强TCF4对Wnt通路的激活效应. 由此提示, ATF5可能是Wnt通路下游信号的辅助激活因子(co-activator), 它能协同β-连环蛋白/TCF4参与Wnt信号通路的激活.
- 叶雄俊张志文张新军林桂亭熊世勤金桂花韩亮黄世思陈培拉艾军魁辛殿祺郭应禄常智杰
- 关键词:TCF4WNT信号通路蛋白质相互作用基因调控激活转录因子
- 小鼠STAT3基因干扰质粒的构建及其效果鉴定
- 2006年
- 目的构建小鼠STAT3基因的特异性RNA干扰质粒,并鉴定其在细胞水平的抑制效果。方法采用DNA载体介导的RNA干扰技术构建小鼠STAT3基因的特异性RNAi质粒(pBS/U6/STAT3siRNA),并通过RT PCR、免疫印迹、免疫细胞化学染色等技术对pBS/U6/STAT3siRNA的抑制效率进行鉴定。结果经双酶切鉴定筛选出4个阳性干扰质粒,分别转入293T细胞后均可明显降低STAT3的表达,尤以靶向(+2334~+2351)位点的质粒干扰效率最高,达70%。结论小鼠STAT3基因的特异性干扰质粒(pBS/U6/STAT3siRNA)能从蛋白及mRNA水平上特异和高效地抑制STAT3基因的表达。这种DNA载体介导的双链RNA干扰质粒为进一步探究STAT3与胚胎发育的相关功能提供一种有效的研究工具。
- 星懿展李泽桂李红丽李铁石丁震宇
- 关键词:RNAI小鼠干扰质粒
- PI负责模式下分子生物学实验室运行管理浅析被引量:5
- 2004年
- 本文探讨了首席研究员负责模式下的分子生物学实验室运行中,在人力资源、财务与物流、质量控制和信息系统管理几个方面的特点,存在的问题和解决方法,目的在于提高实验室运行效率,整合有限研究资源,提高行业竞争力。
- 郝新保常智杰
- 关键词:分子生物学实验室管理首席研究员人力资源
- 相异物种同源基因cDNA的快速克隆被引量:4
- 2003年
- 介绍了一种结合生物信息学数据库的比较分析 ,在系统发生相近物种的核酸保守区设计PCR引物 ,通过RT PCR和RACE方法 。
- 赵同标赵新全常智杰赵伟孙平徐世晓宋娅莉
- 关键词:同源基因CDNA克隆PCR引物
- T淋巴细胞的信号转导
- 2002年
- T淋巴细胞是构成机体细胞免疫反应的中心环节 ,而 T细胞的激活、增殖、分化及凋亡均与细胞内引发的一系列信号通路直接相关。本文就信号转导在 T细胞激活、增殖和凋亡中的作用及其研究进展作一述评。
- 刘力傅新元
- 关键词:T淋巴细胞信号转导蛋白激酶
- STAT3在小鼠胚胎神经系统发育中的表达被引量:4
- 2005年
- 目的 观察STAT3在小鼠胚胎神经管发生和神经上皮分化迁移阶段的时空表达规律,为探讨STAT3在胚胎神经系统发生和发育过程的作用及可能机制提供形态依据。方法 采用全胚胎原位杂交技术和免疫组织化学技术,观察STAT3在神经胚形成和神经上皮分化迁移阶段的表达。结果 ①E8.75d整个鼠胚几乎没有观察到STAT3mRNA的表达,在E9.5d ,STAT3mRNA在前脑泡急剧增多,到E10 .5d ,阳性信号出现在中脑泡,E11.5d时在后脑泡的一狭窄区域有STAT3mRNA的表达;②E13 .5d ,在侧脑室周围即未来大脑新皮层区域、间脑、发育中的视网膜、第四脑室周围的脑组织(未来的脑桥)、脊髓、三叉神经节和背根神经节C1均可观察到较强的STAT3蛋白阳性信号,E14 .5d和E15 .5d时,大脑皮层、间脑、视网膜、第四脑室周围以及发育中的脑桥和脊髓等部位观察到中等强度的STAT3蛋白表达。结论 STAT3可能参与了神经管的关闭和神经上皮的分化和迁移。
- 纪华李泽桂马路丁震宇蔡文琴傅新元常智杰刘力
- 关键词:STAT3神经上皮
- 清华大学生物馆IVC动物房的工艺设计
- 清华大学生物系基因组研究所,在校内生物馆第一层改建SPF动物实验设施一处,面积约130 m2。文章介绍了作者的设计思路及改建实施方案、IVC笼具的特点及使用要求,同时还总结了改建实验动物设施的经验。
- 王兆绰王银银罗金环常智杰
- 清华大学生物馆IVC动物房的工艺设计被引量:7
- 2004年
- 清华大学生物系基因组研究所 ,在校内生物馆第一层改建SPF动物实验设施一处 ,面积约 130m2 。文章介绍了作者的设计思路及改建实施方案、IVC笼具的特点及使用要求 ,同时还总结了改建实验动物设施的经验.
- 王兆绰王银银罗金环常智杰
- 关键词:平面布局