湖南省科技计划项目(2010RS4001)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：吴俊文刘如石许源许凤方俊更多>>
- 相关机构：湖南师范大学湖南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省科技计划项目湖南省大学生研究性学习与创新性实验计划项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 戊型肝炎病毒IV型衣壳蛋白缺失突变体原核表达与性质
- 2014年
- 采用PCR技术扩增基因IV型HEV(Hepatitis E Virus,HEV)开放阅读框2(Open Reading Frame 2,ORF2)的缺失突变体(aa384-606),亚克隆到表达载体后,转化到大肠杆菌中进行诱导表达,表达蛋白命名为rP24。SDS-PAGE和免疫印迹实验表明,rP24获得了高效表达,且和单克隆抗体15B2具有强的反应活性。rP24经过包涵体洗涤、溶解复性、离子交换层析和分子筛层析纯化后,免疫印迹实验表明,纯化rP24能与抗HEV ORF2中和单克隆抗体8C11以及HE(Hepatitis E,HE)阳性血清发生很强的免疫反应性,说明rP24上具有构象型中和表位,模拟了HEV衣壳蛋白的空间结构。动态光散色测量结果表明,rP24的平均水化半径为7.48 nm;纯化rP24免疫动物实验表明,rP24具有强的抗原性,小鼠阳转周期短,抗体持续时间长;纯化rP24作为包被抗原检测HE阳性血清和阴性血清,结果显示rP24对HE阳性血清和阴性血清检出率与北京万泰公司的抗HEV-IgG检测试剂盒的检出率一致。这些实验结果说明,具有较好免疫反应性和免疫原性的rP24获得了高效表达,该蛋白模拟了天然病毒衣壳蛋白的中和表位,为进一步研究基因I型和基因IV型HEV感染不同宿主细胞差异的分子机制奠定了基础。
- 邱义兰吴俊文邱果李桑李烨刘胜姿刘如石
- 关键词：戊型肝炎病毒衣壳蛋白原核表达免疫反应性免疫原性
- 宏基因组学在胃肠道微生物研究中的应用被引量：3
- 2012年
- 动物胃肠道中普遍存在大量共生微生物群,对于它们的研究一直受制于纯培养技术。随着分子生物学的快速发展及其在微生物学及生态学上的应用,针对未培养微生物研究的一门新型学科——宏基因组技术应运而生并迅速发展。通过提取胃肠道粘膜表面以及内容物中微生物DNA,构建总DNA文库的方法,利用基因组学的研究策略,来研究胃肠道中微生物遗传组成及群落功能。宏基因组技术在胃肠道微生物研究中广泛的应用,对于医学、生态学、生物能源利用等领域的研究具有重大的价值。
- 吴莎莎卢向阳许源许凤吴俊文田云方俊刘如石
- 关键词：宏基因组胃肠道微生物
