安徽省自然科学基金(11040606M163)
- 作品数：13 被引量：23H指数：3
- 相关作者：陈传好赵海洋马子君路屹袁圆更多>>
- 相关机构：蚌埠医学院蚌埠医学院第二附属医院更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 两种转基因载体对关节软骨细胞中内参基因转录水平的影响
- 2012年
- 目的探讨质粒型和腺相关病毒两种转基因载体对家兔关节软骨细胞中GAPDH、B2M、18S rRNA和TUBB内参基因mRNA转录水平的影响。方法将携带增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EFGP)报告基因的质粒型载体pcDNA6.2-EGFP和腺相关病毒载体AAV2-EGFP分别转染至体外培养的家兔关节软骨细胞中,荧光显微镜观测转染后关节软骨细胞中EGFP的表达,实时PCR技术检测两各组关节软骨细胞中GAPDH、B2M、18S rRNA和TUBB基因mRNA转录水平的变化。结果转染48 h后,两组转基因关节软骨细胞中均可见明显的绿色荧光;与正常对照组相比,4个内参基因在两组转基因细胞内的转录水平均下调,其中GAPDH和TUBB基因下调较小,腺相关病毒载体对转基因的影响最小。结论腺相关病毒载体对关节软骨细胞中内参基因表达的影响低于质粒型载体,表明腺相关病毒对关节软骨细胞本身影响较小;GAPDH和TUBB基因可作为实验的内参基因校正目的基因的表达量。
- 王雪梅焦玉萌陈传好
- 关键词：转基因载体软骨细胞绿色荧光蛋白内参基因实时聚合酶链反应
- 基因修饰细胞促进关节软骨损伤修复的潜力与挑战
- 2013年
- 关节软骨损伤导致的退化性关节疾病影响了世界人口的约三分之一，超过一半的60岁以上老人存在关节功能紊乱。因此，找到一种优化治疗软骨疾病的策略具有较高的社会、经济效益。关节软骨损伤后的修复能力差，一直是困扰科研人员和临床工作者的一个难题。
- 陈传好
- 关键词：关节基因修饰细胞软骨修复
- 兔关节软骨细胞原代培养及生物学鉴定被引量：6
- 2015年
- 目的探讨兔膝关节软骨细胞体外分离培养及鉴定方法,分析软骨细胞在体外不同阶段的生物学特性。方法取4周龄健康新西兰兔膝关节软骨,以机械分离和酶消化相结合的方法获取膝关节软骨细胞,经体外培养、传代。观察不同培养阶段细胞形态和生长,CCK-8法测定细胞增殖并绘制生长曲线,甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原免疫荧光染色鉴定软骨细胞。结果兔软骨细胞经两步消化,可获取高纯度的软骨细胞,细胞活性率可达95%以上,甲苯胺蓝染色及免疫荧光呈阳性结果。原代细胞和第一代细胞呈多角形,传代4~5代后,细胞形态逐渐由多角形变为梭形,基质分泌氨基多糖和胶原染色变浅。结论成功建立了简单易行的软骨细胞分离、培养方法,通过传代可以获取大量实验细胞,但仅限于5代以内软骨细胞适用于组织工程研究。
- 赵海洋马子君路屹陈传好
- 关键词：软骨细胞细胞培养
- 胃癌组织中乳腺癌扩增基因1和核转录因子-κB的表达
- 2014年
- 目的探讨乳腺癌扩增基因1(AIB1)和核转录因子-κB(NF-κB)的表达与胃癌发生发展的关系,为开展以AIB1和NF-κB为靶标的胃癌防治提供理论依据。方法采用免疫组织化学法检测88例胃癌组织和85例癌旁组织中AIB1和NF-κB表达情况,并与临床病理特征结合进行综合分析。结果 AIB1在胃癌组织中表达率(75.0%)高于癌旁组织(7.1%),差异有统计学意义(P<0.05);NF-κB在胃癌组织中表达率(72.7%)高于癌旁组织(11.8%),差异有统计学意义(P<0.05);胃癌组织中AIB1表达和淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05),NF-κB表达与淋巴结转移及肿瘤分化程度有关(P<0.05);胃癌组织中AIB1与NF-κB表达呈正相关(r=0.236,P<0.05)。结论 AIB1与NF-κB参与胃癌的形成,且与胃癌的侵袭、转移及预后有一定的关系。
- 袁圆年峰
- 关键词：胃癌核转录因子-ΚB免疫组织化学
- 霍山石斛提取物对人喉癌细胞Hep-2增殖和凋亡的影响及其机制被引量：7
- 2011年
- 目的探讨霍山石斛提取物(Water extracts from Dendrobium huoshanense,WEDH)对人喉癌细胞株Hep-2增殖和凋亡的影响及其机制。方法分别用3.75、7.50、15.00、30.00和60.00 mg/ml的WEDH处理Hep-2细胞,采用MTT法检测各组细胞的增殖水平;倒置相差显微镜观察细胞的形态学变化;Annexin V-FITC/PI双染色激光扫描共聚焦显微镜观察细胞凋亡;Fluo-3 AM标记激光扫描共聚焦显微镜观察细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+])i;分光光度法检测细胞的Caspase-3活性。结果 WEDH可明显抑制Hep-2细胞增殖,且呈时间和剂量依赖性,作用24、48和72 h的IC50值分别为48.54、26.67和14.93 mg/ml;经WEDH作用48 h的细胞形态均发生显著改变,呈现典型的细胞凋亡特征,且呈浓度依赖性,细胞内[Ca2+]i浓度和Caspase-3活性均显著高于阴性对照组(P<0.05)。结论 WEDH对Hep-2细胞具有明显的抑制增殖和诱导凋亡作用,其机制可能与升高细胞内[Ca2+]i浓度,激活Caspase-3有关。
- 张静连超群吴守伟胡明洁陈传好
- 关键词：石斛中草药喉肿瘤细胞增殖
- 胃癌组织中分化抑制蛋白Id1的表达及其临床意义
- 2015年
- 目的探讨分化抑制蛋白Id1在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测88例胃癌组织和85例癌旁组织中Id1蛋白的表达情况,并分析其与各临床病理特征之间的关系。结果 Id1在胃癌组织中的阳性表达率(63.6%)显著高于癌旁组织(18.9%)(P<0.01)。胃癌组织中Id1的表达与淋巴结转移、临床分期、肿瘤大体类型以及浸润深度有关(P<0.05),与患者年龄、性别、肿瘤直径及分化程度无关(P>0.05)。结论 Id1蛋白在胃癌组织中呈异常高表达,可能与胃癌的发生、发展及浸润转移有关。
- 袁圆年峰
- 关键词：胃癌免疫组织化学
- 生长因子基因在兔软骨细胞损伤模型中表达被引量：2
- 2014年
- 目的：探测生长因子基因在兔关节软骨细胞损伤后不同时间点的表达变化.方法：通过机械划伤制备关节软骨细胞损伤模型,观察软骨细胞在划伤后的形态变化.采用实时荧光定量PCR技术检测软骨细胞在划伤前和划伤后1、3、7d4个时间点的血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维生长因子（bFGF）、转化生长因子-β1 （TGF-β1）、胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ）和Ⅱ型胶原基因mRNA表达.结果：细胞划伤后划痕两侧细胞逐渐向划痕区生长和融合.VEGF和bFGF基因在细胞划伤后呈明显低水平表达,而TGF-β1、IGF-Ⅰ和Ⅱ型胶原基因却呈现较高表达水平.VEGF基因在细胞损伤第3天的表达达高峰后开始下降,而bFGF、TGF-β1及Ⅱ型胶原基因在损伤的第1天表达明显降低,随后呈现升高的趋势.IGF-Ⅰ基因在损伤初期表达变化平稳,在损伤第3天后出现明显升高趋势.结论：bFGF、TGF-β1、VEGF、IGF-Ⅰ和Ⅱ型胶原基因细胞损伤后的表达存在差异性,这为调节关节软骨内源性生长因子基因表达治疗关节软骨损伤提供实验依据.
- 赵海洋马子君任俊丽陈传好
- 关键词：软骨细胞细胞培养
- 两种佐剂制备CIA大鼠模型的效果比较被引量：1
- 2022年
- 目的:比较不完全弗氏佐剂(incomplete Freund′s adjuvant,IFA)和完全弗氏佐剂(complete Freund′s adjuvant,CFA)分别与牛Ⅱ型胶原蛋白(calfⅡcollagen,CⅡ)构建的胶原诱导的类风湿性关节炎(collagen-induced rheumatoid arthritis,CIA)大鼠模型的效果。方法:选取30只8周龄SD大鼠,随机分为0.9%氯化钠溶液组(对照组)、IFA+CⅡ组和CFA+CⅡ组,每组10只。将IFA/CFA与CⅡ以等体积混匀,分别从鼠尾根部进行皮内注射,在第0天和第7天每只鼠分别注射200μL和100μL。采用相同方法注射0.9%氯化钠溶液作为对照组。从初次免疫开始,每7天记录1次关节炎指数(arthritis index,AI)分值。在第14天分别从3组中取5只大鼠获取踝关节,做HE染色并观察病理学变化。结果:造模第0天和第7天,3组AI值为0;初次免疫后第14天,IFA+CⅡ组和CFA+CⅡ组的AI均值分别为(6.5±0.5)和(7.4±0.4),2组差异有统计学意义(P<0.01);造模后第21天,IFA+CⅡ组和CFA+CⅡ组的AI均值分别为(8.8±0.5)和(7.8±0.8),2组差异有统计学意义(P<0.01);造模后第14天和第21天,2组差异比较均无统计学意义(P>0.05)。踝关节HE染色结果发现,IFA+CⅡ组踝关节软骨表面粗糙不平,轻微破坏;关节腔内可见炎性细胞浸润。CFA+CⅡ组关节软骨破坏明显,呈锯齿状,有明显的血管翳和大量的炎性细胞浸润。结论:使用IFA+CⅡ和CFA+CⅡ均可制备RA模型,IFA+CⅡ的炎症反应较轻,为制备RA模型的首选方案。
- 郭帅褚小磊沈桐李季王浩淼朱毛妮朱盼盼陈一航吕樵岚胡玲莉田亚兰王元元陈传好
- 关键词：类风湿性关节炎
- 姜黄素诱导A549细胞凋亡过程中活性氧水平和caspase-3活性的变化被引量：4
- 2011年
- 目的探讨姜黄素诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的发生机制。方法采用MTT法检测姜黄素对A549细胞增殖的影响;Ho-echst33258荧光染色法观察姜黄素对A549细胞凋亡的影响;DCFH-DA为细胞内活性氧(ROS)探针,激光共聚焦扫描显微镜检测姜黄素对A549细胞ROS水平的影响,分光光度法测定姜黄素对A549细胞内caspase-3活性的影响。结果不同浓度的姜黄素作用12、24、36、48 h后均可抑制人肺腺癌A549细胞的增殖并诱导其发生凋亡作用;激光共聚焦扫描显微镜下观察姜黄素作用后细胞ROS明显上升,细胞内caspase-3活性增强。结论姜黄素对人肺腺癌A549细胞有明显的抑制生长和诱导凋亡作用,对细胞ROS和caspase-3活性的影响在其诱导A549细胞凋亡中发挥作用。
- 张静连超群陈传好胡明洁吴守伟
- 关键词：姜黄素A549细胞凋亡活性氧半胱氨酸蛋白酶-3
- 兔膝关节解剖学特点及在动物模型的意义被引量：2
- 2012年
- 目的研究兔膝关节血管分布及关节囊附着,为兔膝关节动物模型建立提供解剖学基础。方法将20只新西兰大白兔麻醉后,4%多聚甲醛灌注固定。解剖分离兔膝关节的动脉来源及分支、暴露兔膝关节囊的附着点。测量各动脉起始处及其在水平方向上和关节囊附着点距髌骨下极的距离。结果分布兔膝关节的各动脉距髌骨下极的距离上、下和左、右约为20 mm和5 mm,关节囊的上、下端和左、右侧的附着点距髌骨下极约为10 mm和4.5 mm。结论在制备兔膝关节模型时,髌骨下极可设为参考的基准点,并通过距其距离判断手术安全范围。
- 陈士文路屹陈传好邵正仁单增强李成
- 关键词：动脉关节囊
