福建省省级财政专项(STIFY01)
- 作品数：1 被引量：30H指数：1
- 相关作者：陈坚林忠平祁建民孙清信胡鸢雷更多>>
- 相关机构：北京大学福建省农业科学院福建农林大学更多>>
- 发文基金：福建省省级财政专项国家公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 紫云英ISSR引物的筛选及PCR反应体系的优化被引量：30
- 2012年
- 以紫云英为研究材料,用哥伦比亚大学(UBC)公布的100条ISSR引物和11种株系紫云英品种的DNA为模板进行PCR扩增,筛选出33条扩增条带较好的ISSR引物,对其中的ISSR引物进行梯度PCR,筛选出最佳的退火温度。再采用正交试验和单因素试验相结合的方法对紫云英ISSR-PCR反应体系的5种因素(模板、Mg2+、TaqDNA聚合酶、dNTP及引物)进行优化浓度。确立了适合紫云英的ISSR分析的反应体系。在25μl反应体系中,其反应浓度为:DNA模版50.00ng,Mg2+2.00mol/L,Taq聚合酶1.0 U,dNTP 0.25mmol/L,引物0.20μmol/L,2.5μl 10×buffer。本试验为以后利用ISSR技术进行紫云英遗传多样性分析和物种保护奠定了技术基础。
- 孙清信陈坚张辉祁建民林忠平胡鸢雷林新坚
- 关键词：紫云英退火温度正交试验
