国家高技术研究发展计划(2001AA215041) 作品数:15 被引量:375 H指数:6 相关作者: 王一飞 张美英 李久香 熊盛 王金万 更多>> 相关机构: 暨南大学 中国医学科学院肿瘤医院 中国医学科学院放射医学研究所 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
nm23基因与肺癌的研究进展的影响 被引量:8 2004年 nm2 3 -H1是一种肿瘤转移抑制基因 ,其相关表达蛋白nm2 3 -H1 NDPK -A在某些癌症中与肿瘤转移潜能呈负相关。肺癌中nm2 3 -H1基因及其表达产物的研究已引起广泛关注。本文就近年来国内外nm2 3 -H1基因与肺癌的转移和预后关系的研究进展作一简要综述。 陈宇霞 王一飞关键词:NM23基因 肺癌 肿瘤转移抑制基因 基因结构 癌转移 三种检测NDPK-A的ELISA方法的比较选择及初步应用 被引量:1 2004年 〔目的〕建立有效的检测NDPK -A的ELISA方法 ,为国内多种血液肿瘤的预后试剂盒的开发提供实验依据。〔方法〕通过间接、双单抗夹心、单抗 -多抗夹心三种ELISA方法 ,检测NDPK -A含量 ;通过比较确定最佳方法 ,并从灵敏度、精确度对最佳方法进行考核 ;将该法初步应用于检测HL60细胞冻融液中NDPK -A含量。〔结果〕确定单抗 -多抗夹心ELISA为三种方法中最佳 ,检测下限为 0 5 7μg/L ;平均批内变异系数 (CV)为 6 2 8% ,平均批间CV为 8 5 8% ;NDPK-A的含量随着细胞浓度的增高而增高 ,浓度为 1× 10 7个 /ml细胞冻融液中NDPK -A的含量为 5 5 6μg L。〔结论〕应用单抗 -多抗夹心ELISA方法能够达到临床检测人血浆中NDPK -A含量的要求。 李冰 李雪玲 张美英 王一飞关键词:ELISA HL60 基因 肿瘤转移 多克隆抗体 中试规模高效纯化重组人核苷二磷酸激酶A 2007年 中试规模纯化重组人核苷二磷酸激酶A(rhNDPK-A)。菌体高压匀浆,然后微滤去除菌体碎片,超滤浓缩,所得样品上样DEAE-sepharose Fast Flow,收集目的峰,上样Cibacron Blue 3GA Sepharose CL-4B,含ATP的缓冲液洗脱目的蛋白,超滤精制。结果表明,1500g菌体经过2次匀浆后,所得匀浆液中含NDPK47.6g,经过微滤超滤处理后,可回收目的蛋白27.3g。再经过两步柱层析及超滤精制后,最终可得纯度为96.3%的目的蛋白17.2g,总回收率为36.2%,每100g湿菌体的蛋白产率为1.15g。比较每个步骤的回收率,发现精制>亲和层析>离子交换层析>样品前处理过程。与前期报道发酵工艺联用,rhNDPK-A的纯化产量达到510mg/L。工艺简便、得率高的rhNDPK-A纯化工艺的建立为NDPK的应用开发提供了物质基础;另外,本文结果也提示,对于非分泌型重组蛋白来说,影响目的蛋白回收的最主要因素可能不是柱层析,而是样品前处理过程。 熊盛 钱垂文 郭朝万 黄立 刘秋英 张美英 王一飞关键词:核苷二磷酸激酶 纯化 超滤 rhNDPK-α蛋白对正常小鼠脾细胞增殖和细胞周期的影响 2003年 目的:探讨rhNDPK-α蛋白对正常小鼠脾细胞增殖和细胞周期的影响.方法:不同质量浓度的rhNDPK-α蛋白体外作用于脾细胞,通过MTT法和流式细胞术测其增殖和细胞周期.结果:rhNDPK-α蛋白的质量浓度为10~250μg·mL-1时对脾细胞的自发增殖反应有明显的促进作用;10~50μg·mL-1时对PHA诱导的脾细胞增殖有明显的协同作用;50μg·mL-1rhNDPK-α蛋白作用小鼠脾细胞24h后,G0/G1和G2-M期细胞比例明显增加,而S期比例显著减少.结论:rhNDPK-α蛋白可促进脾细胞的存活,很可能通过调控细胞周期而参与细胞的生长调节. 李海燕 王一飞 张美英 刘洁生关键词:流式细胞术 细胞周期 nm23-H1与白血病和淋巴瘤的预后关系 被引量:1 2003年 肿瘤转移相关蛋白nm2 3 H1/NDPK A在某些癌症中与肿瘤转移潜能呈负相关 ,另一方面它又是多种血液肿瘤的分化抑制因子。大量临床病例的研究表明nm 2 3 H1在急性髓性白血病和非霍奇金淋巴瘤中具有预后作用。本文主要就nm2 3 H1/NDPK 李海燕 刘洁生 王一飞关键词:急性髓性白血病 非霍奇金淋巴瘤 预后 血管生成及其抑制剂在前列腺癌中的研究进展 被引量:13 2004年 A Review Angiogenesis plays a key role in progression of prostate cancer. Antigiogenesis becomes a new treament target for prastate cancer. In this review, we focus on the current knowledge of angiogenesis and tumor angiogenesis inhibitor in prastate cancer. [ 刘秋英 王一飞关键词:血管生成抑制剂 前列腺肿瘤 50L规模中试发酵重组核苷二磷酸激酶A工程菌 规模生产重组人核苷二磷酸激酶A(rhNDPK-A).摇瓶培养一级种子至OD600为5.0~5.5,以10%比例接种二级种子培养基,在7L发酵罐中培养至OD600为9.6~10.5,然后转入80L发酵罐中进行补料分批培养,... 熊盛 钱垂文 黄立 刘秋英 张美英 王一飞关键词:核苷二磷酸激酶 DNA重组 中试规模 发酵条件 重组人血管内皮抑制素YH-16治疗晚期非小细胞肺癌的临床研究 被引量:154 2006年 目的评价重组人血管内皮抑制素YH-16治疗复治的晚期非小细胞肺癌的有效率、肿瘤进展时间(TTP)、对生活质量的影响及不良反应,并为临床确定合适的用药剂量。方法本研究为随机对照多中心试验。患者随机分为7.5mg/m2或15mg/m2两个剂量组,均采用静脉滴注YH-163h,每天1次,连续给药28d。结果共入组68例,可评价疗效的患者60例。7.5mg/m2剂量组和15mg/m2剂量组有效率均为3.0%(P>0.05);中位TTP在意向治疗(ITT)人群分别为60d和71d(P>0.05),对生活质量的影响以及不良事件发生率分别为48.6%和38.7%(P>0.05)。无预期以外的不良事件发生。结论YH-16对多程化疗后复发的非小细胞肺癌显示出一定的抗肿瘤活性,安全性较好,临床受益率高;建议采用7.5mg/m2作为临床常规使用剂量。 杨林 王金万 孙燕 朱允中 刘晓晴 李维廉 邸立军 李佩文 王友良 宋恕平 姚晨 游丽芬关键词:非小细胞肺癌 50L规模中试发酵重组核苷二磷酸激酶A工程菌 中试规模生产重组人核苷二磷酸激酶A(rhNDPK-A)。摇瓶培养一级种子至OD600为5.0~5.5,以10%的比例接种二级种子培养基,在7L发酵罐中培养至OD600为9.6~10.5,然后转入80L发酵罐中进行补料分批... 熊盛 钱垂文 黄立 刘秋英 张美英 王一飞关键词:发酵工程 核苷二磷酸激酶 中试 纯化 文献传递 NDPK-A诊断试剂盒的研制 2007年 目的建立一种灵敏、特异检测血清中二磷酸核苷激酶(NDPK-A)含量的酶联免疫吸附试验(ELISA)法和试剂盒,分析血清中的NDPK-A含量与血液病之间的关系。方法筛选NDPK-A多株单克隆抗体和多克隆抗体,以建立检测NDPK-A的双抗体夹心ELISA方法。测定了84例健康人,35例白血病与淋巴瘤等血液病患者血清的NDPK-A含量。结果单抗-多抗夹心ELISA法可测最适范围为1.56~100μg/L,回归方程为y=-0.0005x2+0.0178x+0.0892,相关系数r2=0.9993(y为A490nm,x为[NDPK-A]),批内变异系数4.75%~6.32%,批间变异系数11.06%~13.84%,回收率为90.52%~105.16%。84例健康人血清NDPK-A含量为1.75±0.92μg/L,35例白血病与淋巴瘤患者血清的阳性检出率为16例。急性白血病,尤其是急性单核细胞白血病(M5)和非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者血清中NDPK-A水平与健康对照差异较大,分别为12.97±9.73、20.00±18.55μg/L。结论建立了一种可应用于临床检测NDPK-A的ELISA方法,初步展示了NDPK-A含量检测的临床意义,NDPK-A含量检测可发展为白血病的辅助诊断和疗效判断指标。 李雪玲 王一飞 熊盛 张美英关键词:二磷酸核苷激酶 酶联免疫吸附试验 白血病 淋巴瘤