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表达HIV-1 B亚型gp160的腺病毒载体疫苗的质量研究和药效学研究被引量：1: 2014年; 目的:系统评价本实验室表达HIV-1B亚型gp160的腺病毒载体疫苗(Ad5-HIV gp160)在小鼠体内的免疫效果。为之后进行的恒河猴药效学提供研究基础,为申报Ⅰ期临床试验提供资料支持和质量检定方法。方法:Ad5-HIV gp160以不同剂量分别免疫小鼠,采用ELISPOT法和ELISA法检测免疫小鼠体内特异性细胞免疫反应和体液免疫反应。结果:各剂量组小鼠均可诱导出较高水平的细胞免疫反应和体液免疫反应。结论:疫苗的质量研究显示基因插入表达正常,Ad5-HIV gp160疫苗剂量为2×108 VP/只时能够在小鼠体内激发出高水平的细胞免疫反应和体液免疫反应。; 徐柯胥少华余双庆冯霞; 关键词：艾滋病疫苗腺病毒载体体液和细胞免疫

利用磁珠分选和单细胞RT—PCR筛选HIV-1Env特异性单克隆抗体的研究被引量：1: 2013年; 目的建立一种简单易行的从HIV-1感染者中筛选包膜糖蛋白（envelope glycoprotein，Env）特异性单克隆抗体的方法。方法采集HIV-1感染者抗凝全血，分离外周血单个核细胞，利用生物素标记的HIVGp120抗原与B细胞膜上的IgG特异性结合，然后用链霉亲和素标记的磁珠分选出能够产生Env特异性抗体的记忆性B细胞。用单细胞RT-PCR法从记忆性B细胞中扩增抗体的重链可变区基因与轻链可变区的基因并克隆到表达载体中，将携带重链基因的质粒与携带轻链基因的质粒共转染293T细胞，获得HIV-1特异性人单克隆抗体，并进行抗体结合活性的鉴定。结果从1例我国HIV-1感染者记忆性B细胞中筛选出3株对HIV-1Env抗原有结合活性的单克隆抗体。结论利用生物素标记抗原与记忆性B细胞特异结合，并用亲和素标记的磁珠对细胞进行分选，结合单细胞RT-PCR技术可以成功筛选出抗原特异性的单克隆抗体。; 黄湘滢余双庆程湛叶景荣徐柯冯霞曾毅; 关键词：HIV-1 GP120 单克隆

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艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项(2012ZX10001005)