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四川省教育厅科学研究项目(2006A054)
作品数:
1
被引量:7
H指数:1
相关作者:
余红
曾永秋
陈绍坤
赵娇
刘岚
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余红
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2010
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联合干扰人端粒酶逆转录酶和端粒重复序列结合因子2基因的表达对乳腺癌MCF-7细胞生长的抑制作用
被引量:7
2010年
目的探讨联合干扰人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因和端粒重复序列结合因子2(TRF2)基因在乳腺癌基因治疗中的协同效应。方法构建表达小分子干扰RNA(siRNA)-hTERT和siRNA-TRF2的重组腺病毒载体rAd-hTERT和rAd-TRF2,单独或联合转染人乳腺癌MCF-7细胞。采用Westernblot法检测MCF-7细胞中hTERT和TRF2蛋白的表达,采用四甲基偶氮唑蓝(MTF)法检测MCF-7细胞的增殖抑制情况,采用流式细胞仪检测MCF-7细胞的细胞周期变化,采用细胞平板克隆形成实验检测MCF-7细胞的克隆形成能力。结果转染48h后,PBS对照组、空载体对照组、阴性对照组、rAd—hTERT转染组、rAd-TRF2转染组以及rAd—hTERT和rAd-TRF2联合转染组乳腺癌MCF-7细胞中hTERT蛋白的相对表达量分别为1.00、0.94±0.02、0.95±0.04、0.18±0.04、0.95±0.01和0.18±0.04;TRF2蛋白的相对表达量分别为1.00、1.01±0.08、0.96±0.02、0.95±0.08、0.22±0.01和0.26±0.02。单独转染tad—hTERT或tad—TRF2后,乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制率仅为54.6%和48.4%,有8.9%±1.2%和9.2%±2.3%的细胞进入分裂期,66.4%±1.5%和64.6%±1.9%的细胞阻滞于G0+G1期,细胞的克隆形成能力显著下降;联合转染rAd—hTERT和rAd—TRF2后,乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制率高达82.1%,进入分裂期的MCF-7细胞明显减少(为4.4%±1.2%),大量细胞阻滞于G0+G1期(为81.4%±1.3%),细胞的克隆形成能力下降更加明显。结论联合干扰hTERT和TRF2基因较单基因干扰可获得更有效的乳腺癌基因治疗效果。
陈绍坤
刘岚
税青林
余红
曾永秋
赵娇
关键词:
人端粒酶逆转录酶
肿瘤
RNA干扰
乳腺癌细胞
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