国家科技支撑计划(2014BAI12B02) 作品数:32 被引量:101 H指数:5 相关作者: 段化伟 戴宇飞 牛勇 郑玉新 贾强 更多>> 相关机构: 中国疾病预防控制中心 山东省职业卫生与职业病防治研究院 山东省医学科学院 更多>> 发文基金: 国家科技支撑计划 国家自然科学基金 山东省科技发展计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 理学 一般工业技术 生物学 更多>>
细胞色素P450酶系对喹乙醇诱导的肾细胞凋亡的影响 2016年 目的采用体外细胞培养系统,研究肝脏微粒体细胞色素P450同工酶对喹乙醇(OLA)毒性的影响,筛选和确定影响喹乙醇毒性的主要细胞色素P450同工酶,探索CYP450酶系选择性介导OLA-ROS-细胞凋亡途径。方法(1)以体外培养的人类肾小管上皮细胞(HK-2)作为检测OLA致肾小管毒性的细胞模型,以脏微粒体混合酶系(S9)加入到HK-2细胞培养中模拟体内代谢环境,将CYP450同工酶(CYP2D6、NADPH:P450还原酶、CYP2A、CYP3A、CYP2C、CYP2E1和CYP1A1/CYP1A2)的化学抑制剂分别加入培养体系中,造成不同P450同工酶活性抑制状况,通过细胞增殖抑制率(MTT)试验来检测OLA单独染毒或OLA与抑制剂联合染毒情况下的细胞毒性。(2)通过流式细胞仪DCF法检测各CYP450同工酶抑制剂对OLA所致HK-2细胞ROS产生情况的影响,筛选HK-2细胞内影响OLA作用的主要CYP450同工酶,推测其代谢路径。结果 (1)MTT检测发现,OLA+S9+α-萘黄酮组与OLA+S9组之间以及OLA+4-甲基吡唑+S9组与OLA+S9组之间细胞活性差异有统计学意义(P<0.05),表明通过抑制CYP4501A酶以及CPY2E1活性可以使OLA的细胞毒性减轻。(2)OLA能够呈剂量依赖性的诱发细胞内ROS含量升高,且加入CYP1A抑制剂以及CPY2E1抑制剂后,可显著减少HK-2细胞ROS的产生量。结论 OLA通过CYP1A和CYP2E1的代谢诱导HK-2细胞生成ROS,进而可能诱发HK-2细胞的凋亡产生细胞毒性和肾毒性。 陈宵 张斌 曹鹏 张意 李忠生 于常艳 肖经纬 李斌关键词:喹乙醇 细胞色素P450 氯乙烯对男性职业人群肝功能和血清性激素水平影响 被引量:1 2019年 目的探讨氯乙烯对男性职业人群肝功能和血清激素水平的影响。方法采用判断抽样方法,选择129名男性氯乙烯作业工人为接触组,以128名男性不接触职业病危害因素的行政办公人员对照组。对工作场所空气中氯乙烯时间加权平均浓度(CTWA)进行检测。对研究对象进行尿中亚硫基二乙酸(TDGA)水平、血常规、心电图和肝脏B型超声波检查,并检测其血清肝功能和性激素指标水平。结果接触组人群工作场所空气中氯乙烯CTWA中位数为0.90 mg/m3,几何均数为1.40 mg/m3。接触组人群尿中TDGA水平高于对照组(中位数:0.68 vs 0.02 mg/g肌酐,P<0.01)。接触组人群血红蛋白水平、红细胞计数、白细胞计数、红细胞压积、平均血小板体积、天冬氨酸氨基转移酶、总胆红素、间接胆红素和肝脏B型超声波的异常率均高于对照组(P<0.05)。与对照组比较,接触组人群血清催乳素、促黄体生成激素(LH)、促卵泡生成素和雌二醇水平均升高(P<0.05),催乳素、LH、雌二醇异常率均升高(P<0.05),睾酮水平下降(P<0.05)。与对照组比较,接触组TDGA低、中、高水平亚组人群血清催乳素水平均升高(P<0.05),异常率均升高(P<0.017)。结论氯乙烯可导致男性职业人群肝功能损伤,并具有生殖毒性。催乳素可作为氯乙烯生殖毒性的效应生物标志物。 张桂云 刘楠 张晓星 薛玲 肖经纬 李斌 关维俊关键词:氯乙烯 血清 肝功能 性激素 甲苯二异氰酸酯职业暴露者外周血淋巴细胞亚群分析 被引量:4 2017年 [目的]研究甲苯二异氰酸酯(TDI)对暴露工人外周血淋巴细胞亚群的影响,为探讨TDI的免疫毒性提供依据。[方法]采用横断面研究方式,以整群抽样法选取甘肃省TDI作业工人53名为暴露组,选取同地区非职业性TDI暴露工人55名为对照组。气相色谱法检测作业环境中TDI水平和尿中代谢产物甲苯二胺(TDA)浓度。应用流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群水平,并结合血常规中淋巴细胞总数的结果,计算CD3+T细胞、CD4^+T细胞、CD8^+T细胞、B细胞和NK细胞绝对数。[结果]暴露组尿中总TDA浓度M(P_(25)~P_(75))为15.86(7.91~29.99)μg/L。淋巴细胞亚群分析,对照组的淋巴细胞、CD3+T细胞、CD4^+T细胞、CD8^+T细胞、B细胞和NK细胞分别为1.80(1.40~2.30)×10~9/L、(1.24±0.35)×10~9/L、0.65(0.53~0.75)×10~9/L、0.47(0.35~0.57)×10~9/L、0.18(0.13~0.23)×10~9/L和0.23(0.19~0.31)×10~9/L。暴露组淋巴细胞、CD8^+T细胞和NK细胞分别为1.92(1.59~2.46)×10~9/L、0.54(0.40~0.67)×10~9/L和0.45(0.35~0.61)×10~9/L,暴露组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。依据尿中总TDA浓度中位数进行分组,低暴露组淋巴细胞、CD3+T细胞、CD4^+T细胞、CD8^+T细胞和NK细胞分别为2.13(1.84~2.45)×10~9/L、(1.42±0.34)×10~9/L、0.70(0.58~0.83)×10~9/L、0.60(0.53~0.69)×10~9/L和0.48(0.33~0.64)×10~9/L,高于对照组(P<0.05);高暴露组NK细胞为0.43(0.32~0.55)×10~9/L,高于对照组(P<0.05)。所有指标在低、高暴露组间差异无统计学意义(P>0.05)。暴露组TDI暴露工龄与淋巴细胞亚群的变化无相关(P>0.05)。[结论]TDI暴露可导致作业工人外周血淋巴细胞亚群发生变化,提示TDI职业暴露者免疫功能受到影响。 沈美丽 梅良英 孟涛 贾强 苗盼盼 牛勇 叶萌 陈学磊 于功昌 邵华 戴宇飞关键词:甲苯二异氰酸酯 淋巴细胞亚群 CD8+T细胞 NK细胞 甲基叔丁基醚致人B淋巴母细胞系DNA损伤和氧化应激损伤的研究 被引量:5 2016年 [目的]通过体外实验研究甲基叔丁基醚(MTBE)染毒对人B淋巴母细胞系DNA损伤和氧化应激水平的影响。[方法]将处于对数生长期的人B淋巴母细胞系分别以1.25、2.5、5、10、12.5μmol/L的MTBE溶液染毒,24 h后分别收集细胞和上清液,用彗星试验检测人B淋巴细胞染毒后的尾部DNA百分比及Olive尾矩;同时,用ELISA试剂盒检测细胞上清液中的丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和8-羟基脱氧鸟苷(8-OHd G)水平,并对MTBE浓度和这些指标之间的关系进行相关性分析。[结果]MTBE染毒24 h后,人B淋巴母细胞系在5、10、12.5μmol/L剂量组的尾部DNA百分比及Olive尾矩均高于对照组(均P<0.01);1.25、2.5、5、12.5μmol/L组8-OHd G水平高于对照组(P<0.05);除10μmol/L组的MDA之外,各组MDA、GSH-Px水平均未见明显改变。MTBE浓度和尾部DNA百分比及Olive尾矩之间呈正相关关系(r=0.685,P=0.000;r=0.615,P=0.000)。[结论]低剂量MTBE染毒可以诱导人B淋巴母细胞系发生DNA损伤,DNA损伤可以作为反映MTBE毒性效应的一项较敏感的指标。 王禹 薛惠中 高明 谭玉凤 宋杨 杨叶 范宏亮 周程 吴南翔关键词:甲基叔丁基醚 DNA损伤 氧化应激 毒性机制 甲苯二异氰酸酯的化学损伤及DNA修复基因的研究进展 被引量:1 2016年 甲苯二异氰酸酯(TDI)是一种易挥发、低分子质量的化学物质,有2,4-TDI和2,6-TDI两种同分异构体。主要用于生产聚氨酯树脂及泡沫,墙体绝缘材料、密封地板、卫生间及家具类也含此种物质[1]。由于其相对分子质量小和易挥发的特性,因此在其生产及运输过程中常以蒸气、粉尘的形式刺激并进入呼吸道,引起肺部、肝脏及睾丸等多种靶器官的毒性效应[2],也可引起DNA损伤及染色体畸变[3-4]。 巨睿 邵华 贾强关键词:DNA修复基因 化学损伤 靶器官损伤 染色体畸变 毒性效应 过氧化反应 氯乙酸致人支气管上皮细胞16HBE的凋亡机制研究 被引量:3 2016年 [目的]探讨氯乙酸对人支气管上皮细胞16HBE氧化应激以及线粒体凋亡通路的影响。[方法]以16HBE细胞为研究对象,将实验分为对照组和0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mmol/L的氯乙酸染毒组,染毒24 h后检测细胞存活率、凋亡率及超氧化物歧化酶(SOD)活力;染毒0.25、0.5、1、8、24 h后检测细胞内活性氧(ROS)水平;染毒8、24 h后检测线粒体膜电位以及Bcl-2和Bax m RNA表达水平。用1.5、2.5 mmol/L氯乙酸染毒24 h后,检测Bcl-2、Bax、细胞色素C、Caspase-9、Caspase-3、PARP-1凋亡相关蛋白的表达水平。[结果]随氯乙酸染毒浓度升高,染毒24 h后细胞存活率、SOD活力和线粒体膜电位呈剂量依赖性下降(r=-0.902、-0.732和-0.863,P<0.05),而细胞凋亡率呈剂量依赖性上升(r=0.914,P<0.05)。与对照组相比,1.5、2.0、2.5 mmol/L剂量组细胞存活率分别降低了12%、20%和30%,SOD活力分别降低了9%、21%和30%,线粒体膜电位分别降低了11%、18%和24%,而细胞凋亡率分别是对照组的3、4和7倍。各剂量组细胞内ROS水平呈先升高后降低的趋势,在染毒0.5 h达到峰值,与对照组相比分别增加了15%、35%、48%和55%(P<0.05),染毒1 h后反而降低。染毒各时间点染毒浓度与ROS水平均存在剂量-效应关系(r=0.756、0.893、0.735、0.667和0.653,均P<0.05);相关性分析表明染毒24 h后ROS水平与细胞凋亡率呈明显正相关(r=0.826,P<0.05)。染毒8、24 h两个时间点,染毒浓度与Bcl-2、Bax m RNA表达量存在剂量效应关系(8 h:r=-0.634和0.754,24 h:r=-0.773和0.823,P<0.05);与对照组相比,染毒24 h后染毒浓度≥1.5 mmol/L时Bcl-2 m RNA和蛋白表达明显下调,而Bax m RNA和蛋白表达明显上调(P<0.05);相关性分析表明Bax m RNA表达与ROS水平具有正相关(r=0.886和0.824,P<0.05),而Bcl-2m RNA表达与ROS水平具有负相关(r=-0.862和-0.815,P<0.05)。与对照组相比,染毒24 h后染毒浓度2.5 mmol/L时细胞色素C、活化的Caspase-3和Caspase-9蛋白表达量显著增加,� 孟涛 苗盼盼 杨墨 贾强 戴宇飞关键词:氯乙酸 氧化应激 活性氧 凋亡 线粒体通路 氯乙烯接触工人肿瘤标志物水平 被引量:4 2017年 目的研究氯乙烯职业接触人群血清肿瘤标志物水平的变化,探讨不同肿瘤标志物的影响因素。方法选择唐山市某氯碱厂氯乙烯生产车间所有接触工人223人(接触组),无职业氯乙烯接触的其他单位行政办公人员149人(对照组),监测车间空气氯乙烯浓度,测定亚硫基二乙酸,检测血清中11项肿瘤标志物含量。结果接触组血清中的癌胚抗原(carcino-embryonic antigen,CEA)、甲胎蛋白(alphafetoprotein,AFP)、糖链抗原CA-199和CA72-4含量随着接触工龄的增加而增加,神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)含量随着接触工龄的增加而降低,但这5项肿瘤标志物与接触工龄均无相关性,差异无统计学意义(P>0.05)。经单因素分析发现,接触组亚硫基二乙酸水平高于对照组(Z=-16.178,P<0.001)。单因素分析结果显示,性别对CEA、AFP及NSE三项指标的含量均有影响(Z值分别为-4.815、-2.052和-4.535,P<0.05),而吸烟仅对CA-199产生影响(Z=-2.016,P<0.05),氯乙烯的接触对AFP和NSE有影响(Z=-3.763和-2.140,P<0.05)。多因素分析显示,与男性相比,女性体内的CEA与NSE含量降低(t值分别为-3.696和-5.722,P<0.05);氯乙烯接触是NSE的影响因素,与对照组相比其含量升高(t=2.061,P<0.05)。结论在目前的接触浓度下,接触氯乙烯可引起血清肿瘤标志物水平的变化。随着工人接触有害因素的时间增加,肿瘤标志物水平发生改变,机体发生肿瘤的可能性增加。亚硫基二乙酸水平与某些标志物可能存在一定的相关关系。不同肿瘤标志物的影响因素有所差异。 张晓星 张桂云 肖经纬 常志敏 闫玉洁 薛玲 刘楠 李斌 关维俊关键词:氯乙烯 肿瘤标志物 三氯乙醇和三氯乙酸在诱发三氯乙烯药疹样皮炎中的作用 被引量:1 2021年 [背景]三氯乙烯职业暴露是导致药疹样皮炎发病的主要原因,然而其代谢产物是否参与疾病的发生尚不明确。[目的]检测三氯乙烯的代谢产物三氯乙酸和三氯乙醇的致敏性,进一步探讨二者在诱发三氯乙烯药疹样皮炎(TIHD)中的作用。[方法]体外细胞研究通过培养人髓系白血病单核细胞株(THP-1),设置三氯乙酸和三氯乙醇染毒浓度为0、0.5、1.0、2.0、4.0 mmol·L^(-1),采用ELISA法检测上清中白细胞介素-8(IL-8)的表达水平;采用Western blotting法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达水平。人群研究分别设置三氯乙烯非接触对照组(20人)、三氯乙烯接触对照组(20人)、TIHD入院病例组(10人)和TIHD出院病例组(7人),共57人,利用淋巴细胞分离液分离其外周血单个核细胞后,加入0.5、2.0 mmol·L^(-1)的三氯乙酸和三氯乙醇进行染毒处理,利用CCK-8法检测外周血单个核细胞存活率。[结果]体外细胞研究结果:随着染毒剂量增高,三氯乙酸和三氯乙醇对THP-1细胞毒性逐渐增加,并且THP-1细胞IL-8表达水平逐渐增高,表现出剂量依赖性(相关分析,均P<0.05);与未染毒组相比,在1.0、2.0、4.0 mmol·L^(-1)染毒剂量下,三氯乙酸染毒组IL-8水平分别增加了116.30%、176.08%、541.18%,三氯乙醇染毒组IL-8水平分别增加了176.08%、366.70%、670.48%(P<0.05);Western blotting检测结果显示,与空白对照组相比,1.0、2.0、4.0 mmol·L^(-1)三氯乙酸组iNOS的表达水平分别增加了93.73%、87.08%、238.06%(P<0.05),1.0、2.0、4.0 mmol·L^(-1)三氯乙醇组iNOS的表达水平分别增加了95.99%、486.29%、735.72%(P<0.05)。人群研究结果显示:与非接触对照组相比,出院病例组外周血单个核细胞经0.5、2.0 mmol·L^(-1)三氯乙酸处理后细胞存活率分别增加了5.81%、5.64%(P<0.05);而在该组人群三氯乙醇处理后的细胞存活率变化未见统计学意义(P>0.05);同样,三氯乙烯接触对照组、入院病例组的外周血 伊梦楠 臧丹 易娟 刘帅 刘帅 王俊程 沈美丽 沈美丽 王婷 段化伟 戴宇飞关键词:三氯乙烯 三氯乙酸 致敏性 药疹样皮炎 应用2种风险评价方法评估某胶合板制造企业甲醛危害风险级别 被引量:19 2017年 目的比较2种风险评价方法对某胶合板制造企业不同工作岗位甲醛的职业健康危害风险分级结果。方法对山东省某胶合板制造企业进行现场职业卫生调查,检测工作场所甲醛水平。采用美国国家环境保护署(EPA)吸入风险模型(以下简称"EPA评价模型")进行甲醛的致癌风险评估,采用新加坡化学毒物职业暴露半定量风险模型(以下简称"MOM评价模型")进行甲醛的健康风险评估,比较两者的风险分级结果。结果削片、上料、制胶、热磨、热压、砂光及后处理岗位甲醛质量浓度分别为0.25、0.13、1.47、0.72、0.92和0.58 mg/m^3。EPA评价模型对上述6个工作岗位的致癌风险评估结果均为高致癌风险。MOM评价模型对于健康风险评估结果,在上料岗位为中等风险,在削片、热磨、热压、砂光及后处理岗位均为高风险,在制胶岗位为极高风险。结论胶合板生产过程中多个工作岗位存在较高水平的甲醛接触。EPA评价模型更适合用于甲醛的职业性致癌风险评估。 王庆荣 王艳华 刘宗伟 邱玉刚 纪乾鹏 王婷 张秀川 段化伟关键词:甲醛 风险评估 致癌风险 船舶工业企业噪声危害调查 被引量:7 2016年 目的分析船舶工业企业噪声危害特性、分布、危害程度和劳动者听力损失情况,为企业开展噪声治理及指导劳动者进行听力保护提供科学依据。方法选取3家规模以上船舶工业企业,采用与技术人员和职业卫生管理人员座谈的方式,了解生产工艺和基本情况,并对作业场所开展现场调查和个体噪声暴露剂量检测、频谱分析,对主要接触噪声的岗位工人进行纯音听力测试。结果船舶工业企业接噪岗位多,在检测的17个岗位中,除轮机检验工外,其余岗位个体噪声暴露剂量均超过85 d B(A),其中打磨工和冲砂工最为严重,其个体噪声暴露剂量达100 d B(A)左右,类型主要是高频噪声;主要接噪岗位工人的听力损失比例较高,达26.96%,其中打磨工和冲砂工的听力异常比例分别达37.88%和38.42%,且随着接噪工龄的增加,听力异常者比例不断增加,呈现明显的剂量-反应关系。结论船舶工业企业的噪声危害分布广、程度重,应及时采取工程控制措施和听力保护措施。 聂武 胡伟江关键词:噪声 听力损失