国家高技术研究发展计划(2011AA02A121)
- 作品数：4 被引量：19H指数：2
- 相关作者：府伟灵黄庆王欢杨昭黄君富更多>>
- 相关机构：第三军医大学西南医院中国人民解放军第324医院第三军医大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划重庆市自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 铜绿假单胞菌OprD2基因环介导等温扩增快速检测技术的研究被引量：9
- 2013年
- 目的建立肉眼直接判读检测结果的铜绿假单胞菌OprD2耐药基因环介导等温扩增（LAMP）快速检测方法。方法对2011年12月至2012年6月西南医院微生物室收集的47株铜绿假单胞菌标本进行前瞻性研究。利用LAMP针对铜绿假单胞菌OprD2耐药基因设计两对引物，特异性识别OprD2的6个独立区域来快速扩增。通过在LAMP反应体系中加入核酸染料羟基萘酚蓝（HNB），建立可直接用肉眼判读检测结果的LAMP反应体系，并用该方法检测和分析47株铜绿假单胞菌OprD2耐药基因的分布情况及其与抗生素耐受性的相关性。结果设计出针对铜绿假单胞菌OprD2耐药基因可直接肉眼判读结果的恒温扩增检测方法，其检测体系的灵敏度为17．414μg／L，比常规PCR方法（灵敏度：174．14μg／L）高10倍。49％（23／47）的菌株OprD2基因缺失，OprD2基因缺失株的头孢噻肟、左氧氟沙星、氨曲南、哌拉西林、亚胺培南和美罗培南耐药率分别为100％（23／23）、57％（13／23）、48％（11／23）、48％（11／23）、48％（11／23）和43％（10／23）。与OprD2基因阳性株相比，OprD2基因缺失株的亚胺培南、左氧氟沙星和美罗培南耐药比例明显升高，差异有统计学意义（χ2值分别为9．155、4．846、4．037，P值分别为0．002、0．028、0．045）。结论建立了可直接肉眼判读检测结果的铜绿假单胞菌OprD2耐药基因LAMP快速技术。OprD2基因缺失导致铜绿假单胞菌以亚胺培南为主的耐药，因此明确OprD2基因分布状况有助于临床抗菌药物的选用。
- 王欢黄庆黄君富夏涵杨昭府伟灵
- 关键词：假单胞菌铜绿抗药性细菌
- 利用野生抑制探针提升对BRAF V600E基因痕量突变检测的研究和临床应用
- 2018年
- 目的 BRAF V600E基因痕量突变的筛查可以避免肿瘤患者无效治疗的情况出现。方法用内部竞争性扩增片段提高野生抑制型(WTB)探针对野生型BRAF V600E基因的抑制,提高发生痕量突变的BRAF V600E基因型的检出率。结果当模板DNA浓度在50~200ng/μL时,构建的痕量基因突变实时荧光定量检测方法能够完全屏蔽BRAF V600E野生型基因扩增。该检测方法的灵敏度可以达到0.1%,符合基因痕量突变检测技术灵敏度的要求。在50例疑似结直肠癌患者的结直肠镜活检组织中,构建的该方法检测到BRAF V600E基因痕量突变的标本为8例(16.0%),具备较高的检出率。结论构建的基因痕量突变的检测方法能够对临床标本中BRAF V600E基因痕量突变做快速、简便、低成本的定量分析。
- 彭佳朱川魏昆黄庆府伟灵
- 关键词：BRAF锁核酸
- 分子诊断与个体化医疗被引量：10
- 2012年
- 临床医学研究结果表明,药物不良反应占全球主要死亡原因的第4～6位。我国因药物不良反应的住院人数高达250万/年,死亡人数达20万/年。药物遗传学和药物基因组学的研究结果表明,药物代谢相关的酶、药物结合相关的受体、药物转运相关的膜通道、信号传导相关蛋白的编码基因的遗传变异与药物不良反应密切相关。随着分子诊断学的飞速发展,目前,已经有可能在临床上广泛开展预测药物不良反应个体化医学的多项分子诊断项目。本文以CYP2C19和EGFR为例,阐述现有的个体化医疗相关分子诊断项目现状,并展望个体化医疗分子诊断在检验医学领域的发展。
- 府伟灵黄庆
- 关键词：分子诊断个体化治疗药物基因组学药物遗传学
- 核酸快速提取、等温扩增、多重靶标检测、高通量SNP分型等关键技术的研究与应用
- 2015年
- 该课题是国家863计划生物和医药技术领域“体外诊断技术产品开发”项目课题之一。本课题立足于突破核酸诊断领域的知识产权壁垒，着眼于核酸诊断领域的原始技术创新和科研成果产业化，课题申请单位第三军医大学与与课题合作单位四川大学华西医院、广东凯普生物科技股份有限公司、珠海丽珠试剂股份有限公司两家核酸诊断领域知名企业强强联合，
- 府伟灵
- 关键词：SNP分型核酸高通量国家863计划等温
