中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(DWS201213)
- 作品数：4 被引量：13H指数：3
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- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院中国医学科学院卫生部更多>>
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- 超声波均质化对仙台病毒ELISA测试中抗原稳定性的影响
- 2012年
- 目的研究超声波均质化(homogenization)处理对于仙台病毒在ELISA测试中抗原稳定性的影响。方法对BHK-21细胞内扩增培养的仙台病毒通过差速离心,富集后使用超声波做均质化处理,和未处理的病毒分别包被酶标板,使用标准免疫小鼠血清和SPF小鼠血清对包被平板进行测试,比较样品测试孔间测量数据的变异率。结果对免疫血清做梯度稀释,各梯度样品在未经超声处理仙台病毒抗原包被ELISA检测中测量值的变异率在1.97%～6.02%之间;在经超声处理仙台病毒抗原包被ELISA检测中测量值的变异率在0.53%～2.26%之间;SPF血清测量值的变异率均高于免疫血清;所有样品在经超声处理的病毒抗原包被ELISA检测中测量值的变异率均较小。结论超声波处理有效的提高了仙台病毒抗原的均质性,在ELISA测试中提高了抗原的稳定性。
- 向志光刘先菊佟巍李雨函张丽芳魏强
- 关键词：仙台病毒超声波小鼠
- 国内外实验动物病毒检测的比较被引量：4
- 2012年
- 实验动物病毒学检测项目、检测方法、检测频率等在实际应用中仍存在诸多问题。本文简要介绍国内外常用实验动物病毒检测的内容和方法。结合目前我国实验动物病毒检测实际工作中值得关注的问题提出建议。
- 佟巍
- 关键词：病毒检测实验动物
- 小鼠仙台病毒ELISA抗体检测规范化试剂盒的研制与应用被引量：3
- 2012年
- 目的按照实验动物国家标准和农业部对于兽医诊断制品的要求研制小鼠仙台病毒抗体检测试剂盒,并在临床检测中分析其适用性。方法建立仙台病毒的种子批和BHK-21细胞的细胞库;标化仙台病毒生产工艺、抗原蛋白纯化工艺;优化ELISA反应板体系;标化质控血清。使用规范化的ELISA试剂盒对我单位672份送检血清样品进行检测,使用IFA和Western blot方法进行复检。结果病毒的种子批检验表明在-80℃保存半年以上毒力稳定;病毒生产和抗原纯化工艺的标准化提高了抗原生产的稳定性;对照体系的设定降低了环境等变量对于结果判定的影响。在对临床样本的检测过程中发现3种方法的灵敏度ELISA高于Western blot高于IFA。结论规范化的小鼠仙台病毒ELISA抗体检测试剂盒能对小鼠仙台病毒感染状况作出准确判断,具有一定的稳定性和结果可重复性。
- 向志光佟巍刘先菊张丽芳李雨函王艳蓉刘云波魏强
- 关键词：小鼠仙台病毒ELISA
- 大鼠仙台病毒ELISA、间接免疫荧光和免疫印迹三种检测方法比较被引量：7
- 2013年
- 目的比较ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)、IFA(immuno-fluorescence assay)和WB(Western blot)三种方法在大鼠仙台病毒血清学检测中的差异。方法仙台病毒蛋白抗原经凝胶电泳分离转移后用于血清学检测的WB方法;使用IFA、ELISA方法对20份无菌大鼠、227份SPF大鼠以及63份清洁级大鼠送检血清样品进行检测,阳性及可疑样品用WB方法进行了验证。结果 20份无菌大鼠血清样品被3种方法检测为仙台病毒抗体阴性;SPF级大鼠样品被IFA方法判定为阴性,1.32%(3/227)被ELISA方法判定为阳性,其中有2/3被WB确认为阳性;ELISA、IFA和WB在清洁级大鼠样品中检出仙台病毒的阳性率分别为为18.12%、11.34%和15.87%。结论三种检测方法灵敏度从高到低依次为ELISA、WB和IFA。WB方法可作为IFA和ELISA难以确定结果的替代方法。
- 向志光佟巍李雨函刘先菊张丽芳王艳蓉魏强
- 关键词：仙台病毒ELISA
