广西研究生教育创新计划项目(2007105981002M19)
- 作品数:2 被引量:0H指数:0
- 相关作者:李力黎丹戎唐步坚朱小东张玮更多>>
- 相关机构:广西医科大学附属肿瘤医院广西医科大学更多>>
- 发文基金:广西研究生教育创新计划项目广西医疗卫生重点科研课题广西壮族自治区科学研究与技术开发计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- CUL5基因的RNA干扰真核表达载体的构建
- 2010年
- 目的:构建CUL5基因的RNA干扰真核表达载体,探索CUL5在鼻咽癌放射治疗中加速再增殖的作用。方法:根据GenBank数据库提供的CUL5基因mRNA序列,按照Tuschl设计原则,设计选择双链小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),再设计合成为能表达其小发卡结构RNA(small hairpin RNAs,shRNA)的DNA序列,并与pGPU6/GFP/Neo质粒定向连接,构建真核表达载体,并进行限制性内切酶酶切和DNA测序鉴定。结果:经限制性内切酶酶切和DNA测序证实质粒中插入的为所需序列,通过RT-PCR证实其能够干扰CNE2细胞的CUL5基因表达。结论:CUL5基因RNA干扰真核细胞表达载体的构建成功。
- 李烨朱小东曲颂李力唐步坚黎丹戎张玮李龄苏芳
- 关键词:RNA干扰真核表达载体
- 抑制CDC25A表达的siRNA真核表达载体的构建
- 2009年
- 目的在哺乳动物细胞中构建并鉴定抑制CDC25A表达的siRNA真核表达载体。方法根据CDC25A的基因序列,设计特异性的siRNA,将合成的siRNA核酸片段退火形成双链后连接到经Bam HI和HindⅢ双酶切后的psilencer4.1真核表达载体,命名为psilencer4.1-CDC25A以及psilencer4.1-Control,并进行酶切及测序鉴定。结果通过酶切鉴定和序列测定,成功地构建出抑制CDC25A表达的siRNA载体及其阴性对照载体。结论成功构建和验证了siRNA真核表达载体,为下一步研究奠定了良好的基础。
- 朱小东李相德曲颂李龄黎丹戎张玮李力唐步坚
- 关键词:CDC25ASIRNA