刘柱
所属机构: 海南大学 所在地区: 海南省 海口市 研究方向: 农业科学 发文基金: 国家自然科学基金
相关作者
马香 作品数:69 被引量:11 H指数:2 供职机构:海南大学 研究主题:维氏气单胞菌 芽孢杆菌 赖氨酸 气单胞菌 开发方法 唐燕琼 作品数:127 被引量:394 H指数:12 供职机构:海南大学 研究主题:维氏气单胞菌 柱花草 芽孢杆菌 赖氨酸 气单胞菌 李宏 作品数:50 被引量:15 H指数:2 供职机构:海南大学 研究主题:维氏气单胞菌 芽孢杆菌 赖氨酸 合成生物学 底盘 胡新文 作品数:198 被引量:986 H指数:16 供职机构:海南大学 研究主题:木薯 马槟榔 维氏气单胞菌 油茶 开发方法 王丹 作品数:51 被引量:11 H指数:2 供职机构:海南大学 研究主题:维氏气单胞菌 玻璃粉末 芽孢杆菌 赖氨酸 开发方法
海绵共生链霉菌及其发酵生产星形孢菌素的方法和应用 本发明涉及一株海绵共生链霉菌SP6206,属于海绵共生链霉菌发酵领域,所述海绵共生链霉菌SP6206的保藏编号为CCTCCM2017451。本发明还公开了所述的海绵共生链霉菌SP6206发酵生产星形孢菌素中的方法,包括以... 黄小龙 黄东益 周双清 许云 吴文嫱 刘柱 郑继平 陶琳基于特异性序列的维氏气单胞菌检测引物、试剂盒、检测方法及其开发方法 本发明涉及用于检测维氏气单胞菌的引物对,所述引物对的正向引物的核苷酸序列选自SEQ ID NO.1和/或SEQ ID NO.3,所述引物对的反向引物的核苷酸序列选自SEQ ID NO.2和/或SEQ ID NO.4。本发... 马香 刘柱 唐燕琼 唐鸿倩 胡新文 王丹文献传递 氧化胁迫下维氏气单胞菌qPCR内参基因筛选 被引量:1 2022年 [目的]筛选氧化应激胁迫下用于检测维氏气单胞菌基因变化的稳定实时荧光定量PCR(RT-qPCR)内参基因。[方法]选取16S rRNA、gyrB、recA、tmRNA、GAPDH作为候选内参基因,通过RT-qPCR方法检测其在维氏气单胞菌经不同浓度过氧化氢(H_(2)O_(2))溶液处理后的表达情况;利用NormFinder和BestKeeper对候选基因表达稳定性进行分析。[结果]在不同浓度H_(2)O_(2)溶液处理下,维氏气单胞菌中候选内参基因Ct值最稳定的是16S rRNA、GAPDH和tmRNA,分别约为14、30和22;NormFinder软件分析表达最稳定的内参基因是gyrB、GAPDH和16S rRNA,稳定值M分别为0.38、0.38和0.46;BestKeeper软件分析表达最稳定的内参基因是16S rRNA和GAPDH,P值分别为0.023和0.001,标准差分别为0.52和0.54,变异系数分别为3.81和1.83,相关系数分别为0.337和0.520。[结论]16S rRNA和GAPDH的Ct值稳定,NormFinder分析其稳定值低,稳定性好,BestKeeper显示16S rRNA和GAPDH的P值、标准差均符合要求,16S rRNA和GAPDH可作为氧化应激条件下进行维氏气单胞菌qPCR检测的内参基因。 孙灵敏 唐燕琼 李宏 李娟娟 刘柱 马香关键词:维氏气单胞菌 内参基因 GAPDH 一种维氏气单胞菌减毒菌株的构建方法、菌株及其应用 本发明涉及一种维氏气单胞菌,于2019年7月24日保藏于中国典型培养物保藏中心,简称CCTCC,保藏编号为CCTCC NO:M 2019580。本申请的维氏单胞菌突变菌株的毒力大幅下降,达到了良好的减毒效果,为制作维氏气... 李宏 徐一轲 刘柱 马香 唐燕琼 盛强龙 孙愉宸文献传递 Flag-ALD融合载体构建及蛋白表达 被引量:1 2020年 维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)是感染鱼类的最常见致病菌之一,为了解维氏气单胞菌中丙氨酸脱氢酶(alanine dehydrogenase,ALD,EC 1.4.1.1)的调控功能,笔者通过分子克隆获得Flag-ALD融合表达载体,并在大肠杆菌中大量表达该蛋白。即以维氏气单胞菌C4基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增获得N端带有Flag标签的ald基因,将带有标签的目的基因与原核表达载体pACYCDuet连接,并将重组质粒pACYCDuet-Flag-ald转化到大肠杆菌(E.coli)BL21中。添加异丙基-β-D-1-硫代半乳糖吡喃糖苷(Isopropylbeta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导重组蛋白大量表达。SDS-PAGE分离与Western blot结果表明,来源于维氏气单胞菌的Flag-ALD重组蛋白在E.coli中以可溶性形式成功表达。本实验构建的Flag标记靶标蛋白可为研究丙氨酸脱氢酶在维氏气单胞菌中的功能以及在生物抑菌剂方面的应用提供技术支持。 曹欣 唐燕琼 李宏 马香 刘柱关键词:丙氨酸脱氢酶 基因克隆 重组质粒 蛋白表达 维氏气单胞菌tmRNA以sRNA形式特异调控的下游靶标筛选和鉴定 2024年 转移-信使RNA(transfer-message RNA,tmRNA)是细菌中普遍存在的稳定非编码sRNA,同时具备tRNA和mRNA双重特性,主要介导反式翻译核糖体拯救机制,对病原菌致病性和胁迫响应具有重要影响。【目的】从tmRNA功能研究入手,揭示对水产养殖和人类公共安全造成严重危害的维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)的致病分子机制。【方法】采用生物学信息学工具IntaRNA2.0对维氏气单胞菌tmRNA可能结合的下游靶标进行预测,通过基因本体论(geneontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析,鉴定预测靶标参与的生物学过程及信号通路,并使用qPCR技术验证候选靶标基因在维氏气单胞菌野生型、tmRNA敲除株和smpB敲除株中的表达情况,以初步鉴定维氏气单胞菌tmRNA以sRNA形式调控的潜在下游靶标。【结果】tmRNA可以sRNA形式与下游100个潜在特异性靶标结合,这些靶标基因主要结合于tmRNA的3′端tRNA样结构域(tRNA-likedomain,TLD)、H2域及PK3、PK4域,参与细菌基本代谢过程。qPCR结果表明,在特异性结合的靶标基因中,基因WP_201994931.1以SmpB非依赖的方式受到tmRNA调节;WP_201954220.1、WP_005335875.1、WP_265062582.1、WP_265061484.1和WP_265061494.1等基因的表达则受到SmpB蛋白调控。【结论】本研究初步鉴定基因WP_201994931.1有可能是tmRNA作为sRNA调控的下游靶标,对拓展tmRNA功能研究领域有一定指导作用,有助于后续进一步探究维氏气单胞菌的致病和环境适应等重要生命活动的分子机制。 童园 罗宸 柏泰鹏 唐燕琼 刘柱 马香关键词:维氏气单胞菌 TMRNA SRNA 一种耐硼赖氨酸芽孢杆菌作为底盘细胞制备的槟榔根腐病杀菌剂 本发明涉及耐硼赖氨酸芽孢杆菌在抑制槟榔根腐病菌(Cerrena unicolor)生长方面的应用。耐硼赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus boronitolerans)不仅可以很大程度上降低槟榔根腐病的发生,而... 李宏 高玉晓 刘柱 马香 唐燕琼 晏承梁 雷军霞 林敏一种纳米复合体及其应用 本申请涉及一种纳米分子复合体,包括:沸石咪唑酯骨架ZIF‑8;以及吡啶硫酮(PT);其中,所述吡啶硫酮(PT)负载于沸石咪唑酯骨架ZIF‑8。本申请的纳米抗菌剂以纳米材料为载体,结合双重抗菌机理,可靶向细菌感染等部位,具... 李娟娟 严云香 刘柱 唐燕琼 马香 李宏基于特异性序列的维氏气单胞菌检测引物、试剂盒、检测方法及其开发方法 本发明涉及用于检测维氏气单胞菌的引物对,所述引物对的正向引物的核苷酸序列选自SEQ ID NO.1或由SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或几个核苷酸后产生的核苷酸序列,所述引物对的反向引物的... 王丹 刘柱 唐燕琼 唐鸿倩 胡新文 马香一种耐硼赖氨酸芽孢杆菌作为底盘细胞制备的稻瘟病杀菌剂 本发明涉及耐硼赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus boronitolerans)在抑制稻瘟病菌(Magnaporthe oryzea)生长的应用。耐硼赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus boronit... 刘柱 晏承梁 马香 唐燕琼 李宏 高玉晓 林敏文献传递