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欧会林
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- 所属机构:浙江大学
- 所在地区:浙江省 杭州市
- 研究方向:医药卫生
- 发文基金:卫生部科学研究基金
相关作者
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- 欧会林
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- 朱铁培欧会林章征马进
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- 李兰娟陈科达余东山吴晓鑫张严峻欧会林
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- 缺氧及血管内皮生长因子对视网膜色素上皮细胞Opticin蛋白表达的影响
- 2011年
- 目的探讨缺氧及血管内皮生长因子（VEGF）对视网膜色素上皮（RPE）细胞Opticin蛋白表达的影响及其内在机制。方法实验研究。原代培养人眼RPE细胞，取生长良好的第3～6代细胞，接种于含DMEM培养液的6孔板中，于缺氧条件下或加入不同浓度（1、10、50及100μg／L）VEGF进行培养。逆转录聚合酶链反应（PCR）检测缺氧后RPE细胞中VEGFmRNA的表达。蛋白印迹法检测细胞内和细胞培养液中Opticin蛋白含量。明胶酶谱法检测细胞培养液中明胶酶活性。组间检测数据比较采用单因素方差分析。结果蛋白印迹法检测，显示缺氧组RPE细胞内Opticin蛋白含量无明显变化；而RPE细胞培养液中，缺氧组Opticin蛋白含量明显下降。逆转录PCR检测，缺氧组12、24hVEGFmRNA表达灰度值分别为0．81±0．04、0．67±0．07，均较正常对照组VEGFmRNA表达灰度值（0．21±0．03）明显升高，差异有统计学意义（F=483．60，P〈0．05）。添加不同浓度的外源性VEGF后，RPE细胞内Opticin蛋白表达无明显变化；添加1、10、50及100μg／L的外源性VEGF后，RPE细胞培养液中，Opticin蛋白表达灰度值分别为0．65±0．02、0．52±0．04、0．23±0．03、0．30±0．03，均较正常对照组Opticin蛋白表达灰度值（0．73±0．04）明显下降（F=141．38，P〈0．05）。明胶酶谱法分析，显示与基质金属蛋白酶-2相对应的位置出现明显的消化条带，且酶的活性随VEGF浓度的增加而递增。低浓度的乙二胺四乙酸可抑制由VEGF引起的RPE细胞培养液中Opticin蛋白含量减少。结论缺氧及VEGF作用可影响RPE细胞培养液中Opticin蛋白分泌，可能与增多的基质金属蛋白酶-2对Opticin蛋白的酶解作用有关。
- 马进朱铁培张倩茹欧会林
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- OPTC-shRNA干扰对牛玻璃体细胞与视网膜色素上皮细胞共培养胶原凝胶收缩系统的影响
- 2013年
- 目的探讨抑制opticin蛋白表达对牛玻璃体细胞与视网膜色素上皮（RPE）细胞共培养胶原凝胶收缩系统的调控作用。方法实验研究。设计并转染OPTC-shRNA质粒至体外培养的牛RPE细胞，通过免疫印迹法检测转染后3、5、7dopticin蛋白的相对表达量和抑制率。在牛I型胶原凝胶内加入牛玻璃体细胞和RPE细胞，构建细胞共培养的胶原凝胶体外收缩模型。实验共分为6组：OPTC-shRNA质粒转染RPE及玻璃体细胞组（A组）、空质粒转染RPE及玻璃体细胞组（B组）、未转染RPE及玻璃体细胞组（c组）、仅含未转染RPE细胞组（D组）、仅含玻璃体细胞组（E组）以及不含任何细胞空白对照组（F组）。应用One—wayANOVA、SNK-q检验和单因素回归分析比较各组凝胶收缩差异，并分析A、B、C组玻璃体细胞数的差异对胶原凝胶收缩性状的影响。结果成功构建并转染了有显著抑制作用的OPTC—shRNA质粒至牛RPE细胞。免疫印迹法检测结果显示，opticin蛋白表达抑制率在转染后3、5、7d分别为（83．91±2．88）、（84．71±4．27）、（82．85±2．72）％，差异无统计学意义（F=1．15，P〉0．05）。胶原模型构建后3d，A、B、C组中不同密度（2×10^7、1×10^8、5×10^8个／L）亚组玻璃体细胞密度凝胶收缩率分别为A组：（23．52±2．08）、（56．00±1．02）、（61．62±1．73）％；B组：（16．56±2．01）、（36．41±1．33）、（49．56±1．75）％；C组：（15．75±1．37）、（37．45±1．14）、（48．45±1．97）％，D、E组凝胶收缩率分别为（12．18±0．95）、（10．95±0．93）％，F组未观察到凝胶收缩。在相同玻璃体细胞密度下A、B、C组间凝胶收缩性两两比较，2×10^7个／L细胞密度：A组与B组、A组与C组间差异有统计学意义（q=11．38、12．72，P值均〈0．05）；B组与C组间差异无统计学意义（q=1．34，P〉0．05）；1×10^8个／L细胞密度�
- 马进欧会林朱铁培
- 关键词：蛋白聚糖类细胞外基质蛋白质类色素上皮
- 频域相干光断层扫描定量分析视网膜大血管腔内直径变化及其与原发性高血压病的相关性
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- 目的探讨频域相干光断层扫描（SD—OCT）定量检测视网膜大血管腔内直径变化及其与原发性高血压的相关性。方法回顾性病例对照研究。对215例确诊的原发性高血压患者和210例正常血压对照者分别按年龄段分组，采用SD—OCT定量检测跟底视网膜大血管腔内直径变化，包括视网膜动脉腔内直径（RAIC）、静脉腔内直径（RVIC）及动静脉腔内直径比值（RAVICR）。患者与正常对照者各年龄组间检测数据比较采用t检验；再按患者不同血压值分组，进行多重比较的SNK检验；患者血压对视网膜大血管腔内直径的影响采用单因素方差分析；患者RAVICR与舒张压、收缩压、年龄等因素的相关性采用多元线性逐步回归分析。结果患者各年龄组（〈40、40～49、50—59、60～69、／〉70岁）RAIC分另0为（93．0±6．3）、（86．2±6．1）、（84．5±5．1）、（84．0±5．5）、（81．7±5．4）μm，RVIC分男4为（129．4±5．8）、（130．7±6．5）、（129．6±5．4）、（132．2±6．4）、（131．6±5．1）μm，RAVICR分另0为（0．720±0．07）、（0．661±0．06）、（0．653±0．04）、（0．637±0．06）、（0．621±0．05）μm，均较正常血压对照者检测值降低，差异有统计学意义（RAIC：t=-4．813，-10．893，-15．689，-8．811，-10．151；RAVICR：t=-3．276，-8．654，-13．470，-7．801，-9．210；P〈0．05）。高血压患者按收缩压分组，进行组间RAIC和RAVICR多重比较的SNK检验，显示140～149mmHg（1mmHg=0．133kPa）组与170～179mmHg组（q=9．46，10．61）、140～149mmHg组与≥180mmHg组（9=11．03，13．98）、150～159mmHg组与170—179mmHg组（g=8．13，8．82）、150～159mmHg组与≥180mmHg组（q=9．01，9．97）差异均有统计学意义（P〈0．05）；按舒张压分组进行组间RAIC和RAVICR多重比较的SNK检验，显示90～99mmHg组与100～109mmHg组（q=6．79，5．95）、90～99mmHg组�
- 马进童毓华欧会林朱铁培
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- 玻璃体细胞的研究现状
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- 欧会林马进
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- 目的:探讨抑制opticin蛋白表达对牛玻璃体细胞与视网膜色素上皮（RPE）细胞共培养胶原凝胶收缩系统的调控作用。
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- 欧会林
- 关键词：视网膜色素上皮细胞胶原凝胶蛋白表达
